糖基转移酶UGT73C5在大肠杆菌中的可溶性表达研究

络塞是一种抗高原反应药物的主要活性成分,可通过尿苷二磷酸糖基转移酶UGT73C5催化肉桂醇糖基化反应合成。然而UGT73C5在大肠杆菌宿主中可溶性表达极差,严重限制了其工业应用。该研究分别通过与分子伴侣共表达和与助溶蛋白标签融合表达的方式,提高UGT73C5在Escherichia coli BL21(DE3)中的可溶性表达。结果显示,除质粒pKJE7外,与分子伴侣质粒pG-KJE8、pGro7和pG-TF2共表达后均可提高UGT73C5酶活力,分别为原始酶活力(18.56 U/g细胞)的1.27、1.18、1.37倍。此外,利用硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)和谷胱甘肽巯基转移蛋白(glutathione S-transferase,GST)两种助溶蛋白标签,构建的融合酶Trx-UGT73C5和GST-UGT73C5的酶活力为原始酶活力的1.45、2.54倍,且纯化后的比酶活力为原始酶的80%~90%。最后,在2 mmol/L肉桂醇合成络塞的反应中,相同浓度细胞破碎液(粗酶)融合酶GST-UGT73C5比原始酶催化效率更高,4 h后转化率可以达到90%以上,最终转化率达到93.6%。因此,助溶蛋白标签融合表达法可有效提高UGT73C5在大肠杆菌中的可溶性表达,且融合酶GST-UGT73C5在络塞的酶法合成中具有更大的应用潜力。

醒脑开窍针法治疗非痴呆性血管认知障碍临床研究

目的:探讨醒脑开窍针法治疗非痴呆性血管认知障碍(VCIND)的临床疗效及对患者血清胰岛素生长因子-1(IGF-1)、视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)的影响。方法:选取天津中医药大学附属医院2017年4月—2018年6月收治的VCIND患者94例,随机分为针刺组(n=56)和西药组(n=38),针刺组采用醒脑开窍针刺法治疗,取水沟、内关(双侧)、三阴交(双侧)、四神聪、悬钟(双侧)及太溪(双侧),2次/天,每周治疗6天,两组均治疗8周;观察两组患者治疗前、治疗4、8周后蒙特利尔认知评估量表(MoCA量表)及日常生活能力量表(ADL量表)评分结果;检测患者不同治疗时间点血清IGF-1、VILIP-1含量;采用实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测IGF-1、VILIP-1 mRNA在血清中的表达。结果:针刺组治疗4、8周总有效率分别为74.51%、91.11%,优于西药组54.05%、72.72%;针刺组治疗4、8周脱组率分别为8.93%、19.64%,高于西药组2.63%、13.16%(P<0.05);与西药组治疗4、8周相比,针刺组患者MoCA及ADL评分降低(P<0.05),血清IGF-1及其mRNA升高,VILIP-1及其mRNA降低(P<0.05)。结论:醒脑开窍针法治疗VCIND疗效确切,机制可能与保护神经血管有关。

推拿联合微生态调节剂治疗肠易激综合征的临床研究

目的 探究在肠易激综合征治疗时,推拿联合微生态调节剂治疗的效果。方法 针对40例肠易激综合征患者使用微生态调节剂治疗,并归为对照组,针对另外40例患者使用推拿联合微生态调节剂治疗,并归为观察组,2组患者均为天津中医药大学第一附属医院2015年3月-2017年1月间收治。结果 2组患者在治疗各项菌群数量无明显差异,经过分组治疗后肠球菌数量2组均无明显差异,其他菌群均为观察组患者改善更加明显,改善后差异具有统计学意义（P〈0.05）。观察组治疗的总有效率为97.5%,对照组仅为75.0%,观察组患者明显较高。结论 推拿联合微生态调节剂治疗肠易激综合征的临床研究发现,其相比单纯的微生态调节剂治疗而言,具有一定优势,可改善患者的临床症状,同时提高治疗效果。

新工科背景下生物催化工艺学教改的探索和实践

在新工科建设和“双一流”建设的双重背景下,高等学校在培养学生的创新能力和科学素养方面面临新挑战。《生物催化工艺学》重点培养学生应用生物技术解决传统化学合成行业的瓶颈问题的创新能力。然而,传统教学模式不能满足新工科背景下人才培养的需求。在互联网+时代,可以通过翻转课堂结合微信平台作为教学辅助工具,以学生为教学主体,采用互动型评价方式,通过新的教学方式培养科学素养强和综合素质高的生命科学人才。

