不同直径层析柱纯化人凝血因子Ⅷ效果的比较

目的通过比较RJ300型和GE450型层析柱对人凝血因子Ⅷ(human coagulation factor Ⅷ, F Ⅷ)的纯化效果, 探究GE450型层析柱纯化FⅧ的适用性。方法分别采用2种层析柱各制备3批FⅧ制品, 按照中国药典2020年版三部的要求对制品进行检测, 比较2种层析柱制备的FⅧ原液的回收率、比活性、洗脱峰的峰形差异、杂蛋白去除效果以及成品的检定结果, 并进行产品稳定性考察。结果 RJ300型和GE450型层析柱纯化后的FⅧ原液回收率分别为(63.8±4.8)%和(61.0±4.3)%, 相对标准偏差分别为7.5%和7.0%, 原液比活性分别为(100.7±5.8)和(114.0±12.2)国际单位(international unit, IU)/mg, 2种层析柱洗脱峰的峰形差异无统计学意义(F=0.42, P>0.05), 2种层析柱均能有效去除杂蛋白, 成品检定结果均合格, 成品比活性分别为(38.6±5.5)和(39.4±6.2) IU/mg。2种层析柱制备的FⅧ的稳定性研究结果均符合中国药典规定。结论 GE450型层析柱能实现较好的FⅧ纯化效果, 成品安全有效、稳定性良好, 适合商业规模化生产。

不同过滤条件对去除血浆组分Ⅱ溶解液中IgA的效果初探

目的初步筛选去除血浆组分Ⅱ溶解液中IgA效果最佳的pH条件和滤膜载量。方法以不同pH组分Ⅱ溶解液进行过滤,比较浊度、IgA含量、分子大小分布、纯度。结果 pH7.25~7.90,滤膜载量300~400 L/m^(2)时,组分Ⅱ溶解液经滤膜组合过滤后滤液浊度下降45.8%~60.5%、IgA含量下降68%~80%、分子大小分布为100%、纯度为100%。结论组分Ⅱ溶解液在pH7.25~7.90,载量≤400 L/m^(2)条件下,经滤膜过滤后不仅能有效去除IgA,而且其他质量指标保持不变,可为规模化生产工艺改进提供参考。