血型血清学检测在急性白血病病人非清髓异基因外周血干细胞移植中的意义

为了探讨ABO血型不合的急性白血病非清髓性异基因外周血干细胞移植中红细胞血型血清学检测的临床意义 ,采用红细胞凝集试验方法检测供、受者ABO和MN血型 ,用DianaGelphenotypeRh卡检测Rh血型。移植后观察受者血型和红细胞凝集素效价变化以及用STR PCR方法监测供者细胞植入情况。结果显示 ,4例受者中 2例供者细胞混合嵌合伴血型嵌合 ,其中 1例在移植后 1 0 0天转为完全嵌合 ,血型亦转为供者型。另 2例受者细胞呈供、受混合嵌合体 ,但血型未见转变 ,其中 1例在移植后 1 54天出现移植排斥。红细胞凝集素效价检测显示 ,受者红细胞凝集素效价高者 ,供者细胞植入率低 ,血型不易嵌合。反之 ,效价低者 ,供者细胞植入率高 ,血型易嵌合。结论 :在非清髓外周血干细胞移植 (NAPBSCT)中红细胞血型血清学检测可间接反映移植效果 ,协助确定临床预处理方案和移植后免疫抑制治疗的强度 ,估计预后 。

真核表达载体pcDNA3-ICOSIg的构建及表达

背景:人可诱导共刺激分子(ICOS)是迄今发现的重要共刺激分子家族成员,可促进激活T细胞的增殖和分泌、调节Th1/Th2细胞的极化、增强依赖T细胞的B细胞功能,阻断ICOS共刺激信号会导致T细胞的克隆失活或克隆无反应,从而诱导肿瘤对机体的免疫逃逸。目的:构建表达ICOSIg的质粒,观察其在小鼠体内的表达。方法:克隆编码ICOS的胞外片段,将其与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合,构建ICOSIg融合基因及其分泌型真核表达载体pcDNA3-ICOSIg,酶切鉴定重组子,测序,利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-ICOSIg转染小鼠右侧大腿肌肉组织,Western blot法检测血清ICOSIg水平。结果与结论:经测序鉴定证实pcDNA3-ICOSIg质粒目的基因片断与Genbank上公布的ICOS序列完全一致,说明质粒构建成功。脂质体载体包被pcDNA3-ICOSIg转染小鼠7 d,在小鼠血清中检测到ICOSIg的阳性表达,说明pcDNA3-ICOSIg能够在小鼠肌细胞内表达。证实利用基因合成和重组技术可成功构建真核表达载体pcDNA3-ICOSIg。

全胃切除术后三种消化道重建术式对患者生活质量的影响

目的:探讨全胃切除术后三种消化道重建术式对患者术后生活质量的影响。方法:对2003年1月～2007年6月我院施行全胃切除术的218例患者的临床资料进行回顾性分析。全胃切除后消化道重建分别为常规端侧食管空肠Roux-en-Y吻合术78例(A组)、P型空肠袢食管空肠Roux-en-Y吻合术96例(B组)和改良空肠间置代胃吻合术(FJI法)44例(C组)。记录患者一般情况及术后12个月的营养状况和胃肠道症状(GSRS)评分等。结果:术后12个月,B组与A组比较,进食量明显增加(P<0.05),而GSRS评分明显降低(P<0.05);C组与A组比较,进食量亦明显增加(P<0.05),GSRS评分则明显降低(P<0.05)。术后12个月,B组与C组体重恢复较A组更佳(P<0.05),且C组患者的进食量又优于B组,B、C两组体重恢复比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:P型空肠袢和改良空肠间置代胃吻合术均有利于维持患者术后生活质量。在每天进食量及体重恢复方面,改良空肠间置代胃吻合术更优于P型空肠袢食管空肠Roux-en-Y吻合术。

