新疆伊贝母种质资源的ISSR遗传多样性分析

目的分析新疆16个地区伊贝母种质资源的简单重复区间序列（ISSR）遗传多样性。方法采用ISSR分子标记技术,对16个居群128份样品进行遗传多样性分析。结果在74条引物中共筛选出15条条带清晰、多态性好的引物,然后共扩增出239条条带,其中227条具多态性,占94.98%。伊贝母居群的遗传多样性水平为Na=1.949 8,Ne=1.342 6,H=0.219 0,I=0.350 3,Ht=0.222 7±0.026 6,Hs=0.104 6±0.005 5,Gst=0.530 4,基因流（Nm＊）=0.442 7,遗传一致度（I）=0.734 4~0.966 6,遗传距离（D）=0.034 0~0.308 8。由此可知,伊贝母种质资源在整体上有较高的遗传多样性,遗传变异存在于居群间,但基因交流程度比较有限。结论新疆贝母和伊犁贝母可被区分开,遗传相似系数介于0.69~0.95之间。

新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性ISSR分析

目的：对新疆贝母属8种药用贝母进行遗传多样性分析及评价。方法：采用ISSR分子标记技术综合分析8种药用贝母23份样品的遗传多样性。结果：16条引物共扩增出199条条带,其中多态性条带为195条,占97.99%。8种药用贝母遗传多样性水平为：Na=1.979 9,Ne=1.523 0,H=0.308 4,I=0.466 9,Gst=0.698 5,基因流（Nm＊）为0.215 9,遗传一致度（I）和遗传距离（D）分别为0.747 4和0.301 4。表明8种药用贝母品种整体上有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于不同种间,基因交流程度比较有限。聚类结果显示,所有贝母均可明显区分开来,并聚为4组,遗传相似系数范围在0.58~0.99。结论：揭示了新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性水平及亲缘关系,为其品种分类及种质保护提供理论依据。

栽培与野生伊犁贝母药材生药学对比研究

目的:比较人工栽培与野生伊犁贝母药材的生药学差异。方法:采用性状鉴别、显微鉴别和薄层色谱法对栽培与野生伊犁贝母的生药学进行了比较研究;采用浸出物测定法对栽培与野生伊犁贝母中醇浸出物含量进行了定性分析;采用酸性染料比色法对二者总生物碱含量进行了测定。结果:人工栽培与野生伊犁贝母药材在性状及显微特征方面有明显的相似;薄层斑点数目、颜色及Rf值方面也明显相似;人工栽培与野生伊犁贝母药材总生物碱含量基本一致,但人工栽培伊犁贝母药材醇浸出物含量比野生的要高。结论:人工栽培与野生伊犁贝母药材生药学差异不显著,在临床上,为栽培伊犁贝母代替野生伊犁贝母药用提供了依据。

新疆贝母属药用贝母ISSR-PCR体系的确立和优化

目的:建立适合新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR优化反应体系,为新疆贝母属8种药用贝母品种鉴定和遗传多样性研究提供依据。方法:综合利用单因素实验和L16(45)正交试验,对因素Taq DNA聚合酶、d NTPs、Mg2+、引物浓度、模板DNA含量进行优化,并考察循环次数、延长时间及退火温度。结果:每个因素的不同水平对PCR反应有显著影响,其中Mg2+影响最大。新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR最适体系为50μL:5μL 10×Buffer、2.5 mmol/L Mg2+、0.30 mmol/L d NTPs、0.8μmol/L引物、0.75 U Taq酶、1.0 ng/μL模板DNA、33.35μL dd H2O。循环次数为45 cycle,延伸时间10 min,引物UBC853的最适退火温度为49.8℃。结论:建立的新疆贝母属植物总DNA的ISSR-PCR反应体系经23份新疆贝母属8种药用贝母样品检验,ISSR-PCR扩增效果显著,证明该体系具有较高的稳定性和可重现性,为新疆贝母属8种药用贝母遗传多样性的分子标记研究奠定基础。

