广东潮州地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因突变分析

目的:了解潮州地区新生儿的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency,G6PD)缺乏症的发病率及基因突变特点。方法:采用荧光斑点法对2010至2012年潮州市中心医院出生的2 500例新生儿进行G6PD缺乏筛查。对初筛阳性的67例标本用高分辨熔解曲线分析技术(high-resolution melting,HRM)和PCR-DNA测序法进行基因分型。结果:本次筛查发现潮州地区新生儿人群的G6PD缺乏症总发生率为2.6%(67/2 500),其中男婴44例(3.22%,44/1 365),女婴23例(2.03%,23/1 135),男女检出率比为1.91∶1(44/23),两者之间无统计学差异(χ2=3.404,P=0.065)。67例初筛阳性标本中58例检测出有突变,9例未检出突变,共检出7种基因突变,含26例1 376 G>T(c.1466G>T,44.83%),22例1 388 G>A(c.1478G>A,37.94%),5例95 A>G(c.185A>G,8.62%),2例871 G>A(c.961G>A,3.45%),1例392 G>T(c.482G>T,1.72%),1例493 A>G(c.583A>G,1.72%),1例1360 C>T(c.1450C>T,1.72%),没有检出复合突变类型。结论:潮州地区具有较高的G6PD发生率。G6PD Canton(1376 G>T)、G6PD Kaiping(1388 G>A)和G6PD Gaohe(95 A>G)3种突变类型最常见。

云南省西双版纳州傣族G6PD缺陷症发生率及突变谱研究

目的了解云南省西双版纳州傣族人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率及基因型。方法在2012年8月至2013年9月期间,用荧光斑点定性法对812例傣族居民进行G6PD缺乏筛查。用反向斑点杂交芯片和PCR-DNA测序法分析G6PD缺乏症的标本的基因型。结果云南西双版纳州傣族人群的G6PD缺乏症总发生率为9.73%(79/812),其中男性32例(9.07%,32/353),女性47例(10.24%,47/459)。79例初筛G6PD缺乏标本65例检测出有突变,共检出8种基因突变类型,含16例1376 G>T(24.24%)、10例1311C>T(15.15%)、9例1388 G>A(13.63%)、7例392 G>T(10.60%)、6例95 A>G(9.09%)、5例1360C>T(7.57%)、2例871 G>A(3.03%)、1例1024C>T(1.52%),和6种复合突变包括2例G871A/C1311T(3.03%)、2例G392T/G1376T(3.03%)、2例G392T/G1388A(3.03%)、1例C1024T/C1311T(1.52%)、1例C1311T/G1376T(1.52%)、1例C1311T/G1388(1.52%)。结论云南西双版纳州傣族G6PD缺乏症检出率高,最常见的三种基因型是G6PD1376 G>T、1311C>T和G6PD1388 G>A。在西双版纳地区当地开展G6PD缺乏症的新生儿筛查、产前筛查和遗传咨询是非常有必要的。

赤道几内亚比奥科岛G6PD缺乏症分子流行病学研究

目的探讨非州西部赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率及基因型。方法在2012年1月至5月期间,用荧光斑点法对2 187名比奥科岛当地居民进行G6PD缺乏症筛查。采用高分辨熔解曲线(High-resolution melting,HRM)分析G6PD缺乏的标本的c.202 G>A与c.376 A>G。对HRM筛选不出突变的G6PD酶学缺乏的样本,针对非洲的其他突变类型:c.542 A>T(rs5030872)、c.680 G>A(rs137852328)、c.968 T>C(rs76723693)进行PCR-DNA测序。结果赤道几内亚比奥科岛人群的G6PD缺乏症总发生率为8.54%(189/2 187),其中男性84例(9.04%,84/929),女性105例(8.34%,105/1 258),男女检出率比为1.08:1。在189例G6PD缺乏标本中共检出两种基因类型,其中包括G6PD A-变异体(c.376 A>G/c.202 G>A)186例(98.41%,186/189G6PD Betica(c.376 A>G/c.968T>C)3例(1.59%3/189)。结论赤道几内亚比奥科岛是G6PD缺乏症高发区,基因型比较单一。HRM技术可用于非洲地区G6PD缺乏症的临床诊断和流行病学研究。

HR—HPV联合液基薄层细胞学检查的临床应用

目的综合评价高危型人乳头瘤病毒（HR—HPV）联合液基薄层细胞学（LCT）检查时农村女性宫颈癌筛查的临床意义，探讨大规模开展女性宫颈癌筛查的有效方式。方法采用实时荧光定量PCR对农村35～60岁女性进行HR-HPV检测，阳性者进行LCT检查，对低级别鳞状上皮内病变（LSIL）及以上病变行阴道镜下组织病理学活捡。结果采集49458例宫颈脱落细胞标本，HR-HPV阳性4080例（8．25％），其中2077例行LCT检查，结果以非典型鳞状上皮细胞意义不明确（ASC-US）及以上病变为阳性，共717例，阳性率34．52％；无上皮内病变及恶性病变（NILM）为阴性，共1360例，阴性率65，48％。63例HSIL与组织病理学活检的复合率为71．43％。结论HR-HPV联合LCT检查提高了女性宫颈癌筛查的敏感度，是大规模宫颈癌筛查行之有效的一种方式。