银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者白细胞介素-8和肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察银杏叶提取物治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法 AECOPD患者96例随机分为治疗组(50例)和对照组(46例),对照组给予常规对症治疗(吸氧、化痰、平喘、抗感染等),治疗组在常规治疗基础上加用银杏叶提取物制剂(金纳多注射液)20 mL加入0.9%氯化钠注射液250 mL静滴,1次/d,疗程14 d。观察两组患者症状体征、血气分析及肺功能指标的变化,同时检测两组患者血清IL-8和TNF-α水平的变化。结果治疗组总有效率优于对照组(P<0.05);治疗组血清中IL-8和TNF-α浓度较对照组下降,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论银杏叶提取物可降低AE-COPD血清中IL-8和TNF-α浓度,抑制炎症细胞生成,对AECOPD气道炎症具有明显的抑制作用。

ERCC1和TS对奥沙利铂和5-Fu联合化疗的胃癌患者化疗疗效的Meta分析

目的分析ERCC1和TS对预测采用奥沙利铂和5-Fu联合化疗胃癌患者化疗疗效的作用。方法检索纳入5篇(从2008年到2013年)国际和国内有关ERCC1和TS关于预测5-Fu和奥沙利铂对于胃癌化疗疗效的文献,应用随机效应模型和固定效应模型进行综合的定量分析,软件为RevMan5.0。结果 ERCC1对采用5-Fu和奥沙利铂联合化疗的胃癌患者化疗疗效的RR值为0.74,95%CI为0.58-0.95。TS对采用5-Fu和奥沙利铂联合化疗的胃癌患者化疗疗效的RR值为7.55,95%CI为4.47-12.76。结论 ERCC1阴性的胃癌患者,采用5-Fu和奥沙利铂化疗的疗效更好。TS阳性的胃癌患者,采用5-Fu和奥沙利铂化疗的疗效更好。

经腹开胸手术治疗高龄贲门癌

目的探讨经腹开胸手术治疗高龄贲门癌的疗效。方法2008年8月-2011年1月辽宁省肿瘤医院骨外科共施行经腹开胸的贲门癌手术10例。肿瘤均位于贲门处、食管胃连接部上2cm。结果10例标本切缘均为阴性。10例患者全部治愈，无死亡病例，无吻合口瘘病例。结论经腹开胸手术适用于营养状态不佳、合并心肺疾病、肿瘤位于食管胃连接部上2cm的高龄贲门癌患者。与传统胸腹联合术式相比，该术式在减少创伤、缩短手术时间、降低术后并发症的同时，达到根治的效果。

阻断ICOS对小鼠移植胰岛功能影响的实验研究

目的:在小鼠胰岛移植模型基础上,通过阻断可诱导共刺激分子(ICOS),探讨ICOS单克隆抗体(ICOS mAb)对移植胰岛功能的影响。方法:供体为近交系昆明小鼠,受体为C57小鼠。受体小鼠随机分成5组,每组10只。假手术组:受体小鼠仅行开腹手术,不行胰岛移植;对照组:单纯胰岛移植,不给ICOS mAb;实验1、2、3组:分别于胰岛移植后1、3、5 d腹腔内注射ICOSmAb 50、100、200μg/kg。观察小鼠胰岛移植后移植物存活时间和移植胰岛病理改变,流式细胞仪检测ICOS在T淋巴细胞上的表达。结果:实验2组小鼠移植胰岛存活时间和实验3组相同,统计学分析无显著性差异,而较对照组及实验1组明显延长(P<0.05)I,COS在移植术后7 d受体小鼠T淋巴细胞上表达明显上调。结论I:COS分子在小鼠同种异体胰岛移植排斥反应中表达上调,参与了排斥反应的发生。ICOS mAb通过阻断ICOS共刺激信号途径,诱导小鼠同种异体胰岛移植免疫耐受,减轻排斥反应,延长移植胰岛有功能存活时间。ICOS mAb的最佳给药剂量为100μg/kg。

新辅助化疗联合手术治疗65例Ⅲ期胃癌的生存分析

探讨Ⅲ期胃癌患者经新辅助化疗联合手术治疗后生存时间的影响因素。回顾性分析65例Ⅲ期胃癌经新辅助化疗联合手术治疗并术后辅助化疗患者的临床资料。总体1、3、5年的生存率为81.54%、49.27%、35.29%。病变Borrmann分型、手术是否达到R0切除、pT分期、pN分期及术后辅助化疗疗效与生存时间相关(P<0.05),是影响生存率的主要因素。