高效液相色谱法测定黑种草子中黑种草苷含量

目的建立黑种草子中黑种草苷的含量测定方法,为其开发利用提供依据。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.0175 mol·L^(-1)乙酸水溶液(B),梯度洗脱(0～20 min,13%→18%A,>20～25 min,18%→13%A);流速1.0 mL·min^(-1);柱温30℃;检测波长290 nm。结果黑种草苷在0.01～0.30 mg·mL^(-1)范围内,峰面积与进样浓度呈良好的线性关系(R^2=0.9991);精密度、稳定性、重复性实验RSD均小于2%;平均回收率为96.66%,RSD为1.25%(n=6)。结论该方法重复性好,准确性高,可用于黑种草子药材的质量控制。

酶辅助超声提取阿尔泰金莲花总黄酮工艺研究

阿尔泰金莲花是预防感冒的常用药材,黄酮类化合物是其主要的化学成分。为了深入开发这一药食兼用资源,以黄酮提取率为考察指标,通过单因素试验考察酶种类、酶添加量、料液比、pH、提取时间和提取温度对阿尔泰金莲花总黄酮提取率率的影响,进一步采用Box-Behnken中心组合试验及响应面分析,优化阿尔泰金莲花总黄酮的提取工艺。结果表明,纤维素酶最适合辅助超声提取阿尔泰金莲花总黄酮,最佳工艺条件为:pH为4,料液比1:40,超声功率90W,酶添加量量:1.4%,乙醇浓度47.0%,提取时间38.0min,提取温度39.0℃;在此条件下,黄酮提取率达到了18.0%以上。该工艺简单高效,可用于阿尔泰金莲花总黄酮的提取。

阿尔泰金莲花总黄酮及其荭草素2″-O-β-L-半乳糖苷的提取工艺

目的研究阿尔泰金莲花总黄酮及其荭草素2″-O-β-L-半乳糖苷(OGA)的提取工艺。方法在含量测定基础上,以总黄酮和OGA含量以及DPPH自由基清除能力为评价指标,以乙醇浓度、料液比、提取时间和提取次数为因素,通过L_9(3~4)正交实验设计优选阿尔泰金莲花总黄酮及其OGA的提取工艺。结果阿尔泰金莲花总黄酮及其OGA的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数70%,料液比1∶30(g·m L^(-1)),提取时间1.5 h,提取2次;该工艺可以获得高含量的总黄酮[(170.53±3.30)mg·g^(-1)]和OGA[(29.02±0.46)mg·g^(-1)]。抗氧化活性随提取物中总黄酮和OGA含量的增大而增大。结论该提取工艺操作简便,可为阿尔泰金莲花的开发利用提供参考。

异槲皮苷的生物活性研究进展

介绍黄酮醇苷类化合物异槲皮苷的生物活性研究概况。综合国内外文献报道,简述异槲皮苷的生物活性。异槲皮苷具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂、神经保护等生物活性,其具有较大的药用价值和应用前景,值得深入开发研究。

滨蒿提取物中3种二咖啡酰奎宁酸的含量测定

目的建立滨蒿提取物中3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸的含量测定方法。方法采用HPLC法测定,色谱条件:Shim-pack VP-ODS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.036mol·L^(-1)磷酸二元梯度洗脱;流速:1.0mL·min^(-1);柱温:30℃,检测波长:327nm。结果 3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸分别在0.010 3~0.309,0.009 7~0.291和0.010 5~0.315mg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);加样回收率分别为99.23%,101.30%和100.63%;RSD值分别为1.59%,0.83%和1.23%(n=6);样品溶液在32h内稳定。结论该方法操作简便,重复性好,可用于滨蒿提取物的质量控制。

