利用藻酸盐与骨髓间充质干细胞及前列腺癌细胞混合培养:观察干细胞对癌细胞增殖速度及成簇大小的影响

背景:肿瘤外环境研究的模型主要集中在实验室细胞的二维培养与体外动物实验,缺乏三维立体模型的研究与构建。目的:体外模拟肿瘤骨转移的三维模型,并比较在有无骨髓间质干细胞时前列腺癌细胞的增殖速度与成簇大小以及成簇率。方法:清洁级SD大鼠2只用于提取骨髓间质干细胞。利用藻酸盐模拟骨髓微环境,将前列腺癌细胞与SD大鼠骨髓间质干细胞在藻酸钙中共培养。通过显微镜与组织切片观察细胞在模型中的生长情况。利用绿色荧光蛋白转染肿瘤细胞,通过培养在普通光及荧光显微镜下观察三维模型中肿瘤单克隆的生长扩增情况。结果与结论:有干细胞存在共培养的三维藻酸钙微环境中前列腺癌细胞的成簇速度、数量及成瘤率均较对照组高。对照组在7.75d、有干细胞的混合培养组在6.00d能形成单克隆细胞簇,10d后对照组瘤簇细胞计数为(95.13±11.63)个;有干细胞的混合培养组为(112.53±14.67)个,荧光细胞克隆形成率对照组为(77.10±6.85)%;有干细胞的混合培养组为(64.55±6.21)%;两者相比均有显著性意义。结果提示前列腺癌细胞与骨髓基质干细胞在藻酸钙微球环境中,有利于细胞增殖及成簇性发展。

Wallis腰椎弹性固定术治疗腰椎退变性腰痛疗效观察

目的观察Wallis棘突间动态稳定系统治疗腰椎退变性腰痛的疗效。方法 2007年10月～2008年12月共使用Wallis棘突间动态稳定系统治疗腰椎退变性腰痛患者37例,男27例,女10例,年龄19～75岁,平均48.0岁。手术开窗摘除突出的间盘,置入Wallis系统。对患者术前、术后1月、术后1年进行VAS及ODI评分。术后随访(12.1～25.4)月,平均(17.9±4.0)个月。结果 1例术后半年出现腰痛复发,保守治疗缓解。VAS及ODI术前评分(7.8±1.0)分,(77.9±4.8)%;术后1月评分(1.6±1.0)分,(24.2±4.6)%;术后1年评分(0.8±0.7)分,(13.0±3.8)%。运用SPSS13.0分析,P<0.01,改善均具有统计学意义。结论 Wallis系统作为一种弹性固定系统,能够保留固定节段一定的活动度,维持腰椎稳定,预防临近节段退变,是治疗腰椎退变性腰痛的有效手段。

腰椎间盘突出症再手术原因分析及对策

目的通过分析腰椎间盘突出症再手术的主要原因，探讨其相关因素，以期达到降低再手术率的目的，探讨再手术的指征、方式及效果。方法回顾我院自2004年9月至2007年2月手术治疗腰椎间盘突出症666例中再手术者43例（6．46％），分析再手术的原因及效果。结果原位复发30例（69．77％），是再手术最主要的原因。19例再次开窗椎间盘切除，18例手术效果优良。结论腰椎间盘突出症手术应严格掌握适应证，彻底摘除突出的组织，对可能突出的组织做相应处理。控制好再手术指征，提高操作技巧，仍能获得良好疗效。再手术时，重复的椎间盘切除仍然有效。

铜死亡相关基因在甲状腺乳头状癌组织中的表达和临床意义

目的探讨铜死亡相关基因(CRGs)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达,并探索其在PTC预后中的潜在价值。方法UCSC数据库下载来源于癌症基因组图谱数据库(TCGA)中TCGA-THCA数据集的转录组数据及对应临床信息,并结合TCGA泛癌临床资料数据集的随访信息。通过基因差异性分析和Cox回归分析筛选出与PTC疾病无进展生存期(PFS)相关的CRGs。采用Wilcoxon秩和检验分析该基因在PTC组织和癌旁组织之间的差异表达和该基因与临床特征的关系,进一步使用Cox回归分析该基因与PTC患者PFS的相关性。最后对该基因进行基因集富集分析(GSEA)。结果本研究从UCSC数据库筛选纳入PTC患者424例。最终识别出在PTC中2个上调的CRGs基因(赖氨酰氧化酶样蛋白和周期蛋白依赖激酶抑制因子2A基因)和3个下调的CRGs基因[铜蓝蛋白、血管内皮生长因子A和铁氧还蛋白1(FDX1)基因]。Cox单因素分析筛选出与PFS相关的1个CRGs基因FDX1。FDX1在PTC组织中显著低表达(P<0.001),表达水平与伴有腺体外侵犯(P<0.001)、较高的T分期(P<0.001)和有淋巴结转移(P<0.001)有关。FDX1与PTC患者的预后呈正相关(P<0.001),FDX1低表达组有更高的疾病进展风险。Cox回归分析显示,FDX1是PTC患者PFS的独立预后指标(P=0.002)。GSEA结果显示在低表达表型中,P53途径和DNA复制均呈差异富集。结论FDX1是与PTC患者PFS相关的CRGs,与PTC预后密切相关,为该肿瘤的治疗和预后监测提供了新的方向和证据。