干扰素-β治疗多发性硬化症疗效的Meta分析

目的 研究干扰素-β与多发性硬化症疗效之间的关系。方法 检索纳入9篇（从2001~2010年）国际和国内有关干扰素治疗多发性硬化症的文献,应用随机效应模型和固定效应模型进行综合的定量分析,软件为Rev Man5.0。结果 干扰素-β治疗多发性硬化症复发的疗效的RR值为0.79,95%CI（0.66~0.94）;发热症状的RR值为2.45,95%CI（1.57~3.80）,P〈0.01;注射部位反应的RR值为5.11,95%CI（3.77~8.09）,P〈0.01。结论 干扰素-β治疗多发性硬化症,可明显缓解发病情况,可以改善预后。

脑胶质瘤化疗药物敏感性的临床研究

背景与目的 :脑胶质瘤是一个需要多学科综合治疗的恶性脑部疾病,国内外学者都在积极探索更加有效的综合治疗方法。本文探讨脑胶质瘤细胞在体外对化疗药物的敏感性,为临床有效治疗胶质瘤提供实验依据。方法:应用四甲基偶氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)对胶质瘤化疗的7种常用药物体外敏感性进行检测。结果:总体化疗药物敏感性BCNU﹥VM-26、TMZ﹥DDP﹥CBP﹥VP-16﹥VCR;低级别胶质瘤(WHO分级Ⅰ、Ⅱ级)化疗药物敏感性BCNU﹥TMZ﹥VM-26、DDP﹥CBP、VCR﹥VP-16;高级别胶质瘤(WHO分级Ⅲ、Ⅳ级)化疗药物敏感性BCNU、VM-26﹥TMZ、DDP﹥VP-16﹥CBP﹥VCR。结论:体外药敏试验对排除无效药物、筛选敏感药物对脑胶质瘤进行个体化的化疗,提高临床化疗效果,具有重要意义。

真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染小鼠对移植胰岛功能的影响

目的:探讨真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig转染受体小鼠肌细胞后对胰岛移植后排斥反应的影响.方法:受体C57BL/6小鼠随机分为对照组、空白转染组和实验组(转染pcDNA3-CTLA4Ig).Western blot检测受体小鼠血清CTLA4-Ig表达,观察移植物存活时间,术后7 d取受体肾脏做HE染色及胰岛素免疫组化染色,采用微量全血~3H-胸腺嘧啶掺入法检测单个核细胞在刀豆蛋白A刺激下的增殖程度,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群表达情况.结果:受体小鼠转染5 d后,Western blot检测到血清内有CTLA4Ig表达,转染效率为27.50%;实验组小鼠血糖维持正常时间明显延长(P<0.05):术后7 d,转染组单个核细胞在刀豆蛋白刺激下的增殖程度明显降低(P<0.05),CD4^+、CD8^+T淋巴细胞表达与对照组和空白转染组相比有显著差异差异(CD4^+:14.38%±0.84% vs 20.56%±0.68%,21.04%±1.14%,P<0.05:CD8^+:14.77%±0.92% vs 24.63%±1.30%,23.84%±1.21%,P<0.05),小鼠肾被膜下胰岛素免疫组化染色强度明显增高.结论:利用脂质体法可将pcDNA3-CTLA4Ig转染到活体小鼠肌细胞内并在小鼠体内表达CTLA4Ig,从而阻断B7/CD28共刺激信号途径,抑制胰岛移植术后排斥反应.

