响应面法优化IgY抑制具核梭杆菌增殖的研究

目的:利用响应面法研究免疫球蛋白Y(IgY)影响口腔唾液模拟环境中具核梭杆菌(F.nucleatum)的生长繁殖特性,发现F.nucleatum最终菌落数与培养时间、F.nucleatum初始接种浓度和IgY剂量的关系。方法:以F.nucleatum最终菌落数为评价指标,在单因素试验基础上,设计三因素三水平响应面实验进行优化,通过响应面法对回归方程的分析,得到各因素最佳条件,优化后的条件重复试验3次,以验证模型的准确性。结果:以2×10~6CFU/mL初始浓度接种F.nucleatum、181mmol/L剂量给药IgY,培养时间6h得到最终菌落数4.52×10~4 CFU/mL,与预测值相对误差小于5%,方差分析表明模型P值显著,缺失值P值不显著,理论值与实测值拟合度良好,优化后F.nucleatum最终菌落数显著降低。结论:响应面法优化结果表明IgY能显著抑制口腔唾液模拟环境中具核梭杆菌的增殖,回归模型能够预测IgY影响口腔唾液模拟环境中F.nucleatum增殖的特性。

蛋黄球蛋白(IgY)皮肤刺激性安全评价

以新西兰大白兔为试验动物,通过皮肤急性刺激、多次刺激,评价蛋黄球蛋白(特异性免疫球蛋白)对哺乳动物皮肤的刺激性/腐蚀性,以探讨蛋黄球蛋白的安全性。皮肤急性试验采用新西兰大白兔,左右两侧脱毛,一侧对照,另一侧涂抹受试物后,观察1h、24h、48h和72h的皮肤是否出现红斑和水肿并评分;皮肤多次试验采用新西兰大白兔连续涂抹受试物14 d,观察皮肤状态并评分。试验结果显示蛋黄球蛋白新西兰大白兔皮肤无刺激性/腐蚀性。

免疫球蛋白IgY对牙龈卟啉单胞菌诱导的牙周炎大鼠模型的影响

研究了免疫球蛋白(IgY)通过抑制P.gingivalis的生长繁殖治疗实验性大鼠牙周炎的可行性.用医用丝线结扎上颌第二磨牙,并涂抹P.gingivalis的方法建立大鼠牙周炎模型.建模成功的大鼠随机分成对照组、高剂量IgY组和低剂量IgY组,每组8只.给药28 d后,测量各组大鼠的牙龈指数(GI),菌斑指数(PI)和探诊出血指数(BOP),以及血液中IL-6和TNF-α含量,并进行X-射线影像和组织学观察.与对照组相比,IgY治疗组GI、PI和BOP指标明显好转,IL-6和TNF-α含量显著降低,X-射线影像可见牙间隙明显缩小,组织学观察牙周纤维排列整齐,极少量炎细胞浸润,牙槽嵴无吸收,牙槽骨骨质增加.特异性IgY能够治疗P.gingivalis诱导的大鼠牙周炎.

基于Box Behnken响应面法优化口腔模拟环境IgY抑制牙龈卟啉单胞菌增殖

【目的】利用Box Behnken响应面法研究免疫球蛋白Y(Ig Y)影响牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)的生长繁殖特性,发现口腔模拟环境中P.gingivalis的响应值与Ig Y剂量、初始P.gingivalis数量、培养时间的关系。【方法】以P.gingivalis最终的菌落数为评价指标,通过单因素试验研究培养时间、Ig Y剂量和初始P.gingivalis数量的最佳条件,再依据Box Behnken中心组合原则设计三因素三水平响应面试验进行优化,评价Ig Y的抑制效果。优化得到的试验条件重复3次,以验证模型的准确性。【结果】单因素试验结果表明,以180 mmol/L的Ig Y剂量,2×10~6 CFU/m L的初始P.gingivalis数量,37°C厌氧培养4 h,口腔模拟环境Ig Y对P.gingivalis繁殖的影响达到最佳状态。通过Design Expert 8.0软件对回归方程的分析得到各因素最佳条件为:Ig Y剂量165 mmol/L、初始P.gingivalis数量2×10~6 CFU/m L、培养时间4.5 h。采用优化实验条件,重复3次试验,P.gingivalis最终菌落数是5.92×10~5 CFU/m L,与模型预测值5.85×10~5 CFU/m L相对误差1%,方差分析表明模型P值显著,缺失值P值不显著,理论值与实测值拟合良好。【结论】Ig Y能显著抑制牙龈卟啉单胞菌的增殖,优化后口腔模拟环境中的P.gingivalis最终菌落数显著降低,回归模型能够预测口腔模拟环境中P.gingivalis的增殖。