反相高效液相色谱法测定奎尼丁血药浓度

反相高效液相色谱法测定奎尼丁血药浓度＊许劲秋李金恒宫剑滨１李俭春１（南京军区南京总医院临床药理科、１心血管内科，南京２１０００２）１９９７－１０－３０收稿＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９６７０８４３作者简介：许劲秋，女，２７岁，硕士；李金恒，男，...

反相高效液相色谱法测定奎尼丁血药浓度

目的 :建立适合临床检测奎尼丁血药浓度的反相高效液相色谱法。 方法 :血样在碱性条件下 ,经甲醇和氯仿沉淀提取 ,流动相重组进样 ,色谱分析条件为 C18反相柱作分析柱 ,流动相组成为甲醇∶乙腈∶水∶正丁胺∶醋酸 =80∶ 2 0∶ 10 0∶ 0 .4∶ 0 .4 ( v/ v) ,紫外检测波长 334 nm。 结果 :最低检测浓度为 0 .599μmol/ L,线性范围 1.36～ 2 7.2 μmol/ L( r=0 .9992 ) ,平均回收率为 83.9% ,日内、日间的相对标准偏差 <5%。 结论 :本法准确、灵敏度高 。

国产异福酰胺生物等效性研究

12名男性健康受试者采用随机分组交叉自身对照给药方案。单剂量口服(内含利福平(RFP)480mg,吡嗪酰胺(PZA)1000mg,异烟肼(INH)320mg)参比药进口异福酰胺和国产试验药各4片 ,对国产复方利福平片与进口异福酰胺作人体生物利用度比较。用HPLC法分别测定利福平,吡嗪酰胺和异烟肼血药浓度。用3P97计算机程序求药代动力学参数。试验药中利福平 ,吡嗪酰胺和异烟肼的主要药代动力学参数:T1/2 3.89±1.16h,11.02±1.62h和2.39±1.03h;Tmax 1.08±0.36h,0.52±0.25h和0.42±0.22h;Cmax 7.49±1.27mg·L-1 ,28.71±6.57mg·L-1 和10.18±2.04mg·L-1;AUC为46.48±10.35mg·h·L -1,347.06±28.78mg·h·L -1和26.55±13.21mg·h·L -1。相对于参比药的生物利用度为103.84 %±0.68 %,97.55 %±10.84 %和105.93 %±5.67 %。AUC和Cmax 经双单侧t检验结果显示两种制剂为生物等效制剂。

反相高效液相色谱法测定血浆中阿米替林及其代谢物去甲替林的总浓度和游离浓度

目的 建立灵敏、简便、适合临床监测阿米替林及其代谢物去甲替林总浓度与游离浓度的反相高效液相色谱法(RP HPLC)。方法 血样在碱性条件下 ,经一步液 液提取法后 ,在C 18柱上进行分离。流动相为乙腈∶水 =30∶70(V/V) ,其中含三乙胺 0 5 %和磷酸 0 3%。血浆样品药物总浓度测定为RP HPLC ,游离药物测定为超滤离心 /RP HPLC。结果 阿米替林和去甲替林的标准曲线在 4～ 2 0 0μg·L-1(总浓度 )和 4～ 6 4μg·L-1(游离浓度 )范围内呈线性。两药的平均回收率分别为 10 2 0 %± 3 77%与 99 3 %± 7 13 % ;日内RSD分别为 2 40 %～ 4 39% ,3 0 2 %～4 2 8% ;日间RSD分别为 4 92 %～ 6 15 % ,6 35 %～7 48%。测定了 7例健康志愿者单剂量口服盐酸阿米替林片 5 0mg后 6h的血药浓度。血浆阿米替林总浓度为 18 0～ 2 7 2 μg·L-1,游离浓度为 1 4～ 2 5 μg·L-1。血浆去甲替林总浓度为 (2 0± 0 4) μg·L-1(1 5～ 2 5 μg·L-1)。阿米替林的血浆蛋白结合率在 89 8%～ 92 6 %之间。结论 本方法简便、快速 ,灵敏度与选择性高 ;成本低 。

老年心功能不全患者血清地高辛样免疫活性物质测定

采用荧光极化免疫分析法，检测了１５例老年心功能不全病人血清地高辛样免疫活性物质（ＤＬＩＳ）浓度。以ＴＤｘ仪最低检测限０２５６ｎｍｏｌ·Ｌ－１为阳性检测标准，ＤＬＩＳ检出阳性率为４６７％（７／１５），浓度范围０２６～１５２ｎｍｏｌ·Ｌ－１，平均浓度０５５±０４４ｎｍｏｌ·Ｌ－１；其中１例病人血清ＤＬＩＳ浓度高达１５２ｎｍｏｌ·Ｌ－１。结果表明老年心功能不全患者血清中含有较高水平的ＤＬＩＳ；提示对这些患者若因病情需要而用地高辛治疗时，其后的血浓度测定结果易引起“过高估计”。