胃癌组织中T细胞及其亚群ICOS分子的表达及其意义

目的探讨胃癌组织中T细胞共刺激分子ICOS及其亚群的表达及意义。方法应用流式细胞术检测38例胃癌和21例健康人(对照组)外周血T细胞亚群及其共刺激分子ICOS的表达。结果胃癌组与对照组比较:CD3+T细胞表达(53.61±13.84)/(72.07±7.83)%,P<0.01;CD3+CD4+T细胞表达(29.84±9.71)/(38.79±5.08)%,P<0.01;CD3+ICOS+T细胞表达(25.80±10.56)/(0.82±0.98)%,P<0.01;CD3+CD8+ICOS+T细胞表达(1.57±1.99)/(0.02±0.04)%,P<0.01;CD3+CD8+ICOS-T细胞表达(16.06±6.94)/(20.56±6.54)%,P<0.05。胃癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群的差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子ICOS表达增高,CD4+T细胞显著减少。

真核表达载体pcDNA3-CTLA4lg的构建及体内表达

背景:CTLA-4lg的制备过程比较复杂,单克隆抗体的价格比较昂贵,而且应用CTLA-4lg单克隆抗体注射本身存在着血浆药物浓度不稳定的问题。目的:探讨Ctla4lg表达质粒构建的可行性。设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2005/2006在中国医科大学中心实验室完成。材料:雄性Wistar大鼠10只,近交系昆明小鼠10只。方法:提取Wistar大鼠总RNA,反转录成cDNA第1链,PCR扩增CTLA4基因,将其和真核表达载体pcDNA3酶切、连接。转化感受态菌DH5α,培养后挑取阳性克隆、提取质粒,酶切鉴定重组子、测序,最后转染近交系昆明小鼠,应用Westen Blot法检测血清CTLA4lg水平。主要观察指标:构建的Ctla4lg表达质粒基因序是否正确以及能否在小鼠体内进行蛋白表达。结果:对含有pcDNA3-CTLA4质粒的LB菌液进行鉴定测序,目的基因片断大小为288bp,与Genebank上公布的CTLA4序列完全一致,质粒构建正确。利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-CTLA4lg转染小鼠,有3只在第7天血清检测CTLA4Ig阳性,显示pcDNA3-CTLA4lg能够在鼠肌细胞内表达。结论:利用基因合成和重组技术成功构建了真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig,利用脂质体法成功的将pcDNA3-CTLA4lg转染到鼠肌细胞内并进行表达。

刍议军需装备维修社会化保障

现代战争的高投入、高损伤、高消耗对军需装备维修保障提出了更高的需求，仅仅依靠军队建制的保障力量已远远不能满足战争的需要。探索新的军需装备维修保障路子，建设军需装备维修社会化保障力量，是军需装备维修保障发展的必然趋势。

联合阻断CD28和可诱导共刺激分子对小鼠同种异体胰岛移植物急性排斥反应的影响

目的在小鼠同种异体胰岛移植模型上,通过联合阻断CD28和可诱导共刺激分子(ICOS),观察CTLA-4Ig及ICOS单克隆抗体(ICOSmAb)对胰岛移植物功能的影响。方法将小鼠随机分成4组,每组10只。联合阻断组:分别于移植后0、2、4 d和1、3、5 d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/ kg和ICOSmAb 100μg/kg体重组。ICOS组:移植后1、3、5 d腹腔内注射ICOSmAb 100μg/kg体重组。CTLA4组:移植后0、2,4d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/kg体重组。对照组:单纯胰岛移植,不做CT- LA-4Ig和ICOSmAb处理组。观察术后移植物存活时间和病理改变,RT-PCR检测移植组织中IL-2、IL-10mRNA表达,流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+T淋巴细胞表达。结果联合阻断组小鼠移植物存活时间平均为(31.00±6.57)d,较其他3组延长,差异有统计学意义(P<0.05);IL-2和IL-10 mRNA表达水平分别为(44.23±6.24)和(65.23±11.02),与其他3组比较,IL-2 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),而IL-10mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);CD4^+、CD8^+T淋巴细胞荧光阳性百分率分别为(13.73±0.49)%和(14.56±0.31)%,表达上调均不明显;移植胰岛光镜检查接近正常。结论应用CTLA-4Ig和ICOSmAb联合阻断CD28和ICOS,可以明显抑制胰岛移植物排斥反应。

