水溶硅对罗非鱼养殖水体水质的影响研究

将0、100和500 mg/L的水溶硅置于养殖水体中,检测不同时间水体中溶解氧含量、氨氮含量、亚硝态氮含量等水质指标,分析其对罗非鱼养殖水体水质的影响。结果表明,添加水溶硅后可以有效抑制水体中的氨氮(NH_(4)^(+)-N)含量,同时可以稳定养殖水体的pH,且未对水体中溶解氧(DO)和亚硝态氮(NO_(2)^(-)-N)含量产生明显影响。上述结果表明水溶硅在调节水体水质方面具有重要作用。

血红蛋白介导草鱼肾细胞凋亡的机制

为系统研究草鱼血红蛋白对草鱼肾(CIK)细胞的损伤机制,实验探究了血红蛋白和血红素刺激CIK细胞后的生长情况;还检测了血红蛋白和血红素刺激对CIK细胞内铁代谢相关基因的表达情况。为进一步检测血红蛋白对CIK细胞的毒性作用,实验还检测了血红蛋白刺激CIK细胞后,细胞内铁离子和活性氧(ROS)的变化情况;以及CIK细胞受血红蛋白和血红素刺激后,细胞凋亡相关基因的表达情况。结果显示,血红蛋白和血红素明显抑制了CIK细胞的正常生长。血红蛋白和血红素的刺激不同程度地上调了铁代谢相关基因的表达。通过检测被血红蛋白和血红素刺激后的CIK细胞炎症和抗氧化酶相关基因的表达情况,发现血红蛋白和血红素可以通过NF-κB途径激活下游炎症因子的表达,如促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6,抑炎因子IL-10以及趋化因子IL-4和IL-8等,同时也激活了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶基因的表达水平。血红蛋白的刺激显著增加了细胞内铁离子和ROS的含量,血红蛋白和血红素都在不同程度上显著激活了CIK细胞凋亡相关基因的表达水平。研究表明,高氧化活性的血红蛋白可以激活细胞内铁代谢和炎症因子相关基因的表达,同时增加细胞内铁离子和ROS水平导致CIK细胞凋亡基因的高表达。本研究结果丰富了鱼类血液免疫基础理论,同时也为水产健康养殖提供新的参考。

抗菌素对草鱼肠道免疫和菌群的影响

为探究抗菌素对草鱼免疫和肠道菌群的影响,本实验以草鱼为研究对象,设置基础饲料(对照组)、基础饲料添加恩诺沙星或氟苯尼考3组饲料,投喂草鱼2周后,通过肠道酶活检测、荧光定量PCR (qRT-PCR)和高通量测序技术分析饲料中添加抗菌素对草鱼肠道免疫及肠道菌群多样性影响。分析结果显示,(1)饲料中添加恩诺沙星和氟苯尼考降低了草鱼肠道谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,提高丙二醛(MDA)的含量,导致草鱼肠道氧化应激。(2)氟苯尼考组中的TNF-α、IL-1β、IL-12、NF-κB-P65、MHCⅡ、s IgM等免疫因子和ZO-1、ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3等黏膜相关蛋白的mRNA表达量显著下降,恩诺沙星组的免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-12、TLR4、MHCⅡ和黏膜相关基因ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3的mRNA表达量显著下降。(3)通过16S rRNA高通量测序来揭示拌食投喂抗菌素对草鱼肠道微生物群落结构的影响,分析结果显示,饲料中添加恩诺沙星或氟苯尼考对草鱼肠道α多样性无显著差异,但对β多样性出现显著变化,表明2种抗菌素对肠道菌群丰富度没有显著影响,但会改变群落多样性。综上所述,饲料中添加恩诺沙星和氟苯尼考会导致草鱼肠道氧化应激、调控黏膜免疫应答,并影响肠道菌群的结构与多样性。本研究为草鱼病害防控相关研究及草鱼的绿色健康养殖提供了参考。

草鱼血红蛋白通过诱导头肾巨噬细胞表达的炎症因子激活免疫反应

为了探究鱼类体内过量游离血红蛋白对鱼体的影响,本实验以草鱼为研究对象,通过体内注射血红蛋白模拟体内出血,探究血红蛋白对组织和组织中巨噬细胞的免疫调控作用。体内注射血红蛋白的实验结果显示,血红蛋白的刺激导致头肾和中肾组织中出现明显的血红蛋白沉淀,同时提高了鱼体血清中的抗氧化相关酶活性,促进了头肾组织中炎症因子基因TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA表达水平。普鲁士蓝和间接免疫荧光实验结果显示,头肾巨噬细胞对血红蛋白表现出了吞噬活性。荧光定量PCR检测结果显示,血红蛋白的刺激显著激活了头肾巨噬细胞中CD68、CD86、CSF和MHC-Ⅱ的mRNA表达水平。进一步的细胞因子检测结果显示,血红蛋白刺激12 h后,头肾巨噬细胞中的炎症因子基因(TNF-α、IL-1β和IL-4)、趋化因子基因(CCL20和CCL4)、IFN-α和TLR4的mRNA表达水平被显著上调表达。研究表明,草鱼头肾巨噬细胞对血红蛋白具有吞噬能力,同时血红蛋白也激活了巨噬细胞中多种细胞因子的表达。本研究结果首次阐述了草鱼血红蛋白与巨噬细胞的相互作用关系,丰富了鱼类血液基础免疫学理论,同时也为鱼类健康养殖提供了新的参考。