游离药物测定在治疗药物监测中的意义

药物在治疗血浓度范围内的血浆蛋白结合率通常是较为恒定的，总浓度水平基本上可以反映游离药物浓度。近年发现有些药物的血药总浓度与游离药物水平不平行。此时，游离药物测定的临床价值明显优于总浓度测定。游离药物测定最常用的方法有平衡透析法和超滤法等，后者具有简便快捷的特点，且所需血样量极少，适合病人血样分析。临床上常进行游离药物测定的有某些抗癫痫药，抗抑郁药和心血管药物等。

类粘蛋白的遗传多态性对奎尼丁游离药物浓度与蛋白结合率的影响

目的：探讨类粘蛋白（ｏｒｏｓｏｍｕｃｏｉｄ，ＯＲＭ）表型对弱碱性药物奎尼丁血清游离浓度和蛋白结合率的影响。方法：对健康受试者的去唾液酸血清ＯＲＭ用等电聚焦电泳、免疫印迹法进行表型分型。ＯＲＭ１的３种表型分别为纯合子ＯＲＭ１Ｆ１（ｎ＝１０）， ＯＲＭ１Ｓ（ｎ＝８），和杂合子ＯＲＭ１ Ｆ１Ｓ（ｎ＝１０）。受试者口服单剂量的硫酸奎尼丁片２００ｍｇ，测定服药后不同时间血清奎尼丁总浓度（ＲＰ－ＨＰＬＣ）和游离浓度（微超滤离心／ＲＰ－ＨＰＬＣ）。结果：给药后２４ｈ内，３组不同ＯＲＭ１表型者奎尼丁血清总浓度的经时过程、血浆 ｔ１／２、 Ｃｍａｘ和ｔｍａｘ值相似。但ＯＲＭＩ Ｆ１表型组的奎尼丁游离浓度高于ＯＲＭ１Ｓ和ＯＲＭ１ Ｆ１Ｓ表型组，而其蛋自结合率（８０．２１±６．１３Ｔ）却明显低于ＯＲＭ１Ｓ（８９．３１±４．８３％）（Ｐ＜０．０１）和ＯＲＭ１ Ｆ１Ｓ（８７．２６±３．４２％）（Ｐ＜０．０１）表型者；奎尼丁游离药物分数则分别为 ＯＲＭ１ Ｆ１：１９．７９％，ＯＲＭ１ Ｓ １０．６９％和ＯＲＭ１ Ｆ１Ｓ １２．７４％（Ｐ＜０．０１）。结论：不同ＯＲＭ１表型明显影响弱碱性药物奎尼丁的血清游离药物浓度和蛋白结合率； ＯＲＭ１ Ｆ１表?

健康男性成人血清α_1酸性糖蛋白浓度及其与年龄的相互关系

研究了成人血清α１酸性糖蛋白 （α１ ＡＧＰ） 的浓度范围及其与年龄的关系。采用免疫比浊法， 测定了２１３例男性健康成人血清α１ＡＧＰ浓度。青年组（１８岁～２３岁，ｎ＝ １７２）和非青年组（２３～５９岁，ｎ＝ ４１）男性血清α１ＡＧＰ浓度分别为５６３９±２９５ （ｍ ｇ／Ｌ）（范围４４４５ ｍ ｇ／Ｌ～６１８０ ｍ ｇ／Ｌ）， ５６４５±３２７ （ｍ ｇ／Ｌ）（范围４６０９ ｍ ｇ／Ｌ～６４７５ ｍ ｇ／Ｌ）。两组的血清α１ＡＧＰ浓度无显著差异（Ｐ＞ ００５）。α１ＡＧＰ浓度的９５％ 参考值范围为下限５０５０ ｍ ｇ／Ｌ，上限为６２３０ ｍ ｇ／Ｌ。回归分析表明，健康男性的血清α１ ＡＧＰ浓度９５％ 以上的个体在５０５０～６２３０ （ｍ ｇ／Ｌ） 之间。健康男性成人血清α１ＡＧＰ浓度与年龄无关。

红细胞标记抗体的电化学免疫分析

研究了红细胞标记抗体的电化学免疫分析法。用乙型肝炎单克隆抗体致敏的红细胞作双抗夹心免疫分析的酶标二抗替代物。在免疫反应完成后，结合抗原－抗体免疫复合物上的敏化红细胞在低渗溶液中溶血，释放出血红蛋白（Ｈｂ）。Ｈｂ催化底物邻苯二胺的氧化反应，产生有电活性的产物２，３－二氨基吩嗪（ＤＡＰ）。用单扫描示波极谱法检测ＤＡＰ。ＤＡＰ的极谱还原电流与被测乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）浓度线性相关。本方法可检出０．５μｇ／ＬＨＢｓＡｇ，比酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）灵敏度高１０倍。

