实验教学标本来源的现况及其措施

本文介绍了人体寄生虫学实验教学标本来源途径及现况,在当今寄生虫标本来源困难的情况下,如何采取行之有效的措施,从而对人体寄生虫学实验教学起到积极作用.

355例小学生头虱感染情况及“施克灵”灭虱效果观察

为了解长沙市郊区小学生头虱感染情况，作者于１９９４年５月至６月１９日对市郊东屯渡农场的小学生进行了现场普查，并采用“施克灵”药液对阳性人群进行现场灭头虱的实验观察，结果如下。１对象与方法１．１以长沙市郊区东屯渡农场樟木坝小学１～６年级学生为对象，其中...

卫氏并殖吸虫囊蚴标本制作方法的改进

介绍卫氏并殖吸虫囊蚴标本制作方法的改进

临床医学七年制人体寄生虫学实验教学中学生能力的培养

为了提高教学质量、培养高素质的医学专业人才,从培养学生观察问题与独立思考能力、基础理论与临床相结合的实际应用能力、分析问题与解决问题的科研动手能力几方面着手,深化七年制实验教学改革,从而对提高学生综合素质起到积极作用.通过对2000级临床医学七年制学生调查,表明七年制实验教学改革的措施是切实可行的.

日本血吸虫童虫细胞体外培养条件的初步研究

目的探讨日本血吸虫童虫细胞体外培养条件。方法选取转铁蛋白、核苷酸、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、黄体酮以及非必需氨基酸与维生素组合等5种促进细胞增殖的因子作为考察因素,每种因素选取添加与不添加两个水平,采用正交设计,以RPMI-1640为基础培养液,配制16种条件培养基对日本血吸虫童虫细胞进行体外培养,通过动态观察和AKP组化染色法及直观法分析法获得不同培养条件影响细胞增殖和细胞活力的结果。结果第2,4,9,13,14孔中的组织出现明显的细胞增殖现象,其细胞AKP检测值也相应较高,各孔中培养细胞的AKP值经直观分析表明促进细胞增殖最佳因素组合为C1B1A1,即转铁蛋白、核苷酸、bFGF。结论转铁蛋白、核苷酸、bFGF对日本血吸虫童虫细胞增殖具有明显促进作用。

日本血吸虫31/32kDa分子抗原快速诊断试剂盒的研制与现场应用

目的基于纯化的日本血吸虫31／32kDa分子抗原，建立一种敏感、特异、简便、快速诊断血吸虫病的试剂盒。方法采用Chappell方法分离纯化Sj31／32kDa抗原并建立快速ELISA，检测急、慢性血吸虫病人，并以肺吸虫病人、肝吸虫病人及正常人血清作为平行对照。结果血吸虫病人457例，阳性检出率为94．3％，67例肺吸虫病人及76例肝吸虫病人血清均未出现明显交叉反应，正常人群假阳性率为1％。结论提示采用纯化的优势诊断抗原分子建立的快速诊断试剂盒有较好的现场应用潜能，且具有简便、快速、无需特殊设备等优点，值得推广应用。

一种新型日本血吸虫疫苗(童虫活细胞)诱导小鼠产生有效保护性免疫力的研究

目的观察日本血吸虫童虫活细胞诱导小鼠产生的保护性免疫效果。方法采用日本血吸虫肝期童虫的活细胞和虫体组织碎片,在未加佐剂条件下分别接种昆明小鼠,每组10只,每2周接种1次,共4次,末次接种后第7天攻击感染血吸虫尾蚴30条/鼠,感染后第42天解剖小鼠,与对照组比较检测和分析虫体发育数、虫体大小、鼠肝病变及其组织内虫卵肉芽肿大小、血清中特异性抗体水平和IgG2a/IgG1亚类比值。结果细胞接种组和虫体碎片接种组分别与PBS注射组比,虫体发育数分别下降67.6%%和46.3%;肝组织中虫卵数(LEPG)在细胞接种组和虫体碎片接种组中分别减少95.4%和64.8%;在细胞接种鼠组肝表面卵结节和虫卵肉芽肿及雄虫长度均显著小于其他两组者;特异性IgG2a/IgG1比值≥2,但总抗体水平低于虫体接种组。结论该研究首次建立了一种血吸虫细胞型疫苗研究模型,初步结果表明,在不加佐剂条件用血吸虫童虫活细胞可诱导小鼠产生显著的抗攻击感染免疫力,其机制可能主要为Th1介导的细胞免疫应答。

日本血吸虫尾蚴细胞的传代培养及抗原性检测

目的 探索体外培养日本血吸虫尾蚴细胞的增殖与传代技术。 方法 无菌收集日本血吸虫活尾蚴5 000～10 000条,置于含有10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中,用组织刀快速割切尾蚴使成组织碎裂物,加入250 U蟹胶原酶在26℃下孵育30 min,然后离心去酶,加入含有青霉素(100 U/ml)、链霉素(O.1 mg/ml)、两性霉素B(0.25μg/ml)和适量促细胞生长物的RPMI 1640改良培养基中作原代培养,当贴壁细胞增殖长满瓶底时,以1:2的接种率进行传代培养;获取第5代培养细胞作ELISA检测血吸虫病患者血清中抗体。 结果 在原代培养的第3天可见尾蚴组织的周围有呈单个存在或索状排列的发亮细胞,第10天可见单层细胞形成,第14天贴壁细胞长满瓶底并作传代培养;在传代培养中可见细胞呈均匀生长,每7～14 d传代一次;用第5代培养细胞作抗原,检测31例患者的阳性率为90.3％,检测30名正常人血清的假阳性率为6.7％。 结论 日本血吸虫尾蚴细胞体外传代培养至第5代,可用于免疫学研究。

