基于网络药理学和动物实验探究逍遥丸治疗骨质疏松症作用机制

目的:基于网络药理学并通过动物实验研究逍遥丸对去卵巢骨质疏松症中小鼠骨结构形态的治疗作用,以及对AGES/RAGE信号转导途径的改变和分子机制。方法:通过TCMSP等数据库搜索逍遥丸药物成分及其成分相关靶点;以“osteoporosis”为关键词,在GeneCards等数据库搜索骨质疏松症相关的靶点;制作韦恩图,获取交集靶点;最后通过DAVID数据库,对药物-疾病交集靶点进行GO与KEGG富集分析并将富集结果可视化。其次,建立小鼠骨质疏松模型,通过CT扫描,HE染色以及免疫组化等检测逍遥丸对成骨分化的影响,并验证网络药理学信号通路预测结果。结果:逍遥丸治疗骨质疏松症的核心活性成分有8种,分别为柴胡、当归、白芍、炒白术、茯苓、炙甘草、薄荷、生姜,合并去重后共得到225个靶点基因。其关键靶点主要参与调控AGEs/RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路等。在小鼠骨质疏松模型中,逍遥丸能有效提高ALP、COL-1成骨转录因子表达(P<0.05),同时下调AGEs/RAGE信号通路关键蛋白rage、IL-6的表达(P<0.05)。结论:逍遥丸有效改善去卵巢骨质疏松症小鼠骨形态学结构,具有抗去卵巢骨质疏松作用,其机制可能与抑制AGES/RAGE信号通路,提高成骨标志基因ALP、COL-1有关。

局部不可切除的进展期胃癌转化治疗研究进展

根据《CACA胃癌整合诊治指南(精简版)》等资料~([1-2])显示,胃癌在全球恶性肿瘤中的发病率排名第5位,病死率排名第4位,在中国的恶性肿瘤中发病率和病死率均排名第3位。我国每年新发胃癌病例超过67.9万例,死亡人数高达49.8万例。由于我国人口老龄化的加剧,胃癌的发病率和病死率逐渐增加,严重威胁患者的健康和增加社会的医疗负担~([3])。目前国内仍缺乏有效的胃癌普查手段,导致多数患者在被确诊时已处于肿瘤进展期,约占90%~([4])。

人脐带血间充质干细胞分离培养及向软骨细胞的分化

目的：关节软骨创伤难以自行修复,传统疗法因修复的组织以纤维软骨为主,缺少正常透明软骨的力学性能及耐用性。种子细胞是组织工程化软骨形成的首要条件,为此拟建立一套较为简便、有效和实用的脐血间充质干细胞体外分离培养体系,探讨其向软骨细胞分化的可行性。方法：实验于2005-07/2006-09在右江民族医学院组织学与胚胎学教研室完成。①细胞来源：无妊娠并发症足月分娩后的胎盘脐静脉血,均征得供者同意,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法：穿刺抽取15mL脐带血,密度梯度法分离吸取分层界面的白色环形絮状物,其中富含单个核细胞,离心后沉积细胞用含15%胎牛血清、100U/mL青霉素、100U/mL链霉素的DMEM高糖培养基悬浮,调整细胞密度为1× 10^9 L^-1接种于25T培养瓶内,放置在37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,72h后更换培养基,去除红细胞及其他未贴壁细胞,至70%-80%融合时传代。③实验评估：取传至第2代的脐带血间充质干细胞进行增殖能力检测;加入含终浓度为100μg/L胰岛素样生长因子1,15%胎牛血清的DMEM软骨细胞诱导培养基,倒置显微镜下连续观察细胞生长情况,并行苏木精-伊红染色,应用扫描电子显微镜对诱导后细胞进行鉴定。结果：①细胞形态学观察：来源于脐血的单个核细胞接种24h少量贴壁,近似圆形或短梭形;体外培养3d后可见分散的间充质干细胞小集落,集落细胞为长梭形,呈放射状生长;2周后细胞集落彼此融合,呈旋涡状或菊花状生长。传代后3周细胞基本融合成层。②细胞增殖能力检测：脐带血间充质干细胞传代后8-12h贴壁,7-13d细胞处于对数生长期,16-19d进入平台期,扩增速度快于原代培养,倍增时间为8.5d。③脐带血间充质干细胞向软骨细胞诱导分化结果：胰岛素样生长因子1诱导12d,脐带血间充质干细胞苏木精-伊红染色可见分泌少量细胞外基质。扫描电子显微镜下呈现软骨细胞特点,多边形,外围被分泌细胞外基质所围绕,呈蜘蛛网样。结论：从人脐带血中成功分离获取间充质干细胞,在体外经胰岛素样生长因子1条件培养液诱导短期内可获得软骨细胞。