估算肾功能不全的心衰患者血清地高辛总浓度和地高辛样免疫活性物质浓度

用超滤荧光极化免疫分析法测定血清地高辛游离浓度，结合其游离百分率，估算了１２位伴有肾功能不全的慢性心衰患者血清地高辛总浓度和地高辛样免疫活性物质（ＤＬＩＳ）浓度。结果表明，患者的血清实测地高辛游离浓度为０．７９±０．４８ｎｍｏｌ·Ｌ－１；实测地高辛总浓度为１．３１±０．８０ｎｍｏｌ·Ｌ－１，明显高于计算的地高辛总浓度（１．０５±０．６４ｎｍｏｌ·Ｌ－１），Ｐ＜０．０１。计算的ＤＬＩＳ浓度为０．２７±０．１９ｎｍｏｌ·Ｌ－１，该结果与用Ｄａｓｇｕｐｔａ等新近报道的计算方法获得的数据（０．２９±０．２２ｎｍｏｌ·Ｌ－１）一致（Ｐ＞０．０５）。

213例健康人血清α_1-酸性糖蛋白浓度及其与年龄的相关关系分析

目的 研究健康男性成人血清α1 酸性糖蛋白 (α1 AGP)的浓度范围及其与年龄的关系。方法 采用免疫比浊法 ,测定经临床实验室检查证实的 2 13例男性健康成人血清α1 AGP浓度 ,并观察其与年龄的相互关系。结果 青年组 (18～ 2 3岁 ,n =172 )和非青年组 (2 4～ 5 9岁 ,n=41)男性血清α1 AGP浓度分别为 (5 6 3.9± 2 9.5 )mg/L(范围 44 4.5～ 6 18.0mg/L)和 (5 6 4.5± 32 .7)mg/L(范围 46 0 .9～ 6 47.5mg/L) ,两组健康人的血清α1 AGP含量无显著差异 (P >0 .0 5 )。α1 AGP浓度的 95 %参考值范围为 :下限 5 0 5 .0mg/L ,上限 6 2 3.0mg/L。回归分析表明 ,2 13例健康男性的血清α1 AGP浓度与年龄无相关性 (r=0 .0 35 3,P>0 .0 5 )。结论 健康男性成人血清α1 AGP浓度水平较低 ;95 %以上的个体 ,浓度为 5 0 5 .0～ 6 2 3.0mg/L。健康男性成人的年龄不影响其血清α1 AGP浓度。

类粘蛋白的遗传表型对阿米替林血浆游离型药物浓度和蛋白结合率的影响

目的：探讨类粘蛋白(orosomucoid, ORM)表型对弱碱性药物阿米替林血浆游离浓度和蛋白结合率的影响. 方法：对28名健康受试者的去唾液酸血清ORM用等电聚焦电泳、免疫印迹法进行表型分型.ORM1的三种表型分别为纯合子ORM1 F1 (n=10)、ORM1 S (n=8)和杂合子ORM1 F1S(n=10).受试者口服单剂量的硫酸阿米替林片50 mg,测定服药后不同时间血浆阿米替林总浓度(RP-HPLC)和游离浓度(微超滤离心/RP-HPLC). 结果：给药后12和24 h,三组不同ORM1表型者阿米替林血浆总浓度的经时过程、血浆t1/2、Cmax和tmax值相似.与ORM1 S表型组比较,ORM1 F1表型组的阿米替林游离浓度较高；而蛋白结合率较低,12 h为(82.77±4.05)%,24 h为(79.99±4.39)% (P<0.01).杂合子ORM1 F1S表型组的游离药物浓度和蛋白结合率介于两组纯合子表型之间. 结论：不同ORM1表型,将明显影响弱碱性药物阿米替林的血清游离药物浓度和蛋白结合率；ORM1 F1表型者药物的血浆蛋白结合率最低,而游离型药物浓度最高.临床用药中应予以注意,并适当调整给药剂量.