新一代喹诺酮类盐酸莫西沙星的合成及应用研究进展

盐酸莫西沙星是广谱和具有抗菌活性的8-甲氧基氟喹诺酮类抗菌药,综述了近年来其合成方法及用于治疗社区获得性肺炎、慢性支气管炎急性发作、泌尿生殖系感染、急性鼻窦炎等的临床应用情况。结果表明,莫西沙星作为第四代氟喹诺酮类药物无论在药动性、安全性、抗菌活性,还是在抗菌谱和应用方面均是最好的。

联合入路双钢板内固定治疗Schatzker V、 VI型胫骨平台骨折的临床疗效分析

目的探讨联合入路双钢板内固定治疗Schatzker V、VI型胫骨平台骨折患者的手术疗效。方法 2015年3月—2017年5月华中科技大学同济医学院附属同济医院创伤中心手术治疗的Schatzker V、VI型胫骨平台骨折患者共49例,男性35例,女性14例;年龄26～67岁,平均43.2岁。所有患者采用联合入路双钢板内固定手术治疗,观察患者手术时间、术中出血量、术后并发症、骨折愈合时间及伤肢纽约特种外科医院(HSS)膝关节功能评分情况。结果 49例患者,手术平均时间(95.7±15.5)min,手术平均出血(262.9±33.2)mL,骨折平均愈合时间(4.5±1.6)个月。膝关节不稳2例,无伤口感染、骨折不愈合、畸形愈合病例。术后均门诊随访1年,术后1年伤肢采用HSS膝关节功能评分:优21例,良19例,中7例,差2例,术后膝关节优良率81.63%,术后膝关节功能较术前具有统计学意义(P<0.05)。结论采用联合入路双钢板内固定治疗Schatzker V、VI型胫骨平台骨折,固定稳定性较高,术后并发症较少,术后膝关节功能恢复率较高。

骨髓增生异常综合征患者血红素加氧酶表达水平及其临床意义

目的观察初诊低危骨髓增生异常综合征(MDS)患者血红素加氧酶-1(HO-1)表达水平的变化及其基础水平与患者预后的关系,探讨HO-1在该病中可能的作用机制和临床应用前景。方法收集60例初诊低危MDS患者以及20例缺铁性贫血(IDA)患者的骨髓单个核细胞(BMMNCs),予不同浓度(0、5、10、20μM)的HO-1诱导剂Hemin体外孵育,用蛋白免疫印迹法检测HO-1蛋白表达水平和MAPK信号通路中c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化表达水平的变化,并随访分析HO-1的基础表达水平与患者无进展生存期(PFS)的关系。结果①低危MDS患者BMMNCs中HO-1蛋白基础表达水平与IDA患者比较差异无统计学意义(P>0.05);随着Hemin干预浓度的增加,HO-1蛋白表达量逐渐升高,JNK信号分子磷酸化表达水平亦逐渐升高,呈浓度依赖性(均为P<0.05);②HO-1高表达的患者PFS长于低表达患者组(中位数41.6个月vs.32.0个月,P=0.047)。COX回归分析显示HO-1表达水平是判断低危MDS患者预后的独立因素(P=0.006)。结论在低危MDS患者中,HO-1高表达者预后较好,HO-1可能通过JNK信号分子途径影响MDS的疾病过程。上调HO-1有可能成为改善疾病预后的新的治疗靶点。