IL-1β基因启动子-511C/T多态性与2型糖尿病相关性研究

目的 探讨白细胞介素 - 1β(IL- 1β)基因启动子 - 5 11C/ T多态性与 2型糖尿病 (T2 DM)的相关性。方法 应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)技术检测 135例 T2 DM患者和 14 0例正常对照者(对照组 ) IL - 1β基因型及血糖、血脂水平。结果 IL - 1β基因型 CC、CT和 TT频率在 T2 DM组和对照组分别为12 .6 %、5 1.9%、35 .5 %和 2 5 .7%、4 5 .7%、2 8.6 % ;等位基因 C、T频率在 T2 DM组和对照组分别为 38.5 %、6 1.5 %和 4 8.6 %、5 1.4 %。其基因型频率和等位基因频率在 T2 DM组和对照组比较均有显著性差异 (P<0 .0 5 )。等位基因频率的相对风险分析发现 ,T等位基因携带者患 T2 DM的风险是 C等位基因的 1.5 0 7倍。结论 IL- 1β基因启动子 - 5 11C/ T多态性与 T2 DM的发病有相关性 ,T等位基因可能是 T2

家养皮毛宠物对儿童哮喘及哮喘样症状影响的流行病学调查

目的探讨家养皮毛宠物对儿童哮喘及哮喘样症状的影响。方法采用随机整群抽样方法 ,随机抽取百色市6所小学的3244名小学生作为调查对象。采用标准的呼吸卫生调查表(来自美国胸科协会即ATS)对儿童哮喘及哮喘样症状和家养宠物等环境因素进行调查。结果百色市儿童哮喘、哮喘现患、喘鸣、喘鸣样症状、持续咳嗽和持续咳痰的发生率分别为3.76%、1.20%、4.69%、2.93%、4.93和2.56%。儿童哮喘及哮喘样症状性别间差异未有统计学意义(P>0.05)。多元非条件logistic回归分析显示,暴露家养皮毛宠物可显著的增加儿童持续咳嗽(OR=1.89;95%CI:1.30～2.76)和持续咳痰(OR=2.01;95%CI:1.22～3.33)的发生率;分宠物类别分析,与非家养宠物儿童相比,家养宠物狗对儿童哮喘患病的危险性具有统计学意义(OR=2.39;95%CI:1.31～4.37)。结论家养宠物是儿童发生哮喘及哮喘样症状的危险因素。

民族地区医学院校组织学与胚胎学教学中培育人文精神的思考

医学研究和服务的对象是社会大众，因此，不能简单地认为医学就是一门生物科学，更是一门社会科学，是一门“人”学。医学与人文密不可分，医学人文是医学的灵魂，抽取人文精神，医学就没有了灵魂，但是医学生人文的现状，特别是民族地区医学院校医学生人文理念淡薄，人文精神缺乏，引起社会各界的忧思，加强医学生人文精神培育刻不容缓，组织学与胚胎学是基础医学的主干课程之一，授课对象又是一年级学生，如何在教学中融人人文知识，培育医学生人文精神是组织学与胚胎学专业课教师面临的新课题。