估算肾功能不全的心衰患者血清地高辛总浓度和DLIS浓度

用超滤－ＦＰＩＡ测定血清地高辛游离浓度，结合其游离百分率，估算了１２例伴有肾功能不全的慢性心衰患者血清地高辛总浓度和地高辛样免疫活性物质（ＤＬＩＳ）浓度。结果表明，１２例患者实测地高辛游离浓度为０．７９±０．４８（０．４６～２．１０）ｎｍｏｌ／Ｌ；实测地高辛总浓度为１．３１±０．８０ｎｍｏｌ／Ｌ，明显高于计算的地高辛总浓度（１．０５±０．６４ｎｍｏｌ／Ｌ），差异显著（Ｐ＜０．０１）。计算的地高辛样免疫活性物质浓度为０．２７±０．１９（０．０７～０．７６）ｎｍｏｌ／Ｌ，该结果与用Ｄａｓｇｕｐｔａ等新近报道的计算方法获得的数据（０．２５±０．１３ｎｍｏｌ／Ｌ）一致。

氨基甙类抗生素的新给药方案

氨基甙类抗生素的新给药方案李金恒许劲秋作者单位：南京军区南京总医院临床药理科，南京２１０００２自本世纪４０年代中期链霉素问世以来，氨基甙类抗生素成为细菌感染性疾病的重要治疗药物，至今仍广泛地应用于临床。该类药物常用的给药方法是将一日量分２３次给予。近...

哌仑西平的单扫描示波极谱法测定

本文报道一种测定哌仑西平的单扫描示波极谱法.在0.1mol/L NH_4CI-NH_3·H_2O(pH8.0±0.1)缓冲液中,哌仑西平有一极谱还原波,其峰电位为-1.51(vs.SCE),其—阶导数峰高与哌仑西平浓度在6.6×1O^(-7)～4.6×10^(-6)mol/L(r=0.9981)和6.6×10^(-6)1.6×10^(-5)mol/L(r=0.9991)范围内有线性关系.检测限为3.4×10^(-7)mol/L.应用本方法测定盐酸哌仑西平片中哌仑西平的含量,所得结果与标示量相符很好.相对标准偏差为1.24%(n=6);回收率为99.4%.实验表明,哌仑西平极谱还原波是不可逆波,是吡啶环的二电子二质子还原过程.

健康男性成人血清α_1-酸性糖蛋白浓度及其与年龄的相互关系

目的：研究健康男性成人血清α１－酸性糖蛋白（α１－ＡＧＰ）的浓度范围及其与年龄的关系。方法：采用免疫比浊法，测定了经临床实验室检查证实健康的２１３例男性成人血清α１－ＡＧＰ浓度。结果：青年组（１８～２３岁，ｎ＝１７２）和非青年组（２４～５９岁，ｎ＝４１）男性血清α１－ＡＧＰ浓度分别为５６３．９±２９．５ｍｇ／Ｌ（范围４４４．５～６１８．０ｍｇ／Ｌ），５６４．５±３２．７ｍｇ／Ｌ（范围４６０．９～６４７．５ｍｇ／Ｌ）。两组比较，血清α１－ＡＧＰ浓度无显著差异（Ｐ＞０．０５）。α１－ＡＧＰ浓度的９５％参考值范围为下限５０５．０ｍｇ／Ｌ，上限为６２３．０ｍｇ／Ｌ。回归分析表明，２１３例健康男性的血清α１－ＡＧＰ浓度与年龄无相关性（ｒ＝０．０３５３，Ｐ＞０．０５）。结论：健康男性成人９５％以上的个体，血清α１－ＡＧＰ浓度在５０５．０～６２３．０ｍｇ／Ｌ之间，较高的α１－ＡＧＰ浓度提示存在某种疾病或病理状态。健康男性成人血清α１－ＡＧＰ浓度与年龄无关。

老年心功能不全患者血清地高辛样免疫活性物质测定

目的：检测老年心功能不全患者血清地高辛样免疫活性物质（ＤＬＩＳ）浓度，为临床合理用药提供依据。方法：老年心功能不全的住院患者１５例（平均年龄６９．８±６．９岁），用荧光极化免疫分析法，以ＴＤｘ仪最低检测限０．２５６ｎｍｏｌ／Ｌ为ＤＬＩＳ的阳性检测标准。结果：ＤＬＩＳ检出阳性率为４６．７％（７／１５），其浓度范围０．２６～１．５２ｎｍｏｌ／Ｌ，平均浓度０．５５±０．４４ｎｍｏｌ／Ｌ；其中１例患者血清ＤＬＩＳ浓度高达１．５２ｎｍｏｌ／Ｌ。结论：老年心功能不全患者血清中含有较高水平的ＤＬＩＳ；提示对这些患者若因病情需要而用地高辛治疗时，其后的血浓度测定结果易引起“过高估计”，应当谨慎地评价地高辛血浓度测定结果。

氧极谱催化波法测定二苯胺

本文报道一种极谱测定二苯胺的新方法,它是基于二苯胺引起的氧极谱催化波.这个氧极谱催化波是由于二苯胺催化了电生超氧离子O_2^(-)的歧化反应产生的.本方法简单方便,有良好选择性.应用本方法测定了化工原料二苯胺的含量,结果令人满意.