OPN反义真核表达载体的构建及其对肾癌细胞增殖侵袭的影响

背景与目的:骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的过表达和多种恶性肿瘤的发展和转移密切相关,然而,在肾癌中OPN所扮演的角色尚未被清楚地阐明。为验证其作为肾癌基因治疗靶点的可行性,本研究通过构建获得OPN反义基因真核表达载体转染人肾癌ACHN细胞,观察其对人肾癌细胞增殖及侵袭的影响。方法:提取ACHN细胞总RNA,RT-PCR法扩增获得OPN目的片段,将其反向克隆到pcDNA3.1(-)质粒中构建OPN反义真核表达载体,并转染人肾癌ACHN细胞。采用半定量RT-PCR法和Western印迹法检测OPN mRNA及蛋白的表达情况;MTT法检测对细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡率的影响;软琼脂克隆形成实验和Transwell法分别检测细胞的增殖和侵袭能力。结果:RT-PCR检测OPN mRNA表达量结果显示,转染重组质粒细胞中的OPN mRNA的表达量为0.29±0.04,与转染空质粒细胞的0.86±0.05和未转染细胞的0.88±0.04相比,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法检测结果显示ACHN/OPN细胞的生长速度受到抑制;流式细胞检测结果显示ACHN/OPN细胞生长停滞于S期且凋亡率明显升高;软琼脂克隆形成实验及Transwell实验结果显示细胞的增殖和侵袭能力下降(P<0.05)。结论:OPN在肾癌ACHN细胞的增殖和侵袭过程中发挥了重要作用,反义OPN基因能抑制肾癌细胞的恶性表型。

实海浸泡条件下聚氨酯涂层的失效行为

目的在青岛市小麦岛试验站开展实海浸泡试验,探究聚氨酯涂层在实际服役过程中的失效行为。方法选用TS55-80聚氨酯涂层/Q235碳钢体系为试验样品,开展实海浸泡试验。从聚氨酯涂层的表面形貌、失光率、色差、涂层附着力、化学结构及涂层热稳定性等角度对聚氨酯涂层的失效行为进行研究。结果在实海浸泡条件下,聚氨酯涂层表面会出现明显的鼓泡和裂纹等缺陷,在浸泡6个月后的涂层表面可以观察到明显的腐蚀产物。随着浸泡时间的延长,涂层的化学结构发生了明显变化,涂层的热稳定性显著降低。在浸泡12个月后,聚氨酯涂层的失光率为69.9%,属于严重失光;涂层的色差达到3.20,属于轻微变色,涂层的附着力降至0.82 MPa,涂层与金属基体的结合强度大幅下降;聚氨酯涂层的阻抗值降至2.81×10^(3)Ω·cm^(2),说明涂层的防护性能基本丧失。结论在实海浸泡条件下,聚氨酯涂层中颜料颗粒的脱落会造成涂层表面孔隙数量的增加,这会加速海水中水和氧气等腐蚀性介质的渗透过程,使得涂层/金属界面处的电化学反应快速进行,导致涂层的防护性能快速下降。此外,聚氨酯链中氨基甲酸酯键的水解是造成聚氨酯涂层发生降解的主要原因。

卡维地洛的合成工艺研究进展

卡维地洛是一种治疗高血压病的第三代β受体阻滞剂,同时兼具有选择性?1受体阻滞剂作用,是一种大品种的高效抗高血压药物,但是在现有的制备方法中卡维地洛的收率较低。目前国内外对卡维地洛的合成报道较多,但是对卡维地洛制备工艺路线的综述鲜有报道。根据起始原料的不同可以分为多种合成路线,本文着重分析了氮上含保护基团的反应和氮上不含保护基团的两种反应类型,保护氮的方式可通过分子间亲核取代反应引入苄基等保护基团和通过分子内反应形成环酰胺结构保护氮。通过分析及优化,指出以中间体4-羟基咔唑作为起始原料的反应,可以有效避免多种副产物的产生,从而能够显著提高卡维地洛的收率。

富血小板纤维蛋白在慢性难愈性创面中的临床应用

目的探讨富血小板纤维蛋白在慢性难愈性创面临床应用中的疗效和特点。方法选取2018年3月~2019年9月于本院诊治的慢性难愈性创面病人共105例,回顾性分析所有病人病历资料,对病人疗效进行统计学分析。男性44例,女性61例。年龄2~76岁,平均42.6岁。病程3周~6个月。所有病人均接受富血小板纤维蛋白治疗,治疗时间2~6周,评定创面疗效及预后。结果105例病人,创面愈合良好92例,愈合一般10例,无效3例。结论富血小板纤维蛋白治疗慢性难愈性创面,操作简单、疗效确切、经济适用。