G6PD缺陷症对恶性疟疾感染风险的影响

目的:观察葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷症不同表型对恶性疟原虫感染的影响。方法:采用横断面研究的方式,将2012年雨季到马拉博地区医院就诊的2 690名比奥克岛当地居民纳入研究。用显微镜镜检、荧光定量PCR结合熔解曲线法检测疟原虫。用荧光斑点法及PCR-DNA测序鉴定G6PD缺陷症。采用Logistic回归进行关联性分析。结果:该人群的G6PD缺陷症的总发生率为9.22%,基因型均为G6PD*A-(c.202 G>A/c.376 A>G)。G6PD缺陷症体现出强烈的疟疾保护作用(P<0.05);不同性别和表型的G6PD缺陷者中,只有男性半合子对疟疾有保护作用(P<0.05),而女性杂合子组与女性纯合子组均无统计学差异(P>0.05)。结论:G6PD缺陷症的男性半合子表型能够减低恶性疟疾感染的风险,但是其机制尚未明确,有待更深入的研究。

潮州地区人乳头瘤病毒52型E6多态性分析

目的:明确潮州地区人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)52型E6编码区的基因多态性。方法:提取101例HPV 52单纯感染者宫颈脱落细胞DNA,通过特异性引物扩增HPV 52-E6编码区全序列,成功获得83份HPV 52-E6 PCR扩增阳性产物,进行测序及BLAST多态性分析。结果:成功获得76条HPV 52-E6基因全序列(447 bp)。该序列与参考株(GQ472848)的一致性为99%。在潮州地区发现11种E6编码区多态性,9种为同义突变,2种有义突变,引起所编码氨基酸改变。根据基因多态性分亚洲群和欧美群2群。亚洲群有7组,第1组,也是最为常见组(50/76)的编码序列与广州(EU924143)和香港(DQ057293)株编码完全匹配,该组称为潮州地方株;第2组(12/76)多态性与广州(EU924144)等报道的E6全序列完全匹配;第3组(仅1例)多态性与浙江大学报道(HM004117)的E6全序列完全匹配;其余4组多态性国际上尚未报道。欧美群有3组,第1组(5/76)多态性与美国(HQ537745)报道的E6全序列完全匹配;第2组(2例)多态性与美国(DQ057291)和德国(X74481)报道的E6全序列完全匹配;第3组(1例)多态性国际上尚未报道。结论:潮州地区HPV 52-E6编码区序列存在多态性,以中国东南部和东南亚国家报道E6编码区序列为主,少数与欧美报道E6全序列完全匹配。为基因疫苗的研制提供了科学依据。

高分辨熔解曲线检测潮汕汉族人群的载脂蛋白E基因多态性

目的研究载脂蛋白E(apo E)基因单核苷酸多态性各等位基因及基因型在潮汕汉族人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异。方法采用高分辨熔解曲线分型技术检测100例潮汕地区汉族人群的Apo E基因rs429358和rs7412多态性。PCR-测序法作为金标准进行比对。结果在潮汕地区汉族人群中存在Apo E基因rs429358和rs7412多态性。潮汕人的Apo E基因型分布以E3/E3最常见,其次为E4/E3。与非洲及欧洲人群比较,Apo E基因多态性的分布频率均存在显著性差异(P<0.05);而与中国汉人比较差异无显著性(P>0.05)。结论采用高分辨熔解曲线法进行Apo E基因多态性检测,其操作简便省时,不易交叉污染;获得的各种基因类型特征性强,适用于临床陕速诊断分型和遗传学人群研究。Apo E的3种常见等位基因频率分布存在地域差异。

赤道几内亚比奥科岛献血者的输血传播感染疾病血清流行学研究和风险因素评估

目的在比奥科岛上献血人群中开展一次输血传播感染疾病（transfusion—transmissibleinfections，TTIs）的血清流行病学调查。方法用金标法和ELISA对合格献血者血样进行4项输血传播感染疾病的检测，包括人类免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝型病毒（HBV）、丙型肝型病毒（HCV）、梅毒螺旋体（LUES），同时用多元回归分析方法评估TTIs疾病的相关危险因素。结果在2937名献血者中HIV、HBV、HCV和梅毒螺旋体的感染率分别为7．83％（95％CI：6．85～8．80）、10．01％（95％CI：8．92～11．10）、3．71％（95％CI：3．03～4．39）和21．52％（95％CI：20．02～23．00）。多重混合感染的阳性率是6．30％（95％CI：5．42～7．18）。同时发现女性献血者的HIV和梅毒感染阳性率明显高于男性献血者（HIV：AOR=I．50，95％CI：1．10-2．04，P=0．010；梅毒：AOR=1．27，95％CI：1．02～1．58，P=0．034）。岛上的未规划居住区是艾滋病、乙肝和梅毒感染的显著危险因素（HIV：AOR=I．66，95％CI：1．04～2．66，P=-0．033；HBV：AOR=I．78，95％CI：1．11～2．83，P=-0．016；梅毒：AOR=I．73，95％CI：1．26-2．37，P=-0．001）。结论比奥科岛的献血人群中输血传播感染的阳性率极高，当地政府和卫生部门应采取更有效的干预措施来提高血液安全。