海河流域黑龙港运东水系大型底栖无脊椎动物多样性研究

为揭示黑龙港运东水系大型底栖无脊椎动物群落结构与时空分布模式,2013年6月对海河流域黑龙港运东水系大型底栖无脊椎动物进行了采样调查,采用Margalef丰富度指数、Shannon-Wiener物种多样性指数和Pielou均匀度指数分析该水系大型底栖无脊椎动物的生物多样性,并对其进行聚类和因子分析。共检测到大型底栖无脊椎动物64种,隶属3门6纲21科49属,其中昆虫纲34种(53.1%),腹足纲13种(20.3%),寡毛纲9种(14.1%),瓣鳃纲4种(6.2%),甲壳纲3种(4.7%),蛭纲1种(1.6%)。结果表明该水系大型底栖无脊椎动物种类组成以昆虫纲的摇蚊为主,而生物量组成则以腹足纲的种类为主。该水系大型底栖无脊椎动物群落结构相对简单,物种多样性较低,生物量和密度分布不均匀,但漳卫新河和南运河段物种较为丰富。使用耐污种寡毛纲颤蚓科来指示水体污染程度,该水系各河流中游污染较轻,上游和下游河段均呈中度或重度污染。

海河流域滦河水系夏季大型底栖无脊椎动物多样性调查

为了解海河流域滦河水系的生态完整性和底栖动物群落的恢复,2013年5—8月对滦河水系大型底栖无脊椎动物的群落结构特征进行了初步调查,共检测到大型底栖无脊椎动物90种,隶属于7纲11目65属。利用Shannon-Wiener多样性指数、Margalef丰富度指数、Pielou均匀度指数、Simpson多样性指数对滦河水系的水质进行了初步评价,在主成分分析和因子分析的基础上,对23个定量采样点的类型做了聚类分析。结果显示,水生昆虫23种,占26%;甲壳类2种,占2%;环节动物9种,占10%;软体动物10种,占11%;摇蚊幼虫46种,占51%。生物多样性指数表明滦河水系的整体水质为轻度污染,底栖动物的多样性与底质类型关系密切。

大清河摇蚊幼虫群落结构特征及水质初步评价

为了阐明大清河摇蚊幼虫群落结构特征及其与环境的关系,2013年7月和10月对大清河摇蚊幼虫群落结构特征进行了季度调查。共采集到摇蚊幼虫46种,隶属4亚科25属,优势种为苍白摇蚊(Chironomus pallidivittatus Malloch)和柔嫩雕翅摇蚊(Glyptotendipes cauliginellus Kieffer)。结果显示大清河摇蚊幼虫群落具有季节和地区差异性。摇蚊幼虫平均密度和生物量、Shannon多样性指数、Pielou均匀度指数和Simpson优势度指数均表现为夏季大于秋季。根据密度和生物量的聚类分析表明不同区域摇蚊幼虫可分属3大类。通过Margalef丰富度指数与经纬度之间的相关性分析发现,大清河摇蚊幼虫Margalef丰富度指数与经度呈负相关,与纬度无显著相关性。采用Shannon多样性指数和Hilsenhoff生物指数对大清河的水质进行了初步评价,结果表明大清河不同流域的污染等级不完全一致,水质情况比较复杂,但大部分地区已达富营养化水平,建议对其投入更多的关注和保护。

泥鳅二倍体与四倍体trim63a基因的克隆及表达分析

试验以泥鳅( Misgurnus anguillicaudatus,Ma )为研究对象,采用PCR技术克隆获得 trim63a 基因(tripartite motif containing 63,又名肌肉环状指基因1)的cDNA部分序列,生物信息学分析结果显示, Ma-trim63a 基因cDNA的编码序列(coding sequence,CDs)为1 035 bp,编码344个氨基酸,与硬骨鱼类相似度较高。采用荧光定量PCR技术检测人工繁殖获得的二倍体(D×D)和四倍体(T×T)胚胎不同发育时期 Ma-trim63a 的表达量以及泥鳅二倍体(D)和四倍体(T)成鱼不同组织中 Ma-trim63a 的表达量,基因表达分析结果显示, Ma-trim63a 在泥鳅二倍体和四倍体成鱼肌肉中的相对表达量最高,其次是心脏;Ma-trim63a 在泥鳅二倍体和四倍体胚胎的13个发育时期均有表达,但是不同倍性的胚胎表达差异较大。

水产动物组织胚胎学课程教学探索

组织胚胎学是水产养殖学专业学生必修的专业基础课中的1门,是其他专业课学习的基础,该课程内容繁多,学生学习起来枯燥,学习兴趣不高,因此在教学中提高教学质量和效果极其重要,当前结合自身教学体会,对水产动物组织胚胎学课程教学过程进行初步探究,以期增加学生的学习兴趣,为其他课程的学习奠定基础。