骨桥蛋白shRNA表达载体介导的RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞生长和侵袭的影响

背景与目的:骨桥蛋白(osteopontin,OPN)诱导多种恶性肿瘤细胞的浸润和转移与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9的活化密切相关。本研究旨在探讨OPN在人前列腺癌PC-3细胞的增殖和侵袭过程中的作用以及IκB激酶(Ikappa B kinase,IKK)在NF-κB介导的信号通道中可能的功能。方法:将OPN短发夹RNA(short-hairpin RNA,shRNA)重组质粒转染PC-3细胞并应用不同浓度的IKK抑制剂分别抑制IKKα和IKKβ的活性,然后采用实时PCR和Western blot分别检测OPN、MMP-2和MMP-9三种mRNA和蛋白的表达水平,流式细胞术、MTT法和Transwell实验分别检测细胞生长周期变化、细胞增殖和和侵袭能力。结果:与对照组相比,转染重组质粒的细胞中OPN、MMP-2和MMP-9三种蛋白的表达量分别下降了55.22%、51.71%和28.35%(P<0.05),凋亡二倍体数目显著增加,细胞的迁移能力和侵袭能力分别下降了45.48%和51.96%(P<0.05)。此外,特异性地抑制IKKβ酶的活性能显著降低MMP-2和MMP-9的表达水平。结论:shRNA表达载体介导的OPN基因沉默能明显抑制PC-3细胞的恶性生物学行为;在OPN诱导MMP-2和MMP-9活化的过程中,IKKβ酶的活性可能发挥了重要的作用。

微创内固定系统治疗股骨远端复杂性骨折疗效分析

目的分析AO微创内固定系统(LISS)治疗股骨远端复杂性骨折的临床疗效。方法回顾性分析2005年10月～2008年8月应用LISS治疗21例股骨远端复杂性骨折患者的临床资料。对术后的伤口愈合情况、并发症及关节功能恢复情况进行分析。结果平均随访时间13.5个月(3～26个月),所有患者术后伤口均I期愈合,除1例出现膝内翻畸形,2例骨缺损和骨吸收较严重的患者术后6个月再次行植骨外,其余患者在术后3～7个月均获得骨愈合。膝关节HSS功能评定:优12例,良5例,可4例,优良率80.95%。结论LISS接骨板是治疗股骨远端严重粉碎性骨折的理想内固定材料,它具有骨折愈合率高,关节功能恢复满意等优点,然而必须严格掌握其适应证和技术操作程序才能取得满意疗效。

袋式除尘新技术在机立窑烟尘治理中的应用

介绍了袋式除尘新技术在机立窑烟气治理中的应用。多台机立窑采用一台LFEF玻纤袋除尘器集中除尘 。

袋式除尘新技术在机立窑烟尘治理中的应用

本文介绍了袋式除尘新技术在机立窑烟气治理中的应用,多台机立窑采用一台LFEF玻纤袋除尘器集中除尘,其技术已经非常成熟,可以说是机立窑玻纤袋除尘技术一个重大突破,一次飞跃式的发展。文中还对袋式除尘器的技术发展等也进行了论述。

“扬帆扶贫计划”之IT人才培养研究

从计划与现实两个角度客观论述了中国教育存在的不足,根据实际经验阐述和探讨"扬帆扶贫计划"的实施,本文研究的背景、研究的意义、存在的问题及开展IT人才培养工作的对策。"扬帆扶贫计划"是一项长期且比较艰苦的计划,不仅需要爱心、耐心、信心和决心,而且需要社会与国家各方面的大力支持。本文就六安市金寨县暖流中学教师的师资力量和IT教育现状展开论述,探讨"扬帆扶贫计划"的意义,以及在进行IT扶贫教育中面临的问题及IT人才培养解决方案。

livin、LRH1、Ki-67在骨肉瘤中的表达及与预后的关系

目的探讨凋亡抑制蛋白生存蛋白(livin)、肝受体同系物1(LRH1)、Ki-67在骨肉瘤中的表达及与预后的关系。方法回顾性分析50例骨肉瘤患者的临床资料,收集手术切除后骨肉瘤患者的骨肉瘤组织标本50例及相应的癌旁正常组织标本50例,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组化法检测骨肉瘤组织和癌旁正常组织中livin、LRH1、Ki-67的表达情况,并根据预后情况将组织标本分为死亡组(n=15)和生存组(n=35)。分析骨肉瘤组织中livin、LRH1、Ki-67的表达与患者预后的关系。结果骨肉瘤组织中livin、LRH1、Ki-67的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。死亡组骨肉瘤组织中livin、LRH1、Ki-67的阳性表达率均高于生存组骨肉瘤组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。单因素分析结果显示:livin、LRH1、Ki-67的表达与骨肉瘤患者的死亡有关(P﹤0.01);多因素分析结果显示:livin、LRH1、Ki-67的表达是影响骨肉瘤患者死亡的独立影响因素。结论 livin、LRH1、Ki-67在骨肉瘤组织中的阳性率表达均较高,三者共同参与骨肉瘤的发生和发展。