复杂错流多效蒸发系统设计的模型与解法

为了实现能量的有效利用以及满足不同性质原料液的蒸发,对蒸发过程采用额外蒸汽引出、冷凝水闪蒸的节能措施,建立了多效错流蒸发的系统模型。用迭代法结合矩阵法对模型求解。研究表明,多效错流蒸发系统模型有通用性。对溶液蒸发采用冷凝水闪蒸、多效蒸汽引出预热原料液的模型进行设计表明,求解模型稳定且效率较高。

浅谈《生物催化工艺学》教学内容和教学方法的改进

《生物催化工艺学》是生物工程和生物技术专业的重要课程之一。针对生物催化工艺学课程的特点,应当将生物催化研究及行业发展的最新方法和成果及时充实到教学内容中,并对教学方法和考核方式进行改革,提升教学效果和学生的综合能力。以学生为中心,教学相长,激发学生的学习热情,采用灵活的授课和考核方式,增加学生的学习主动性,为国民经济的发展提供更多的生物化工专业技术人才。

吐温类表面活性剂对粗煤泥离心脱水促进作用研究

为降低粗精煤泥水分,进行了吐温类表面活性剂(吐温20,吐温40,吐温60,吐温80,吐温85)对粗煤泥离心脱水促进作用的研究。通过测量这些药剂分别作用后离心脱水煤样的水分、接触角以及离心液的表面张力,发现吐温类表面活性剂对粗煤泥离心脱水均有促进效果,它们使煤颗粒的接触角变大;吐温20,吐温80和吐温85的脱水促进作用好于吐温40和吐温60;当离心液表面张力降至67 m N/m时,脱水效率最高。对效果较好的吐温85不同用量下作用后的煤表面水化膜厚度进行了测量,并对煤颗粒表面进行电镜扫描,结果发现,煤表面上的水化膜变薄,煤颗粒表面粘附的细泥也明显减少。可以认为,吐温类表面活性剂吸附在煤粒表面,通过疏水改性使水化膜变薄和对细泥的"洗涤"作用,是其助滤的主要机理;离心液的表面张力对脱水效果有指示作用。

羰基生物还原法合成手性醇的研究进展

手性醇是合成许多光学活性药物、农用化学品及其他精细化学品的关键手性砌块。羰基生物还原法理论上可实现100%转化率,且反应条件温和,对环境十分友好,被普遍认为是生产手性醇的绿色、高效途径。综述了近年来利用生物信息学、高通量筛选和蛋白质工程的发展对新型、高效生物催化剂开发的影响,特别是利用相关技术手段开发羰基还原酶的进展。

硫酸盐还原菌的分离纯化及生长特性研究

硫酸盐还原菌(SRB)是一类形态各异、营养类型多样,在缺氧或厌氧的条件下,能利用硫酸盐或者其他氧化态硫化物作为电子受体来氧化有机物的细菌或古菌,可以是革兰氏阴性或阳性。SRB所引起的微生物腐蚀受到了人们的广泛关注。本次实验是以西南石油大学附近的加油站淤泥为主要原料,采用叠皿夹层法对富集后的淤泥进行分离纯化,然后在不同的生长条件下(pH值,矿化度)对其生长特性分别进行研究。经实验研究得到如下结论:在pH值小于5.0和大于9.5时,硫酸盐还原菌是不能存活的,而在pH值为7.5时为硫酸盐还原菌最适生长pH值。SRB可以生长繁殖的矿化度范围是7.5～30 g/L,16 g/L时为其生长繁殖最适矿化度。

浅谈液压系统维护中的注意事项

随着液压技术的发展和广泛应用,对液压设备维护和管理提出更高和更严格的要求。主要针对大型设备及长时间运转的精密设备,阐述液压系统维护注意事项,包括液压油的清洁度、振动、液压油路中的残压问题等,为使用维护管理人员提供参考。

绿色液压技术发展与推广

在液压系统设计、制造、使用和维护过程中,存在污染环境、能耗过大等环保问题。发展绿色液压技术是人与自然和谐相处的需要,也是液压技术可持续发展方向。介绍绿色液压技术的定义、研究内容和推广的具体途径、目标、过程和内容。