广西壮族人群白细胞介素-1α与β的基因多态性分布

目的:了解白细胞介素-1α(IL-1α)基因-889位点和IL-1β基因-511位点多态性在广西壮族健康人群中的分布。方法:采用 PCR—RFLP方法,对上述两位点进行了检测,计算其基因型和等位基因频率。结果:IL-1α(-889)和IL-1β(-511)等位基因C、T 频率在壮族正常人群中分别为93．9％、6．1％和53．4％、46．6％;与奥地利、非洲黑人、非洲白人健康人群相比,IL-1α(-889)基因型分布及等位基因频率均存在高度显著性差异;与奥地利、非洲白人健康人群相比,IL-1β(-511)基因型分布及等位基因频率存在显著性差异。结论:广西壮族健康人群IL-1α(-889)基因多态性分布与奥地利、非洲黑人、非洲白人不同;IL-1β(-511)基因多态性分布与奥地利、非洲白人不同。

衣霉素抑制细胞周期蛋白D1表达而强化TRAIL诱发凋亡的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合衣霉素促甲状腺未分化癌细胞株凋亡的作用机制。方法通过单用TRAIL(TRAIL组)、衣霉素(衣霉素组)、联合用药组(TRAIL+衣霉素组)对多种甲状腺未分化癌细胞株进行作用,并以正常甲状腺上皮细胞株HTori-3作对照,利用流式细胞仪分析各组细胞周期变化及各组细胞凋亡状态;采用蛋白印迹杂交法检测衣霉素处理前后各组细胞细胞周期蛋白D1蛋白表达水平;利用微小RNA干扰技术及质粒转染技术探讨细胞周期蛋白D1对依霉素增敏TRAIL效应的影响。结果 TRAIL与衣霉素单用对甲状腺癌细胞均无明显杀伤作用,最高细胞凋亡率分别为10.68%、10.14%;联合用药组细胞凋亡率最大达54.77%,与TRAIL组和衣霉素组相比,具有统计学差异(P<0.05)。与对照组相比,衣霉素组和联合用药组细胞周期蛋白D1水平明显降低。微小RNA干扰可以特异性下调细胞周期蛋白D1进而增加ARO细胞对TRAIL的敏感性;而细胞周期蛋白D1过表达ARO细胞中细胞凋亡率降低22.7%。结论在体外单用TRAIL对甲状腺癌细胞增殖无明显抑制作用,衣霉素明显增加肿瘤细胞对TRAIL敏感性,其增敏机制至少部分与下调细胞周期蛋白D1水平有关。

IL-1α基因启动子889C/T和IL-1Ra第2内含子VNTR基因型及血清水平与2型糖尿病的相关性研究

目的 研究白细胞介素 1α(IL 1α)基因启动子 889C/T多态性和白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Ra)第 2内含子可变数目串联重复(VNTR)多态性及血清水平与 2型糖尿病 (T2DM)的相关关系。方法 采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,检测 1 35例T2DM患者和 1 4 0例健康对照者的IL 1α( 889C/T)和IL 1Ra(VNTR)基因型 ,同时采用ELISA检测T2DM患者和对照者的血清IL 1水平。结果 T2DM组血清IL 1水平显著高于对照组 (P <0 0 1 ) ,IL 1α基因 889C/T基因型频率和等位基因频率在T2DM组和对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5) ,等位基因频率的相对风险分析发现 ,T等位基因携带者患T2DM的风险是C等位基因的 2 0 2 3倍 (OR =2 0 2 3 ,95 %CI:1 1 4 7～ 3 567) ;IL 1Ra基因型频率和等位基因频率在T2DM组和对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5) ,与健康对照组比较 ,不携带IL 1RaⅡ的基因型患 2型DM的相对风险度增加 2 0 2 5倍 (OR =2 0 2 5 ,95 %CI :1 0 33～ 3 967) ,携带IL 1RaⅡ的基因型的T2DM患者血清IL 1Ra水平显著高于不携带者〔(1 4 2 6 2 5± 32 4 31 ) pg/mlVS (1 2 99 56± 2 93 47) pg/ml,P <0 0 1〕。 结论 IL 1α( 889C/T)和IL 1Ra(VNTR)基因多态性与T2DM的发病具有相关性 。