用组织化学方法鉴别日本血吸虫细胞来源的研究

目的 探讨用组织化学方法鉴别血吸虫体外培养细胞来源或种类的可能性。 方法 取日本血吸虫肝期童虫 ,经酶消化处理后取混合细胞涂片 ,用成虫制作组织切片。将细胞涂片和组织切片分别平行作高碘酸 希夫氏(PAS)、硫堇 (Thionin)、嗜银反应 (根据Grimeliu s)、苦味酸 酸性品红 (根据VanGieson ,VG)、甲苯胺蓝 (Tolui dineblue ,TB)和苏木素 伊红 (HE) 6种组织化学方法染色。光镜下比较观察 ,判定结果。 结果 PAS染色的大细胞呈亮红色与组织切片中卵黄腺着色接近 ,表明着色的大细胞来源于卵黄腺 ;含特有尼氏体的神经细胞胞浆被硫堇染色呈深蓝色 ;Grimeliu s染色的细胞和消化道上皮细胞均呈黑色 ;VG染色 ,部分细胞和虫体肌纤维组织均呈黄色 ;TB染色 ,细胞涂片仅见 1个紫红色细胞 ,组织切片未见相同颜色的组织和细胞。 结论 PAS、硫堇、Grimeliu s、VG、TB和HE 6种组织化学染色 ,对体外培养的血吸虫细胞的显色特征与虫体相应器官或组织细胞的化学染色定位相一致。本法可用于鉴别血吸虫体外培养细胞的来源或种类 ,且操作简便、快速。

免疫增强剂与免疫抑制剂对吡喹酮杀血吸虫效果的影响

目的 观察中药免疫增强剂和化学免疫抑制剂对吡喹酮杀血吸虫效果的影响。 方法 日本血吸虫感染昆明小鼠后随机分成四组 ,对照组、吡喹酮治疗组、氢化可的松 (免疫抑制剂 ) +吡喹酮治疗组、中药 (免疫增强剂 ) +吡喹酮治疗组 ,分别采取相应不同的治疗方式 ,于吡喹酮治疗后 2周剖杀小鼠 ,观察减虫及减卵效果 ;并于吡喹酮治疗前采血 ,用ELISA方法测定特异性抗血吸虫成虫抗原 (AWA)抗体水平。 结果 与对照组相比 ,吡喹酮治疗组、氢化可的松 +吡喹酮治疗组、中药 +吡喹酮治疗组减虫率分别为 5 3 .2 2 % ,3 5 .61% ,69.16% ;每克肝卵减少率分别为 47.0 8% ,3 1.2 7% ,63 .2 8%。氢化可的松 +吡喹酮治疗组、中药 +吡喹酮治疗组与吡喹酮治疗组相比 ,减虫与减卵效果统计学有显著差异 (P<0 .0 5 )。且各组特异性抗AWA抗体水平高低与减虫、减卵效果相一致。 结论 进一步证明吡喹酮杀血吸虫作用具有免疫依赖性 ,而且证实中药免疫增强剂具有增强宿主特异性免疫应答 ,提高吡喹酮杀虫效果的作用。

SjAWMAg免疫血清和吡喹酮联用体内杀不同发育期血吸虫的实验研究

目的 观察日本血吸虫成虫表膜抗原(SjAWMAg)免疫血清与吡喹酮合用对不同发育期血吸虫的杀虫效果,探讨体液免疫在吡喹酮杀虫中的作用。 方法 提取 SjAWMAg,并用 SDS PAGE 对其进行鉴定,制备高滴度(1∶25 600)SjAWMAg抗血清,采用Western blot分析该血清与肺期童虫、肝期童虫及成虫抗原的反应性;将 SjAWMAg抗血清与吡喹酮合用治疗血吸虫感染后第2 d、第14 d和第35 d的小鼠,在感染后第49 d剖杀小鼠收获虫体,计算减虫率和减卵率。结果 Western blot分析表明,SjAWMAg抗血清与肺期及肝期童虫抗原存在交叉反应; 联合用药的 3 个治疗组(感染2、14、35 d)与单用吡喹酮组比较杀虫作用均有显著提高,减虫率分别提高了 38.79%、29.80%和 46.82%,其中以感染35 d治疗组提高最显著;减卵率分别提高了 62.04%,42.78%和 29.81%,以感染 2 d治疗组更为显著。结论抗SjAWMAg多克隆抗体与吡喹酮联合使用,均可提高吡喹酮对不同发育期血吸虫的杀灭效果,揭示体液免疫在吡喹酮杀血吸虫过程中具有重要作用,同时提示这种联合用药可能解决单用吡喹酮治疗血吸虫早期感染效果不佳的难题。

寄生虫病细胞工程学免疫防治研究

寄生虫病细胞工程学免疫防治研究,经历了20余a,首先在中国获得成功。在国家 九五"两项重大科技攻关项目支持下,建立了猪囊尾蚴CC-97细胞系,研制成功了猪囊尾蚴细胞疫苗;2000年以来,在国家自然科学基金等基金支持下,日本血吸虫幼虫———毛蚴、尾蚴和成虫细胞体外培养相继获得成功,开创了血吸虫病细胞工程学免疫防治的新局面。

1202名大学生肠道寄生蠕虫感染的调查

１２０２名大学生肠道寄生蠕虫感染的调查寄生虫学教研室言敢威，曹爱莲关键词肠疾病，寄生虫；蠕虫；感染；流行病学；学生；医科为了解大学生肠道寄生蠕虫感染情况，作者于１９９０年１１月至１９９２年６月，结合实验课对本校１２０２名大学生进行了肠道寄生虫蠕虫感染...