透明质酸产生菌发酵培养基及培养条件优化

透明质酸具有保湿能力以及润滑等功效,在软骨、皮肤、脐带和鸡冠中含量极高,且在化妆品和护肤品方面、控制癌症以及新型药物载体设计方面的应用极其广泛。为了继续探究微生物摇瓶发酵下提高透明质酸产量的营养和培养条件,实验对一株兽疫链球菌菌株通过单因素和正交实验法进行发酵培养基及培养条件优化,最终确定兽疫链球菌的最佳发酵条件为:发酵温度37℃、初始pH值7.4、发酵时间为16 h,最佳培养基配比为葡萄糖3%,牛肉膏4.5%,MgSO_4·7H_2O 0.03%,异甘草素0.09%。

产生广谱活性物质的放线菌Streptomyces bacillaris的分离鉴定

从台州市填海工业园淤泥中分离功能型放线菌,评价其不同发酵液的抗菌活性,以发掘和扩充其潜在的经济价值。采用连续稀释法将淤泥样品在HV培养基和高氏培养基上分离和纯化培养放线菌,通过菌块对峙法测定初筛放线菌对大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、藤黄微球菌(M.luteus)3种细菌指示菌的抑菌直径。利用琼脂孔扩散法测定不同配方发酵液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌、肺炎克雷伯氏菌和铜绿假单胞菌抑菌区直径大小以评价菌株的抑菌活性。采用菌落显微形态观察、生理生化特征实验和16SrDNA序列比对法对抑菌活性强的菌株进行鉴定,构建系统发育树。结果表明,淤泥样品初筛共分离纯化获得9株活性放线菌,其中1株放线菌(4-4)的不同配方发酵液均对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯草芽孢杆菌、肺炎克雷伯氏菌和铜绿假单胞菌表现出不同的抑菌活性,经形态、生理生化和16SrDNA序列比对鉴定为链霉菌属Streptomyces bacillaris。说明从填海工业区淤泥分离出的能够稳定产生广谱生物活性产物的野生链霉菌Streptomyces bacillaris,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用,为后续对该链霉菌进行代谢产物的分离和新药研发等领域提供了参考数据。