DIS3基因在肿瘤中的研究进展

随着医学诊治技术的发展,较多的肿瘤将从基因层面进行分析。DIS3蛋白是一种保守的核糖核酸酶,作为外泌体的催化亚基在细胞核与细胞质RNA加工降解过程中起重要作用。研究显示DIS3基因的异常表达与多种肿瘤发生发展相关,在多发性骨髓瘤患者中检出DIS3基因突变的频率较高。DIS3基因及其功能蛋白的结构和生理作用相对清晰,但是DIS3基因突变与肿瘤的相关性还未探究清楚。本文将对DIS3的结构、分型、同系物DIS3L2和DIS3的部分生理功能,以及DIS3在肿瘤中的研究进展作一综述。

一株对3种碳青霉烯类抗菌药物均耐药的肺炎克雷伯菌耐药机制研究

目的研究临床分离的一株肺炎克雷伯菌(K30)对碳青霉烯类抗菌药物耐药的机制。方法采用琼脂稀释法测定肺炎克雷伯菌K30对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;聚合酶链反应(PCR)检测A类碳青霉烯酶(KPC)、B类碳青霉烯酶(NDM、IMP、VIM、SIM)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs,CTX、TEM、SHV)、头孢菌素酶(AmpC,FOX、EBC、ACC、DHA、CIT、MOX)基因和Ⅰ类整合子;实时荧光定量PCR分析肺炎克雷伯菌膜孔蛋白基因ompK35、ompK36的mRNA表达;利用质粒接合试验研究肺炎克雷伯菌K30耐药基因的水平传播能力。结果药物敏感性试验显示,肺炎克雷伯菌K30对包括碳青霉烯类抗菌药物在内的11种抗菌药物均耐药,仅对头孢西丁钠中介,对阿米卡星敏感。肺炎克雷伯菌K30的改良Hodge试验为阳性。PCR扩增A类碳青霉烯酶基因KPC和2种ESBLs基因CTX、SHV为阳性,其PCR产物经测序后同GenBank数据库比对证实分别为KPC-2、CTX-M3和SHV-38。其余耐药基因和Ⅰ类整合子扩增均为阴性。与肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)相比,膜孔蛋白基因ompK35、ompK36的表达没有降低。质粒接合试验未成功获取结合子。结论临床分离的一株对碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌主要耐药机制与产A类碳青霉烯酶KPC-2合并产ESBLs有关,且KPC-2可能不由质粒介导。

医学检验专业实习生中存在的问题及教学探讨

医学检验专业是操作性很强的学科,实习教学是培养检验专业学生实际操作的重要部分。如何发现实习教学过程中的问题,并采取正确的措施加强实习教学,是培养合格和高素质检验人员的基础。

血清降钙素原定量检测与血培养结果比较研究

目的研究降钙素原（PCT）在诊断血流感染中的应用价值。方法采用回顾性研究,对四川省人民医院2013年1-2月200例同时进行PCT和血培养检测患者的资料进行分析。应用全自动连续检测系统BacT/Alert3D120进行血培养,Vitek-2微生物全自动分析仪对病原菌进行鉴定,mini-VIDAS全自动免疫荧光分析仪检测PCT。结果 PCT阳性率为78.5%,血培养阳性率为20.5%。与血培养结果比较,PCT敏感性和特异性分别为87.8%、23.9%,PCT阳性预测值和阴性预测值分别为22.9%、88.4%。结论 PCT对于血流感染的诊断具有一定的局限性,PCT对于排除血流感染有较好的参考价值。

高速离心消除脂血对肝功能项目检测干扰的分析

目的 观察高速离心前后脂血样本中9项肝功能结果的差异,分析高速离心是否能消除脂血对肝功能项目检测的影响。方法 随机收集50例脂血标本,经常规离心后用日立008全自动生化分析仪检测9项肝功能项目:总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)。经高速离心后吸弃上层乳糜微粒取下层清亮血清再次检测以上项目。比较高速离心前后结果的差异。结果 50例脂血标本TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL6项肝功能项目经高速离心后结果差异无统计学意义(P>0.01),而ALP、GGT、TBIL3项经高速离心处理后检测结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论 高速离心可以消除脂血对部分肝功能检测项目的影响。