纤维素酶辅助超声提取荭草素2″-O-β-L半乳糖苷工艺研究

目的:优化阿尔泰金莲花荭草素2″-O-β-L半乳糖苷(OGA)的纤维素酶辅助超声提取工艺。方法:以OGA提取率为考察指标,通过单因素试验考察p H、酶添加量、料液比、提取时间和提取温度对OGA提取率的影响,进一步采用Box-Behnken中心组合试验及响应面分析优化阿尔泰金莲花OGA的纤维素酶辅助超声提取工艺。结果:最佳提取工艺条件为p H=4、料液比1∶40、超声功率90W、酶添加量1.5%、乙醇浓度48.0%、超声时间38.0 min、超声温度40℃;在此条件下,OGA提取率达到了2.7%以上。结论:该工艺简单高效,可用于荭草素2″-O-β-L半乳糖苷的提取。

不同产地多伞阿魏挥发油成分GC-MS指纹图谱研究

目的建立多伞阿魏药材的GC-MS指纹图谱。方法采用水蒸气蒸馏法提取8个产地44份多伞阿魏挥发油,通过GC-MS分析其成分。运用中药色谱指纹图谱相似度建立共有模式,以2种方法计算相似度评价图谱的相似性,同时利用聚类分析法和主成分分析法分析结果。结果建立了多伞阿魏挥发油GC-MS指纹图谱分析方法;对44份多伞阿魏挥发油样品进行了分析,确立了12个共有峰。GC-MS指纹图谱的相似度>0.90的有37个。44份多伞阿魏药材的挥发油可通过系统聚类归为2类,该结果与指纹图谱的相似度分析结果非常相似,不同产地多伞阿魏药材的挥发油相似度较高。主成分分析表明愈创木醇在多伞阿魏挥发油的质量控制中起着比较重要的作用。结论该方法简便、准确、重现性好,可用于多伞阿魏药材的质量综合评价。

贝母属药用贝母总DNA提取方法的比较研究

目的比较筛选最适于贝母属药用贝母的总DNA提取方法。方法利用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的SDS法提取贝母属药用贝母的总DNA;通过核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳方法检测其浓度和纯度;进行ISSR-PCR扩增检测所得总DNA质量。结果 3种方法均可提取出产量较高的基因组DNA,但试剂盒法相较提取的总DNA纯度最高,质量最好,并且均能扩增出丰富清晰的条带,稳定性高,操作简单耗时短。改良的CTAB法、SDS法提取的总DNA纯度、质量均次于试剂盒法,操作复杂耗时长,不适用于下游的分子生物学实验。结论试剂盒法为贝母属药用贝母总DNA提取的最佳方法,其所得样品适用于PCR及其他分子生物学研究。

沼生忍冬藤化学成分及3种成分的含量测定

目的:研究沼生忍冬藤的化学成分并建立HPLC同时测定沼生忍冬不同药用部位中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的方法。方法:采用硅胶、反相硅胶、大孔树脂和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶等多种色谱技术进行分离纯化,并通过理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。采用HPLC-UV法测定含量,色谱条件:Phenomenex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~13 min,12%A;13~25 min,12%~22%A;25~45 min,22%A),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长327 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果:从沼生忍冬藤中分离得到10个化合物,分别鉴定为:3,7-二甲基槲皮素(1),3,3'-二甲基槲皮素(2),槲皮素(3),乌苏酸(4),马钱子苷(5),绿原酸(6),槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷(7),3,4-二咖啡酰奎宁酸(8),3,5-二咖啡酰奎宁酸(9)和4,5-二咖啡酰奎宁酸(10)。6,9和10三种成分均能达到基线分离,且线性关系良好,平均加样回收率分别为100.15%,99.68%和99.52%。沼生忍冬中3种成分的含量为花最高(3.99%,1.77%,2.33%),叶次之(2.62%,1.73%,0.90%),藤最低(0.74%,0.25%,0.15%)。结论:化合物1,2和7为首次从忍冬属植物中分离得到,其余化合物均为首次从该植物中分离得到;含量测定方法准确,简便,分离效果好,可用于沼生忍冬中绿原酸,3,5二咖啡酰奎宁酸和4,5二咖啡酰奎宁酸含量的测定。