MTA3通过β-hCG调控上皮性卵巢癌侵袭转移的机制研究

目的探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)转移相关基因3(metastasis associated gene 3,MTA3)的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。方法收集晚期(FIGOⅢ-Ⅳ期)EOC术中冰冻标本(8例)及石蜡标本(21例),qRT-PCR和IHC检测卵巢部位肿瘤组织和转移瘤组织中MTA3的表达;Transwell细胞迁移实验观察下调MTA3、下调β-hCG、同时下调MTA3和β-hCG的EOC细胞株(SKOV3和ES-2)体外迁移力的变化。EOC细胞体外分别转染50、100、200 nmol/L siRNA-MTA3,qRT-PCR检测分析MTA3和β-hCG的表达相关性;qRT-PCR及Western印迹法检测分析下调MTA3对β-hCG以及上皮间质转化(EMT)标记物E-cadherin、N-cadherin表达的调控作用。结果qRT-PCR、IHC示EOC转移瘤组织中MTA3的表达显著低于卵巢部位肿瘤组织(P<0.05);Transwell细胞迁移实验示下调MTA3显著增强了EOC细胞的迁移能力(P<0.001),下调β-hCG显著降低了EOC细胞的迁移能力(P<0.001),下调MTA3下调β-hCG显著降低了EOC细胞的迁移能力(P<0.001);qRT-PCR示MTA3与β-hCG的表达呈显著负相关(P<0.05);qRT-PCR、Western印迹法示MTA3下调时,β-hCG和N-cadherin的表达显著上调,而Ecadherin的表达则显著下调。结论 MTA3可能通过β-hCG干预EM T进程,进而调控上皮性卵巢癌侵袭转移。

人卵巢癌裸鼠卵巢原位移植瘤模型的构建

为探讨人卵巢癌进展机制的相关研究,构建适宜的体内动物模型。采用慢病毒转染技术,构建稳定过表达绿色荧光报告基因(GFP)的人EOC细胞模型:SKOV3(人卵巢浆液性腺癌细胞株)和ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞株);异氟烷吸入麻醉4-6周龄BALB/C(nu/nu)雌性裸鼠,从裸鼠背部正中纵切口进入腹腔,显微多点注射法分别将细胞模型悬液,移植于裸鼠的单侧卵巢,每组6只裸鼠;Night OWL活体成像系统动态观察裸鼠移植瘤生长和转移情况;移植术后4-6周解剖裸鼠,取卵巢和转移瘤组织行HE染色。结果显示,携带GFP的EOC细胞模型SKOV3和ES-2,均可成功构建裸鼠卵巢原位移植瘤模型,裸鼠未发生手术原因死亡,成功率均100%;活体成像系统通过检测GFP的荧光强度和范围,能够动态监测裸鼠移植瘤生长情况;SKOV3细胞模型构建的卵巢癌和转移瘤组织,HE染色观察病理特征符合人卵巢浆液性腺癌;ES-2细胞模型构建的卵巢癌和转移瘤组织,HE染色观察病理特征符合人卵巢透明细胞癌。由此可知,异氟烷吸入麻醉、从背部正中纵切口进入腹腔、显微多点注射法移植携带GFP的EOC细胞模型,能成功构建可动态监测的裸鼠卵巢原位移植瘤动物模型;该动物模型与人卵巢癌生物学特征类似,适宜作为研究人卵巢癌演变进展的体内模型。

糖尿病相关肌少症的研究进展

肌少症是与年龄相关的肌肉量的减少,并对机体的力量、功能产生不利影响,最终导致老年人生活质量下降。糖尿病是由于胰岛素分泌或功能障碍所引起的慢性高血糖为特征的一种代谢性疾病,与遗传、环境及营养等多因素相关。有研究显示〔1〕,肌少症是糖尿病的慢性并发症之一,糖尿病患者患肌少症风险较非糖尿病患者增高。

Krt7和p16在宫颈病变进展中的临床意义

为探讨Krt7和p16在宫颈病变进展和临床诊治中的意义。收集慢性宫颈炎、宫颈低级别鳞状上皮内病变(Low-grade Squamous Intraepithelial Lesion,LSIL)、宫颈高级别鳞状上皮内病变(High-grade Squamous Intraepithelial Lesion,HSIL)和宫颈癌的石蜡标本及临床资料,免疫组织化学法检测石蜡组织中Krt7和p16的表达,统计分析Krt7和p16的表达与慢性宫颈炎、LSIL、HSIL和宫颈癌的相关性。结果显示,Krt7在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL和宫颈癌中的阳性表达率呈逐渐递增的趋势,依次为24%(10/41)、13%(4/30)、71%(31/44)、88%(22/25),差异具有统计学意义(P<0.05);Krt7阳性表达率在LSIL与HSIL、LSIL与宫颈癌、HSIL与宫颈癌之间存在统计学差异(P<0.001),但在宫颈炎与LSIL之间没统计学差异(P=0.251);p16在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL和宫颈癌中的阳性表达率呈现逐渐递增的趋势,依次为39%(16/41)、60%(18/30)、88.6%(39/44)、100%(25/25),差异具有统计学意义(P<0.05);p16阳性表达率在慢性宫颈炎与LSIL,LSIL与HSIL,LSIL与宫颈癌,HSIL与宫颈癌之间均存在统计学差异(P<0.001);Krt7和p16均阳性表达者在慢性宫颈炎、LSIL、HSIL、宫颈癌中的比例分别为2.44%(1/41)、3%(3/30)、68.18%(30/44)、88.00%(22/25),差异具有统计学意义(P<0.05)。Krt7、p16、联合检测Krt7和p16诊断宫颈病变的ROC曲线下面积分别为0.67、0.72、0.23(P<0.01)。结论:Krt7表达阴性的LSIL,进展为HSIL或宫颈癌的风险可能较低,无需临床过多干预治疗;Krt7表达阳性的LSIL进展成HSIL或宫颈癌的风险可能较高,应当引起临床重视;联合检测Krt7和p16,可能在临床中能更有效的筛选出进展为HSIL的高危人群。

单次大剂量电子线照射SD大鼠胃损伤观察

目的观察成年雄性sD大鼠经单次大剂量电子线照射胃后的损伤变化，为胃癌术中放疗提供动物实验依据。方法将38只sD大鼠随机分为对照组与实验组，利用专利技术“小动物放射线精确照射试验台”对实验组大鼠胃进行单次6 MeV 20 Gv照射．照射后不同天数评估大鼠一般情况，观察胃的病理损伤及体重变化。结果sD大鼠胃受照射后14 d时，镜下观察损伤最重，28 d时已逐渐修复伴腺体萎缩，56 d时胃损伤已纤维素性修复。与对照组相比实验组第1周内体重下降（P〈O．05），第2周体重开始上升，但幅度低于对照组（P〈0．05），第6周时体重与对照组相近（P〉0．05）。结论单次6 MeV电子线20 Gy照射sD大鼠胃后损伤最重在2周内，但无穿孔发生，8周内可修复恢复完全正常。