广西壮族与汉族人群IL-1β基因5号外显子+3953C/T多态性的研究

目的观察白细胞介素-1β(IL-1β)基因5号外显子+3953C/T多态性在中国广西壮、汉两民族中的分布。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测155名壮族人和195名汉族人的白细胞介素-1β基因5号外显子+3953C/T多态性,计算其基因型和等位基因频率,并结合文献与高加索人、非洲白人进行了不同种族间的分析比较。结果在壮族人中CC、CT基因型分别为94.8%、5.2%;在汉族人中CC、CT基因型分别为93.3%、6.7%。两组IL-1β基因型的分布频率差异无显著性(P>0.05)。二者与高加索人、非洲白人比较,发现IL-1β基因型分布及等位基因频率有显著差异(P<0.01)。结论IL-1β基因5号外显子+3953C/T多态性在广西壮、汉两族分布无差异,但与高加索人、非洲白人分布有差异。

以科研促进教学 全面提高本科生人才培养质量

以科研促进教学是提高大学教学质量的重要途径:科研能促进师资队伍建设和人文教育与科学教育相互渗透和交融,科研成果能充实和丰富教学内容,课外科研小组能培养学生的科研能力,面向本科生学术讲座能激发学生创新意识;从而形成"科研促进教学,教学科研相长"的良性循环。

浅谈《组织学与胚胎学实验指导》教材的构建

组织学与胚胎学是主要的形态学课程之一，是从微观上来研究人体结构及相关功能的一门基础学科，具有显微结构、平面图像、局部组成及静止状态等鲜明特征和实践性强的特点。实验教学的目的是使学生通过自己操作和显微镜下观察。认知正常人体细胞、组织、器官的形态结构，而非虚拟的构架。从而进一步对理论教学内容融会贯通：同时也对学生进行基本技能训练，

体外分离骨髓间充质干细胞在诱导条件下的成骨能力特征(英文)

背景:利用骨髓间充质干细胞的多方向分化潜能,选择合适的生物材料和适当的生长因子联合应用,可达到修复组织缺损的目的。目的:观察兔骨髓间充质干细胞的生长特点及其在诱导条件下的成骨能力。设计:单一样本实验。单位:右江民族医学院组织胚胎学教研室、右江民族医学院附属医院。材料:实验于2004-06在右江民族医学院组织胚胎学教研室完成。新西兰大白兔,雄性,体质量2.0～2.5kg。方法:抽取兔骨髓组织,梯度离心后,保留贴壁细胞传代,稳定传代后改用诱导成骨培养液(50mL/L胎牛血清的Dulbecco改良培养基含10mmol/Lβ-甘油磷酸钠,10nmol/L地塞米松,50mg/L维生素C)进行培养,隔日换培养液1次。通过倒置显微镜观察、碱性磷酸酶染色、骨连接素、骨桥素免疫细胞化学染色等方法观测骨髓间充质干细胞的成骨特性。主要观察指标:①骨髓间充质干细胞的形态学观察。②骨髓间充质干细胞的成骨特性。结果:①骨髓间充质干细胞的形态学观察:原代兔骨髓间充质干细胞七八天即可长满,并可稳定传代,传代细胞五六天即可传代。②骨髓间充质干细胞的成骨特性:碱性磷酸酶免疫组化染色可见胞浆中出现大量棕褐色颗粒,对照染色细胞胞浆未见着色;骨连接素、骨桥素免疫组织化学检测可见胞核染成淡蓝色,胞浆内出现大量的棕黄色颗粒,呈明显强阳性,对照染色中胞浆内没有出现黄色颗粒。结论:兔骨髓间充质干细胞用地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠培养液联合诱导培养后,符合成骨细胞的形态特征和生物学特性,具有成骨活性,可在短期内为体外构建组织工程化骨提供自体种子细胞。

