四环素对人肝细胞L-02的损伤作用

采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和Hoechst 33258染色法研究了四环素(1、10、100、1000、10000和100000μg/L)对人肝细胞L-02的毒性作用,并通过测定细胞培养上清液中和细胞内生化指标,明确了四环素诱导L-02损伤的作用机制。结果表明,四环素对L-02细胞有毒性作用,且随着四环素浓度的增加,其存活率下降。同时,细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性均显著增加,并随着四环素处理剂量的增加而逐渐升高;而细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均降低,丙二醛(MDA)含量显著升高。上述研究结果表明,四环素对人体外肝细胞L-02具有毒害作用,四环素诱导L-02细胞的损伤机制与破坏肝细胞膜的完整性、影响肝功能和诱导氧化应激效应有关。

氧化石墨烯高效淬灭荧光法快速检测水体汞离子

为研究快速检测水体中汞离子的荧光方法,设计一段5’端标记荧光染料(FAM)且能专一性结合汞离子的ssDNA序列,利用氧化石墨烯对ssDNA和T-Hg2+-T复合物亲和程度的差异性,以及氧化石墨烯高效淬灭荧光信号的特性,建立了一种能够快速、灵敏地检测水体中汞离子的荧光方法。在优化试验条件下,该方法对水体汞离子的检测范围为0.1~100μg/L,检出限为0.3μg/L。而且该方法操作简便、选择性较好,有望用于水体中汞离子的快速检测。

智舌对四类霉菌的区分研究

研究智舌是否能监测霉菌液体培养物的综合信息,籍此探讨一类食品中污染的霉菌的快速检测新技术。基于脉冲伏安法的智舌,结合主成分分析对曲霉、青霉、根霉和毛霉4类霉菌进行区分研究,得到最佳电极及其频率段组合,同时引入距离d作为区分的判别依据,并确定能很好地区分2类菌的dmin。结果显示,区分霉菌效果好的有:金电极及钯电极的1Hz、10Hz、100Hz三个频率段和银电极的1Hz频率段;能够作为区分判别依据的定量值d>2.000。研究结果表明,智舌结合主成分分析法区分不同的霉菌是可行的。

一次性酶免疫传感电极快速检测福氏志贺氏菌的研究

为研究快速检测福氏志贺氏菌的电化学免疫传感电极,将羧基化多壁碳纳米管(MWCNT)与壳聚糖(chitosan)制备成复合物,应用此复合物将辣根过氧化物酶标记的福氏志贺氏菌抗体(HRP-anti-S.flexneri)一步直接固定在四通道丝网印刷碳电极表面,制成快速检测福氏志贺氏菌的酶免疫传感电极。采用原子力显微镜表征不同修饰电极的表面形态,循环伏安法考察不同电极的电化学特性和监测酶促反应,利用还原峰峰电流的减小来测定福氏志贺氏菌。在优化的测定条件下,免疫电极对福氏志贺氏菌的检测范围为104～1010cfu/mL,检出限为2.3×104cfu/mL(S/N=3)。而且该酶免疫传感电极具有较好的特异性、重现性、稳定性和准确性,该方法还具有快速、简便、易于操作和价格低廉等优点,具有用于福氏志贺氏菌快速筛检的潜力。

微型DPSA-1仪-SPCE微分电位溶出法快速检测茶叶中的微量铅

为构建一种较好的茶叶中痕量铅元素的快速检测新技术,以优化的微波消解法预处理样品,微型DPSA-1仪结合丝网印刷碳电极(SPCE),采用微分电位溶出法快速检测茶叶中的微量铅元素。优化的试验参数是:Hg2+浓度为3×10-4 mol/L,支持电解质为pH 2.0的0.08 mol/L氯化铵溶液,富集电位-1.0 V,终止电位-0.2 V,富集时间180 s。在此条件下铅含量在10～380μg/L(相当于茶叶中铅含量为0.5～19 mg/kg)范围呈现良好的线性关系,相关系数r=0.9968,检出限1.38μg/L(S/N=3)。研究检测过程中多种干扰离子对痕量铅检测的干扰情况。将所得检测结果与国标法进行t检验,无显著差异。与常规的检测技术相比,微型DPSA-1仪结合SPCE微分电位溶出法检测茶叶中的微量铅元素,具有科学、经济、简便等优点,可实现样品的高比例筛检,还可用于其它类型食品中痕量铅的快速检测,应用前景广阔。

基于多壁碳纳米管/海藻酸钠4-SPCE福氏志贺氏菌酶免疫传感器的研究

目的：为增强响应信号,改善生物相容性,研制可以快速检测福氏志贺氏菌（Shigella flexneri,S.flexneri）的电化学免疫传感器。方法：将辣根过氧化物酶标记福氏志贺氏菌抗体（HRP-anti-S.flexneri）吸附在多壁碳纳米管（MWCNT）/海藻酸钠（SA）复合物修饰的四通道丝网印刷电极表面,制得一次性酶免疫传感器。采用原子力显微镜（AFM）表征免疫电极和孵育抗原后的电极表面形态以及循环伏安法（CV）考察不同修饰电极的电化学特性;采用一步法检测福氏志贺氏菌,CV监测酶促反应;根据免疫反应前、后还原峰峰电流的降低值来检测样品中的福氏志贺氏菌。结果：在优化的试验条件下,酶免疫传感器与福氏志贺氏菌浓度的对数在104~1011cfu/mL范围保持良好的线性关系,检出限为3.1×103cfu/mL（S/N=3）。结论：该酶免疫传感器放大了电化学反应信号,保持了生物物质的活性,具有较好的特异性、重现性（RSD=7.8%）、稳定性（4℃放置两周后电流响应为初始值的95.16%）和准确性（与GB/T 4789.5-2003符合率为97.5%）,有望用于福氏志贺氏菌的快速筛检。

多壁碳纳米管/DMF复合物4-SPCE福氏志贺氏菌酶免疫传感器的研制

利用戊二醛交联法将辣根过氧化物酶标记的福氏志贺氏菌抗体固定在多壁碳纳米管修饰的四通道丝网印刷碳电极表面,制备了可用于检测福氏志贺氏菌的酶免疫传感器。采用循环伏安法对不同修饰电极进行电化学表征。根据抗原-抗体特异性结合形成的免疫复合物使敏感膜有效扩散截面积减小的特性,采用循环伏安法检测样品中的福氏志贺氏菌。在优化的实验条件下,该酶免疫传感器对福氏志贺氏菌的检测范围为104~109 cfu/mL,检出限为3.4×103 cfu/mL（S/N=3）。该酶传感器还具有较好的特异性、重现性、稳定性和准确性。