Gas7在大鼠关节软骨中的表达及意义

目的探讨生长休止蛋白7(Gas7)在成年大鼠关节软骨中的表达及意义。方法雄性SD大鼠(3个月、12个月)各12只。取膝关节和股骨上端关节部分,经脱钙石蜡包埋并切片,采用HE染色和免疫组化SABC法检测。检测各关节软骨组织中Gas7的表达及其定位。结果关节软骨切线层与移行层Gas7的表达呈现强阳性,而在辐射层及软骨钙化层则弱阳性或阴性。结论Gas7在成年大鼠关节软骨各层细胞的表达不同。

花卉穴盘苗取栽一体式自动移栽机构设计与试验

为得到一种高效简便、通用性好的花卉自动移栽机械,设计了一种取苗和栽苗一体式花卉自动移栽机构,通过夹苗针相对移栽臂的运动规律设计,实现"双尖嘴"工作轨迹,建立了该机构运动学模型,并应用自主开发的计算机分析和优化软件,分析了机构参数变化对"双尖嘴"轨迹和姿态的影响,优选出符合取栽一体式移栽要求的机构参数,并通过模型仿真和样机试验相结合的方法,对该机构进行了验证分析,结果表明:仿真轨迹、样机测试轨迹与理论轨迹三者基本一致,验证了该取栽一体式移栽机构设计的正确性和可行性。试验选用"万寿菊"花卉穴盘苗,苗龄35d,平均苗高约10 cm,试验设定机构转速为35 r/min(移栽速度70株/min)时,平均取苗成功率为97.27%,平均栽苗成功率为77.62%,表明该取栽一体式移栽机构具有较好的实用性。该研究可为自动化移栽关键技术的研究提供参考。

VSD在开放性骨折及MODS防治中的应用

目的探讨在合并GustiloⅢ型胫骨骨折的多发伤患者救治中,应用负压封闭引流(VSD)技术分期修复缺损创面、促进骨折愈合和预防"二次打击"的作用。方法回顾性分析2005年10月—2015年10月,由华中科技大学同济医学院附属同济医院创伤外科收治的110例合并GustiloⅢ型胫骨骨折多发伤患者的临床资料,根据治疗方式分为急诊VSD组(61例)、延迟VSD组(35例)和非VSD组(14例),分析各组间创面修复、骨折愈合和分期治疗的情况,以及VSD预防创伤后"二次打击"的效果。结果 (1)创面修复指标:急诊VSD组的一期术后软组织存活率为95.08%,创面感染率为8.20%,创面坏死率为3.28%,再次清创率为6.56%,创面优良愈合率为98.36%,创面愈合时间为(30.42±9.41)d,均显著优于非VSD组的同类指标(P<0.05);(2)骨折愈合指标:急诊VSD组的骨筋膜室综合征发生率为6.56%,骨折愈合率为77.05%,骨不连和骨髓炎发生率均为1.64%,骨折愈合时间为(3.66±0.87)个月,均优于非VSD组的同类指标(P<0.05);(3)创伤后"二次打击"指标:急诊VSD组深部感染率为9.84%,全身炎症反应综合征发生率为73.77%,脓毒症发生率为6.50%,多器官功能障碍综合征(MODS)发生率为3.28%,病死率为0,均显著低于非VSD组的同类指标(P<0.05);(4)分期治疗时间:按急诊手术、术后治疗、骨折固定、闭合创面和康复训练分为五期,三组在一期时间无显著性差异(P>0.05);急诊VSD组均显著短于非VSD组,两组分期治疗时间分别为,二期(12.92±4.71)d vs.(20.47±9.15)d、三期(3.11±1.03)d vs.(7.23±3.81)d、四期(4.37±0.52)d vs.(5.89±1.43)d和五期(11.04±2.56)d vs.(15.59±4.29)d,P<0.05。且急诊VSD组和延迟VSD组上述部分指标分别显著优于延迟VSD组和非VSD组(P<0.05)。结论应用VSD技术不仅可临时闭合创面,通过清除创面坏死物和组织渗出,来减轻局部水肿和控制组织感染,以促进创面和骨折的早期愈合;同时还可以对全身感染和MODS起到预防作用,提高多发伤患者的救治成功率。