小鼠同种异体胰岛移植排斥反应中可诱导共刺激分子的表达及阻断其对排斥反应的影响

移植胰岛长期存活率不高，主要原因是移植术后排斥反应，共刺激信号在排斥反应的发生中起重要作用。本实验旨在观察共同刺激分子-可诱导其刺激分子（ICOS）是否参与了小鼠同种异体胰岛移植排斥反应的发生，并用ICOS单克隆抗体（ICOSmAb）阻断ICOS，研究其对排斥反应的抑制作用。

联合应用CTLA-4Ig及抗ICOS单克隆抗体延长小鼠移植胰岛存活时间

目的探讨共刺激信号阻断剂细胞毒T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA-4Ig)及抗共同刺激分子ICOS单克隆抗体(ICOSmAb)对移植胰岛功能的影响。方法以BALB/c小鼠为供者,C57BL/6糖尿病小鼠为受者,进行同种胰岛细胞移植。将移植后的小鼠随机分成4组,每组10只。ICOS组:移植后1、3、5d腹腔内注射ICOSmAb 100μg/kg;CTLA4组:移植后0、2、4d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/kg;联合阻断组:移植后腹腔注射CTLA-4Ig和ICOSmAb,用法同CTLA4组和ICOS组;对照组:单纯胰岛移植,不注射CTLA-4Ig和ICOSmAb。观察术后移植物存活时间和移植胰岛的病理改变;逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测移植胰岛组织中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)mRNA的表达情况;应用流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+ T淋巴细胞表达情况。结果联合阻断组的小鼠移植胰岛存活时间较其它3组明显延长,移植胰岛的细胞形态经光镜检查接近正常。联合阻断组与其它3组比较,IL-2 mRNA表达减少,差异有统计学意义(P<0.05),IL-10 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);移植术后21d,CD4^+、CD8^+T淋巴细胞表达上调不明显。结论应用CTLA-4Ig和ICOSmAb联合阻断CD28和共同刺激分子ICOS,可以明显的抑制排斥反应,延长移植胰岛的存活时间及存活率。

CD133mRNA在胃癌患者外周血单核细胞中的表达及意义

[目的]通过检测胃癌患者外周血单核细胞中CD133的表达,探讨其与临床病理特征的关系。[方法]于术前抽取30例胃癌患者、15例胃溃疡患者、15名健康志愿者外周静脉血,密度梯度离心法分离单核细胞。半定量反转录聚合酶链反应检测CD133 mRNA表达水平。分析胃癌患者外周血CD133 mRNA表达与临床病理特征的关系。[结果]胃癌患者外周血中CD133mRNA表达水平明显高于胃溃疡患者和健康志愿者(0.2804±0.1835 vs 0.0984±0.1321,t=6.724,P<0.001;0.2804±0.1835 vs 0.0282±0.0597,t=-7.327,P<0.001)。CD133 mRNA表达与肿瘤最大直径、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),而与性别、分化程度、淋巴管浸润、血管浸润、浸润深度无关。Spearman相关分析显示,CD133 mRNA表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.01)。[结论]胃癌患者外周血中CD133 mRNA的表达与胃癌的发展、转移及预后密切相关。

辽宁省癌症患者术后分期T_(0～2)N_0M_0现状抽样调查

[目的]了解辽宁省癌症患者术后分期T0～2N0M0现状,为卫生行政部门制订相关政策提供参考。[方法]采用整群二阶段抽样方法,对辽宁省内抽取的37所不同类型、不同级别医院的癌症手术患者病历进行调查和评估。[结果]共收集有效调查表1947张,其中术后分期T0～2N0M0的癌症患者383例,占19.67%。不同类型、不同等级、不同地区医院,以及不同性别、不同年龄组间T0～2N0M0癌症患者比例均存在统计学差异(P<0.05)。[结论]辽宁省癌症早期诊治率较低,建立一套符合我国国情的科学、合理的癌症早诊早治措施将成为提高癌症早期诊治率的关键。