应用改良Hodge试验检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的研究

目的应用改良Hodge试验(MHT)检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的应用价值。方法应用MHT检测对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的24株肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的情况。同时利用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶的基因,包括KPC、NDM、IMP、SIM和VIM,PCR阳性的产物测序结果与Gen Bank数据库进行比对。综合分析MHT和PCR检测碳青霉烯酶的效率。结果对碳青霉烯酶抗菌药物敏感性降低的24株肠杆菌科细菌应用MHT检测碳青霉烯酶的阳性菌株共为13株,而PCR检测出碳青霉烯酶基因的只有5株。且PCR产物测序结果经比对后证实1株为KPC-2和4株为IMP-4。对比分析MHT和PCR的检测结果可知有4株肠杆菌科细菌的MHT和PCR同时检测出碳青霉烯酶;有9株肠杆菌科细菌的MHT为阳性,但PCR没检测出碳青霉烯酶的基因;有1株肠杆菌科细菌MHT为阴性,但PCR检测出碳青霉烯酶的基因。结论 MHT作为筛查碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的准确性值得继续探讨。

应用EDTA协同法检测肠杆菌科细菌产金属β-内酰胺酶的研究

目的探讨应用EDTA协同法检测肠杆菌科细菌产金属β-内酰胺酶(MBL)的准确性,为临床快速筛查产MBL的肠杆菌科细菌提供简便的方法。方法对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的27株肠杆菌科细菌在M-H琼脂平板上用双纸片协同法检测其MBL,以EDTA.Na2为酶抑制剂,美罗培南为底物。同时利用聚合酶链反应(PCR)检测MBL的基因NDM-1A、NDM-1B、IMP、VIM和SIM,PCR扩增阳性的产物测序结果与GenBank数据库进行比对分析。结果对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的27株肠杆菌科细菌运用EDTA协同法检测MBL的阳性菌株为4株,与PCR检测MBL结果一致。且PCR产物测序结果经比对分析后证实均为IMP-4型MBL。结论 EDTA协同法检测肠杆菌科细菌产MBL方法简便、结果可靠,适用于临床对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的肠杆菌科细菌产MBL的快速筛查。

临床分离的产吲哚金黄杆菌耐药谱分析

目的分析本院临床分离的产吲哚金黄杆菌的药物敏感情况,指导临床合理用药。方法收集本院2012年1月-2013年12月期间临床分离的产吲哚金黄杆菌,采用法国生物梅里埃公司的全自动微生物分析仪VITEK-2进行菌株鉴定,以及VITEK-2配套药敏试验复合板进行药敏检测,分析其耐药谱。结果共收集了24株产吲哚金黄杆菌,且均呈现多重耐药谱。对碳青霉烯类抗生素亚胺培南的耐药率为95.8%。对头孢菌素类抗生素的耐药率很高,特别是对头孢唑林和头孢替坦的耐药率均为100%。对氨曲南的耐药率为100%,对磺胺类复方新诺明耐药率最低,为16.7%。结论本院分离的产吲哚金黄杆菌呈现多重耐药谱,对复方新诺明的敏感性最高。

临床分离洋葱伯克霍尔德菌的耐药谱分析

目的回顾性分析本院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的药物敏感情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法收集本院2015年7月至2016年6月临床分离的洋葱伯克霍尔德菌,采用法国生物梅里埃的微生物分析仪VITEK-2进行菌株鉴定,以及VITEK-2配套药敏试验板进行药敏试验检测,分析其耐药谱。结果共收集了30株洋葱伯克霍尔德菌,且均呈现多重耐药谱。对碳青霉烯类抗生素亚胺培南的耐药率为96.7%。对一代头孢菌素类抗生素头孢唑林的耐药率较高,为100.0%。对氨基糖苷类抗生素的耐药率均为96.7%。对氨苄西林和呋喃妥因的耐药率也高达100.0%。对三代(头孢他啶)和四代(头孢吡肟)头孢菌素类抗生素的敏感性较高,其敏感率分别为100.0%、96.7%。对复方制剂哌拉西林/他唑巴坦和复方新诺明的敏感性较高。结论本院分离的洋葱伯克霍尔德菌呈现多重耐药谱,需对其耐药机制进一步研究。

产吲哚金黄杆菌耐药性和耐药基因研究

目的本研究拟了解临床分离产吲哚金黄杆菌的耐药特性,检测其耐药基因分析耐药机制,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法收集四川省人民医院2013年10月至2015年2月临床分离的产吲哚金黄杆菌菌株,分析其耐药谱。利用聚合酶链反应(PCR)技术筛查其耐药基因,扩增阳性产物进行序列测定然后将其结果与GenBank数据库进行比对分析以确定其基因型。结果共收集到6株产吲哚金黄杆菌,6株菌株对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类等抗菌药物表现为耐药。耐药基因检测结果:5株细菌携带IND-2、IND-LIKE、CIA耐药基因;未检测到携带IND-1、IND-3、IND-4耐药基因的细菌。结论该院临床分离的产吲哚金黄杆菌表现为多重耐药,其耐药基因型以IND-2和CIA为常见。

