基于cytb引物的鱼粉原料鱼组成分子鉴定方法

本研究旨在开发一种灵敏、准确、简便的分子鉴定方法,实现对鱼粉中原料鱼组成的鉴定。采用cytb和16S rDNA 2对引物,分别对9种海、淡水鱼和7种商品鱼粉的基因组DNA进行扩增后发现,cytb较16S rDNA引物可获得良好的扩增效果,各样品中均出现较清晰明亮的目的条带。将cytb引物扩增鱼粉基因组DNA得到的目的片段分别连接到克隆载体pMD19-T,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞后,挑取阳性克隆进行测序,将测序结果进行BlastN比对分析。结果显示:在7种商品鱼粉中共鉴定到33个鱼类物种,主要包括鳀属(Engraulis)、圆鲹属(Decapterus)、沙丁鱼属(Sardina)、竹荚鱼属(Trachurus)、油鲱属(Brevoortia)及罗非鱼属(Tilapia)的各种鱼类,种类数量远超产品标签所示鱼种范围。为验证该方法的可靠性,重复以上步骤,对2种添加已知鱼种的自配鱼粉进行了验证性鉴定,鉴定结果与试验设计吻合。综上可知,基于cytb引物的分子鉴定技术可实现鱼粉中原料鱼组成的鉴定,鉴定结果将为鱼粉质量的准确判断提供丰富信息。