SOCS1和SOCS3在儿童过敏性紫癜Th1/Th2失衡中作用

目的探讨细胞因子信号转导蛋白抑制因子(SOCS)1和SOCS3在过敏性紫癜(HSP)病儿Th1/Th2失衡中的作用。方法选择急性期HSP病儿32例(HSP组)和健康同龄儿童28例(对照组)。采用酶联免疫吸附试验法检测血浆γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4和IL-6的浓度,采用蛋白质印迹技术检测外周血单个核细胞(PBMCs)中磷酸化的信号转导与转录激活因子3(pSTAT3)含量,实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMCs中SOCS1和SOCS3mRNA表达水平。结果 HSP病儿血浆IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4显著低于对照组(t=3.398、18.032,P<0.01);血浆IL-4及IL-6浓度显著高于对照组(t=4.817、9.733,P<0.01)。HSP病儿PBMCs中pSTAT3含量显著高于对照组(t=4.273,P<0.01)。HSP病儿PBMCs中SOCS1和SOCS3mRNA表达均显著高于对照组(t′=6.976、10.588,P<0.01)。HSP病儿pSTAT3蛋白、SOCS1和SOCS3 mRNA水平均与IFN-γ/IL-4呈负相关(r=-0.561^-0.409,P<0.05、0.01);pSTAT3蛋白与SOCS1 mRNA水平呈正相关(r=0.642,P<0.01),与SOCS3mRNA水平无相关性(r=0.345,P>0.05)。结论急性期HSP病儿体内存在Th1/Th2失衡。SOCS1、SOCS3可能参与了儿童HSP Th1/Th2失衡;IL-6可能通过活化STAT3上调SOCS1表达,参与HSP病儿Th1/Th2失衡。

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。

过敏性紫癜患儿外周血单核细胞表面TLR2,4,6的表达及其与辅助性T细胞17的相关性分析

目的研究过敏性紫癜（HSP）患儿急性期外周血单核细胞（PBMC）TLR2,4,6的表达及其与血浆白细胞介素（IL）-17的相关性,探讨TLR2,4,6在HSP发病机制中的作用。方法选取2013年4月至12月青岛大学附属医院收治入院的HSP急性期患儿42例为研究对象（纳入HSP组）,年龄为4-13岁,男性患儿为25例,女性为17例。另选取同期于本院儿童保健科进行健康体检的30例儿童纳入对照组。采用流式细胞术检测HSP患儿PBMC TLR2,4,6蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR（RTPCR）法检测HSP患儿PBMC髓样分化蛋白88（MyD88）mRNA的相对表达水平,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血浆白细胞介素（IL）-17水平。组间比较采用独立样本t检验,相关性分析采用Pearson相关检验。本研究遵循的程序符合青岛大学附属医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象监护人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书。结果 1HSP患儿PBMC TLR2,4,6蛋白表达均显著高于对照组,差异均有统计学意义（t=9.432,P〈0.01;t=8.876,P〈0.01;t=10.486,P〈0.01）。2HSP组MyD88mRNA相对表达水平（1.279±0.419）较对照组水平（0.995±0.251）显著升高,二者比较,差异有统计学意义（t=2.463,P〈0.05）。3HSP组患儿血浆IL-17水平较对照组显著增高[（13.168±2.841）pg/mL vs（11.091±1.768）pg/mL],差异有统计学意义（t=2.641,P〈0.05）。4HSP组PBMC TLR2,4,6蛋白表达均与MyD88mRNA的相对表达水平呈显著正相关关系（r=0.850,P〈0.01;r=0.669,P〈0.01;r=0.788,P〈0.01）;与血浆IL-17水平均呈正相关关系（r=0.438,P〈0.01;r=0.404,P〈0.05;r=0.357,P〈0.05）。结论 TLR2,4,6信号途径的异常活化可能参与HSP发生发展,活化的TLR2,4,6可能通过上调辅助性T细胞（Th17）介导HSP的免疫发病机制。