利用SELDI-TOF-MS快速鉴定鲍曼不动杆菌的研究

目的利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术快速鉴定鲍曼不动杆菌。方法收集临床分离鉴定的鲍曼不动杆菌60株及对照菌160株,将其所有菌株分成训练组和验证组。运用SELDI-TOF-MS技术检测鲍曼不动杆菌和对照菌的蛋白表达,筛选鲍曼不动杆菌特征性蛋白。用Ciphergen Proteinchip软件自动采集数据,结果经BioMarker Wizard和Bio Marker Pattern分析建立分类树模型。利用该模型对20株鲍曼不动杆菌和51株非鲍曼不动杆菌进行盲法验证。结果在相对分子量3000～30000 Da范围内共检测到72个蛋白峰,其中具有统计学差异的蛋白峰有56个(P <0. 01)。Bio Marker Pattern软件判别分析,择优选出质荷比(M/Z)为1 6737. 8和5763. 61的蛋白质峰建立鲍曼不动杆菌分类树模型。盲法验证结果表明SELDI-TOF-MS对鲍曼不动杆菌诊断的灵敏性和特异性分别为85%(17/20)、100%(51/51)。结论利用SELDI-TOF-MS可快速鉴定鲍曼不动杆菌。

成都市786例0～6岁儿童全血微量元素检测结果分析

目的 了解成都地区0~6岁儿童微量元素的含量及在不同年龄段的变化情况。方法 采用BH5100T型原子吸收光谱仪对四川省人民医院2015年4~11月786例0~6岁体检儿童微量元素Cu、Zn、Ca、Mg、Fe进行检测,对检测结果进行统计学分析。结果 成都地区体检儿童微量元素Cu、Zn、Ca、Mg、Fe的缺乏率分别为0.4%、5.0%、18.1%、9.5%、8.3%,其中〈1岁、1岁、2岁、3岁和≥4岁儿童Ca的缺乏率分别为47.4%、27.5%、12.6%、9.9%、11.9%,可见〈1岁儿童Ca的缺乏率较高。各年龄组中Ca的缺乏率比较差异有统计学意义（P〈0.05）,各年龄组男女儿童几种微量元素的缺乏率均无性别差异。结论 成都地区0~6岁体检儿童微量元素异常率较高,其中Ca的缺乏率最高,同时Mg和Fe也较为缺乏。儿童微量元素含量与喂养习惯有密切关系,该地区的0~6岁儿童应注意微量元素的补充,尤其是Ca的补充,同时提倡母乳喂养。

表面增强激光解析电离飞行时间质谱快速鉴定血液大肠埃希菌感染

目的探讨用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)快速鉴定引起血流感染的大肠埃希菌。方法用SELDI-TOF-MS建立大肠埃希菌的蛋白质指纹模型。临床分离的168株菌经SELDI-TOF-MS检测,数据与大肠埃希菌模型进行相似度比较,对该模型进行评价。SELDI-TOF-MS检测88株微生物血培养分析仪阳性报警的革兰阴性杆菌,与大肠埃希菌蛋白质指纹模型进行相似度比较,对其中的大肠埃希菌进行鉴定。结果 19株建模组菌株经PCR及测序鉴定均为大肠埃希菌,并建立了该菌的蛋白质指纹模型;用168株验证组菌株对该模型进行验证,对大肠埃希菌鉴定的符合率为100%(60/60);用该模型对88株引起血流感染的革兰阴性杆菌进行鉴定,鉴定结果与传统微生物学鉴定结果具有较高的一致性(k=0.905)。结论 SELDI-TOF-MS可快速鉴定引起血流感染的大肠埃希菌,为血流感染细菌的快速诊断提供了新技术。