赤道几内亚Bioko岛的恶性疟原虫多药抗性基因(pfMDR-1)的研究

目的对赤道几内亚Bioko岛上恶性疟原虫多药抗性基因(pfMDR-1)进行分析,为Bioko岛的疟疾防控和治疗提供依据。方法2012年雨季期间采集的恶性疟原虫感染患者样本151份,用巢式PCR技术特异性扩增N86Y、E130K、Y184F、S1034C、N1042D、V1109I、D1246Y耐药分子标记的pfMDR-1基因片段,然后进行测序分析。结果虫株中共发现了4种不同的单倍型:YEY/SNVD、NEF/SNVD、YEF/SNVD和NEY/SNVD。91.39%(138/151)的样本发现了耐药性位点突变,包括3.31%(5/151)的86Y,29.80%的184F,和58.29%(88/151)的双重突变86Y/184F。结论结果表明赤道几内亚Bioko岛上的恶性疟原虫株存在较高比例耐药基因突变和耐药复合基因突变,为当地的抗疟疾选用药物提供指导。

赤道几内亚比奥科岛居民的镰型红细胞病的流行病学调查

目的了解非洲赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)人群的镰刀形红细胞病(sickle cell disease,SCD)的流行病学特点。方法在2013年1月至12月期间,采用红细胞镰变试验对1 036名本岛居民进行筛查。用高分辨熔解曲线(high-resolution melting,HRM)分析和PCR-DNA测序法对筛查阳性的标本进行基因型鉴定。结果赤道几内亚比奥科岛居民的SCD发生率为16.99%(176/1 036)。HRM法与PCR-DNA测序法具有较好的一致性(100%)。结论比奥科岛是SCD高发区,当地政府和卫生部门应采取有效的干预措施来减少这种疾病的危害。HRM法对SCD的鉴定准确性较高。

广东梅州地区的异常血红蛋白的分子流行病学调查

目的:了解广东省梅州地区异常血红蛋白病的分子流行病学特征。方法:共有15 229人参加了本次异常血红蛋白的电泳筛查,每人用EDTA-K2抗凝真空管采血2 ml。用Sysmex XT-1800i全自动血球分析仪检测各项红细胞参数,Gap-PCR与反向斑点杂交检测地贫及Hb E。采用PCR-测序法检测异常血红蛋白点突变。结果:梅州地区的异常血红蛋白发生率为0.479%(73/15 229)。本次筛查共发现10种异常血红蛋白,包括1例Hb J-Broussais、7例Hb J-Bangkok、4例Hb Wenchang-Wuming、12例Hb K NewYork、13例Hb Q-Thailand、2例Hb Queens、12例Hb G-Chinese、1例Hb G-Waimanalo、3例Hb G-Siriraj和18例Hb E。结论:广东省梅州地区的异常血红蛋白病发生率高于全国平均水平,异常血红蛋白的基因品种及频率体现出客家人群特有的南方人群以及北方人群交汇融合的特点。

宁夏银川回族G6PD缺乏症发生率及突变谱研究

目的了解宁夏银川地区回族葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症(G6PD deficiency)的发生率及基因突变类型。方法在2012年10月至2013年5月,用荧光斑点法对1041例成年回族进行G6PD酶学筛查;用PCR-反向斑点杂交芯片(PCRRDB)和PCR-DNA测序法鉴定酶学筛查缺陷样本的突变型。结果回族人群的G6PD缺乏症的发病率为0.58%(6/1041),其中女性4例(0.39%,4/650),男性2例(0.19%,2/391)。G6PD缺乏症是世界上最为普遍的单基因遗传病之一,男女检出比率为1:2(2/4)。在6例G6PD缺乏症者中5例为单一突变,1例为复合突变。有6种突变被检出,分别为c.392 G>T、c.1024 C>T、c.1311 C>T、c.1360 C>T、c.1376 G>T、c.1388 G>A。结论宁夏地区回族人群G6PD缺乏症发生率较低。c.392 G>T和c.1311 C>T为回族G6PD缺乏症主要的基因型。

基层医院超声介入治疗肝脓肿的临床研究

肝脓肿是肝脏受到感染后,由于未及时进行处理而形成的肝脏感染性疾病,分为细菌性肝脓肿和阿米巴性肝脓肿以及特殊性肝脓肿。细菌性肝脓肿在临床上较为常见,且发病较急,主要症状包括寒战、高热、肝区疼痛以及肝肿大,治疗不及时或不得当可能导致死亡。临床上对于尚未成型的小脓肿选择保守治疗,但针对较大脓肿则可采用手术切开及引流方式治疗。