骨髓间充质干细胞诱导为成骨细胞的初步研究

目的观察兔骨髓间充质干细胞的生长特点及诱导条件下的成骨能力。方法抽取兔骨髓组织,梯度离心后,保留贴壁细胞传代,稳定传代后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的诱导培养液,通过倒置显微镜观察,碱性磷酸酶染色,骨连接素、骨桥素免疫细胞化学染色等方法进行观测。结果原代兔骨髓间充质干细胞7～8d左右即可长满,并可稳定传代,传代细胞5～6d即可传代。诱导培养细胞碱性磷酸酶染色,骨连接素、骨桥素免疫细胞化学染色阳性。结论兔骨髓间充质干细胞经合理的体外诱导培养后,符合成骨细胞的形态特征和生物学特性,可为体外构建组织工程化骨提供自体种子细胞。

血清培养基辅以碱性成纤维细胞生长因子培养扩增小鼠神经干细胞(英文)

背景:神经干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞,是研究神经系统的发生、发育、发展规律及其内在的分子生物学、细胞学调控机制的理想载体,在神经系统疾病及损伤的治疗中具有广阔的应用前景。探讨一套较为简便、有效和实用的神经干细胞体外培养体系是其应用的前提和基础。目的:观察血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子对小鼠神经干细胞体外培养的影响。设计:单一样本观察。单位:右江民族医学院组织学与胚胎学教研室。材料:2个月龄昆明种小白鼠5只,雌雄不拘。方法:实验于2003-06/2005-05在广西医科大学组织学与胚胎学试验室完成。①采用贴壁培养法,从成年小鼠大脑皮层分离并体外培养成年小鼠大脑皮层细胞,制成细胞悬液后将其置入DMEM/F12(1∶1)液(包括体积分数为0.15的胎牛血清,碱性成纤维细胞生长因子20μg/L,青霉素100u/mL和链霉素100u/mL)培养,获得细胞克隆。②应用免疫组织化学技术检测克隆细胞巢蛋白的表达。主要观察指标:①培养细胞形态学观察。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果。③神经干细胞鉴定。结果:①培养细胞形态学观察:细胞接种后,绝大多数细胞在12h内附壁,细胞变扁平,接种后第3天,细胞开始生长,细胞数量增多,接种后第5天时生长成为数10个细胞到数百个细胞克隆,到第七八天,细胞占据瓶底80%～90%。经传代后仍成黏附生长,细胞形态规则,边界清楚。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果:可见细胞圆形或椭圆形,胞质少呈嗜酸性,细胞核大而圆,单个居中,着色深。③神经干细胞鉴定:免疫荧光检测显示,细胞巢蛋白抗原呈阳性。结论:分离的小鼠大脑皮层细胞在血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子的培养条件下,具有很强的增殖能力,传代后表达巢蛋白,依然具有神经干细胞的特征。

日本医学教育特点及对我国医学生素质拓展的启示

日本在医学教育方面通过不断探索,建立了一套比较完善的医学教育体制,在医学人才的培养上有许多成功的经验和做法,如整合课程体系,建立相对统一教学标准及教学内容,搭建学术平台培养学生创新能力,凸显培养良医的教学目标,有力地推动了日本医学教育的发展。其中很多值得我国医学生素质拓展的启示。

小鼠神经干细胞的分离培养

目的 探讨小鼠神经干细胞的体外分离培养方法。方法 采用贴壁培养法,从成体小鼠大脑皮层分离并体外培养成体小鼠大脑皮层细胞,制成细胞悬液后将其置入DMEN/F12(1:1)液(包括15％FCS,bFGF20ng/ml,青霉素100u/ml和链霉素100u/ml)培养,获得细胞克隆。应用免疫组织化学技术检测克隆细胞巢蛋白(Nestin)的表达。结果原代及传代培养的细胞均可持续分裂增殖形成细胞克隆;克隆细胞表达巢蛋白(Nestin)。结论 分离的细胞在体外具有很强的增殖能力和自我更新能力,表达Nestin的为中枢神经系统的干细胞。