罗氟司特治疗支气管哮喘急性加重及对肺功能、血清学指标的影响

目的研究罗氟司特治疗支气管哮喘(BA)急性加重及对肺功能、血清学指标的影响。方法选取彭州市人民医院2017年7月至2020年6月收治的BA急性加重患者128例,按照随机数字表法分为罗氟司特组与对照组各64例。对照组给予常规治疗+布地奈德悬浊液治疗,罗氟司特组给予常规治疗+布地奈德悬浊液+罗氟司特治疗。连续治疗7天,观察两组治疗前后用力肺活量(FVC)、峰值呼气流速(PEF)、第一秒用力呼气容积(FEV1)等肺功能指标,气道壁面积占气道总截面积比例(WA%)、支气管管壁厚度和支气管外径比值(T/D)等气道重塑指标,血清γ-干扰素(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-17(IL-17)等炎性因子水平,血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等T细胞水平以及不良反应。结果治疗后,罗氟司特组FVC、PEF、FEV1及血清INF-γ、CD4+、CD4+/CD8+水平均高于对照组(P<0.05),WA%、T/D及血清TNF-α、IL-17、CD8+水平低于对照组(P<0.05)。罗氟司特组总有效率优于对照组(P<0.05)。两组均无严重不良反应。结论罗氟司特治疗BA急性加重可纠正机体炎性免疫失衡,抑制气道重塑,改善肺功能及血清学指标,提高疗效,安全可靠。

人乳头瘤病毒阳性阴道分泌物蛋白指纹图谱初步研究

目的对比分析人乳头瘤病毒(HPV)阳性和阴性阴道分泌物蛋白指纹图谱,探索HPV阳性阴道分泌物是否存在特定蛋白标志。方法运用蛋白指纹图谱(PBSⅡ-C型)技术及金芯片检测45例HPV阳性患者和44例HPV阴性对照者阴道分泌物蛋白指纹图谱,分析HPV阳性阴道分泌物特定表达的蛋白标志,筛选其中部分差异蛋白建立HPV测试模型并评价其检测效能。结果 HPV阳性和阴性对照者间共检测到41个蛋白峰,其中17个蛋白峰的差异有统计学意义(P<0.05)。筛选其中5个标志蛋白建立的模型对HPV的检测灵敏度和特异度分别为96.0%(24/25)和95.8%(23/24)。结论蛋白指纹图谱技术能有效检测阴道分泌物特定表达的蛋白,筛选的差异蛋白对诊断HPV感染具有潜在应用价值。

孕妇胎儿神经管缺陷易感性与MTHFR基因C667T位点突变、TYMS基因rs3819102位点突变及血清SAP水平的关系

目的研究孕妇胎儿神经管缺陷易感性与5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C667T位点突变、胸苷酸合成酶(TYMS)基因rs3819102位点突变及血清淀粉样P物质(SAP)水平的关系。方法前瞻性选择2017年12月至2019年12月在四川省雅安市人民医院产检的159例胎儿神经管缺陷的孕妇为观察组,159例胎儿健康的孕妇为对照组,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测并比较两组血清SAP水平,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)法对MTHFR基因C667T位点、TYMS基因rs3819102位点多态性进行检测分析,比较两组各位点的基因型和等位基因分布频率,采用Spearman相关性分析MTHFR基因C667T位点突变、TYMS基因rs3819102位点突变及血清SAP水平与孕妇胎儿神经管缺陷的相关性,采用Logistic回归分析孕妇胎儿神经管缺陷的危险因素。结果观察组血清SAP水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组MTHFR基因C667T位点的CC、CT、TT基因型频率及T、C等位基因频率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组TYMS基因rs3819102位点的AA、GG、AG基因型频率及A、G等位基因频率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清SAP水平与孕妇胎儿神经管缺陷呈负相关关系(r=-0.647,P<0.05);MTHFR基因C667T位点TT基因型频率及T等位基因频率与孕妇胎儿神经管缺陷呈正相关关系(r=0.205,P<0.05);TYMS基因rs3819102位点的GG基因型频率及G等位基因频率与孕妇胎儿神经管缺陷呈正相关关系(r=0.204,P<0.05);血清SAP低水平、MTHFR基因C667T位点T等位基因突变、TYMS基因rs3819102位点G等位基因突变是孕妇胎儿神经管缺陷的危险因素。结论血清SAP低水平、MTHFR基因C667T位点T等位基因突变、TYMS基因rs3819102位点G等位基因突变可能增加孕妇胎儿神经管缺陷易感性。

特应性皮炎患者接种新型冠状病毒疫苗的建议及依据

新型冠状病毒为新型冠状病毒感染的病因,疫苗接种可起到有效的防控作用。然而,部分特定人群尤其是慢性疾病和免疫紊乱的患者,对新型冠状病毒疫苗的接种持观望态度,即疫苗犹豫。特应性皮炎(AD)是一类与免疫紊乱相关的慢性炎症性皮肤病,目前没有明确的指南说明AD患者是否应该接种新型冠状病毒疫苗。本文整理了新型冠状病毒疫苗与AD患者症状间的交集,结合国内外AD患者接种疫苗的相关建议,以及对AD患者接种新型冠状病毒疫苗的回顾性调研,针对AD患者是否应该接种新型冠状病毒疫苗提出建议,旨在为医务工作人员和相关研究人员提供参考。

IL-6基因多态性对HBV相关ACLF患者短期预后的影响

目的研究白细胞介素6(IL-6)单核苷酸多态性(SNP)对慢加急性乙型肝炎肝衰竭(HBV-ACLF)患者短期预后的影响。方法2017年4月~2020年4月我院收治的HBV-ACLF患者134例,采用imLDR^(TM)多重SNP分型试剂盒检测血清IL-6基因rs1524107、rs2069837、rs2069840和rs2069845共4个位点的SNP分型,应用Gene Mapper 4.1软件进行原始数据的分析。结果在本组134例ACLF患者中,90 d生存99例(73.9%),死亡35例;死亡组血清总胆红素水平为(399.3±168.8)μmol/L,显著高于生存组[(285.9±121.5)μmol/L,P<0.05],凝血酶原时间国际标准化比值为(2.3±0.8),显著高于生存组[(1.7±0.4),P<0.05],而两组血清白蛋白、肌酐、降钙素原、白细胞计数和血小板计数比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-6基因rs1524107、rs2069837、rs2069840和rs2069845位点分布情况均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05),具有群体代表性;两组IL-6基因rs1524107、rs2069837、rs2069840和rs2069845位点基因型频数分布比较差异无统计学意义(P>0.05),两组IL-6基因rs1524107、rs2069837、rs2069840和rs2069845位点等位基因频数分布比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论在HBV-ACLF生存与死亡患者,血清IL-6基因位点SNP分布无显著性差异,因此该检测不能预测患者预后,可根据其他常用的指标预测。

多药耐药肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶基因分析

目的：研究临床分离的多药耐药肠杆菌科细菌产超广谱β‐内酰胺酶（ESBLs）基因型，为临床治疗产ES‐BLs的肠杆菌科细菌提供依据。方法收集2011年5月－2012年5月临床分离的27株肠杆菌科细菌，运用VITEK‐2药敏试验复合板进行药敏试验，分析其耐药性，利用聚合酶链反应（PCR）技术扩增 ESBLs 基因blaCTX、blaTEM和blaSHV ；测序结果与GenBank数据库进行比对分析，以确定ESBLs的主要基因亚型。结果27株肠杆菌科细菌均呈现多药耐药性，其对头孢菌素类、青霉素类和碳青霉烯类的耐药率为40．7％-100．0％；PCR扩增出18株细菌携带2种以上ESBLs基因，6株携带1种ESBLs基因，有3株细菌未检测到ESBLs基因；ESBLs基因亚型主要为 blaCTX‐M‐3、blaTEM‐1和blaSHV‐12。结论医院多药耐药的肠杆菌科细菌产ESBLs基因较普遍，其主要亚型为 blaCTX‐M‐3、blaTEM‐1和blaSHV‐12。

利用Au蛋白芯片技术快速鉴定铜绿假单胞菌的研究

目的利用Au蛋白芯片建立铜绿假单胞菌蛋白指纹图谱诊断模型，为铜绿假单胞菌感染快速鉴定奠定基础。方法收集临床分离鉴定的铜绿假单胞菌64株及对照菌199株，随机分成训练组和验证组。运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术及Au蛋白芯片（proteinchip goldenarray）检测铜绿假单胞菌及对照菌的蛋白表达，用Ciphergen Proteinchip和BioMarker Wizard软件自动采集数据，筛选铜绿假单胞菌特征性蛋白。结果经BioMarker Patterns软件建立分类树模型。利用该模型对29株铜绿假单胞菌和64株对照菌进行盲法验证。结果在相对分子质量3000～20000范围内共检测到80个蛋白峰，其中具有统计学差异的蛋白峰58个（P〈0．01）。BioMarker Patterns软件判别分析，择优选出质荷比（M／Z）为14045．2的蛋白质峰建立铜绿假单胞菌分类树模型。验证结果表明其对铜绿假单胞菌诊断的灵敏度和特异度分别为96．55％（28／29）、100％（64／64）。结论利用Au蛋白芯片技术可快速鉴定铜绿假单胞菌。