虚拟仪器技术在石油化工领域的应用展望

简单介绍了虚拟仪器技术的概念及其完整体系的构成,详细介绍了LabVIEW作为开发虚拟仪器功能最强大的图形化软件平台所具有的优点,通过与传统仪器的比较,概括了目前LabVIEW软件在石油化工领域中的应用,并针对其应用提出了几点展望。

秸秆碱预处理液脱毒及其在丁醇发酵中的应用

秸秆的碱预处理液可造成严重的环境污染。该研究基于源头控制的理念,对碱预处理液进行脱毒工艺研究并回收进行丁醇发酵研究。通过加酸去除碱预处理液中的木质素,用活性炭将去除木质素的预处理液脱毒并用于水解和发酵过程。优化获得沉淀碱溶性木质素的最佳pH 3.8;不同加量活性炭脱毒后的碱预处理液对秸秆水解的影响不明显,然而活性炭的添加量对丁醇发酵影响较大,当活性炭添加量为15 g/L时,发酵72 h达到最高丁醇质量浓度10.2 g/L。该秸秆碱预处理液脱毒工艺对利用秸秆进行无废生产生物燃料有一定参考价值。

可得然胶生产菌种的筛选及发酵条件优化

采用苯胺蓝平板筛选法从土壤中筛选并鉴定了一株产可得然胶的根瘤菌,并对该菌株发酵合成可得然胶的培养基进行优化。在单因素优化的基础上,设计4因素3水平的正交优化方案,优化结果显示,该菌株发酵产可得然胶的最优培养基组成为:葡萄糖50 g/L,(NH4)2HPO42g/L,KH2PO41.5 g/L,Mg SO41.25 g/L,Fe SO4·7H2O 0.05 g/L,Mn SO40.02 g/L,Co Cl2·6H2O 0.01 g/L,Zn Cl20.01 g/L。经摇瓶发酵验证,可得然胶的产量和糖转化率较优化前分别提高了29.2%和5.4%,为进一步利用该根瘤菌发酵合成可得然胶奠定了良好基础。

锥部外部导磁结构对重介旋流器分选效果的影响

为了调控重介旋流器二段分选密度以改善分选效果,在其锥部附加导磁结构,并施加电磁场,研究了导磁结构在磁场作用下的旋流器的分选效果,通过考察不同磁场强度,进行介质分配试验和粗煤泥(-3mm)分选试验。试验结果表明,当在旋流器锥部的线圈上部附加内导磁结构时,同单独使用线圈相比,在特定的磁场强度下,精煤灰分降低,尾煤灰分升高,提高了分选效率。利用有限元软件ANSYS对磁系进行模拟分析,模拟结果表明,附加导磁结构可人为改变磁场走向,增大对磁场能量的富集,提高磁场力,从而提高分选效果。

浅析轻烃精馏装置

我国石油年产量正逐步缩减,石油开采方面的技术在发展,但成本也在提高。在这样的背景下,作为依托油田发展的化工企业,若要巩固、拓展其市场地位,生产技术以及产品质量这两样指标将成为重中之重。本文综合作者自身工作经验以及工作中的心得与体会,简要分析了轻烃精馏装置的原理及构造,并结合我厂生产实际,总结出影响精馏效果及产品质量的多种因素,帮助读者了解相关专业知识。

低共熔溶剂和次氯酸钠组合预处理秸秆及在丁醇发酵中的应用

随着传统化石能源日趋枯竭,木质纤维素生物质等可再生资源的综合利用得到越来越多的关注。为了更好地利用木质纤维素生物质,采用物理、化学或生物方法降低其结构顽抗性是必不可少的步骤。在前期研究中,本文作者所在实验室发现了一种乙胺盐酸盐为氢键受体、乳酸为氢键供体的新型低共熔溶剂(EaCl∶LAC),其对玉米芯有很好的去除半纤维素的作用。本文将EaCl∶LAC用于预处理水稻秸秆,并结合碱性氧化剂NaClO,进一步提高了木质素的去除率。在最优条件下,经EaCl∶LAC/NaClO预处理后水稻秸秆的半纤维素和木质素的去除率分别为94.9%和80.2%。将预处理后水稻稻秆经纤维素酶解可得到总还原糖浓度为60.46g/L的秸秆水解液。采用梭菌Clostridium saccharobutylicum DSM13864利用稻秆水解液进行丁醇发酵,72h后丁醇浓度为10.16g/L,丁醇的糖醇产率为0.22g/g(total sugar)。本文提供了一种提高木质纤维素生物质酶解效率和水解液还原糖浓度的方法,无需外源添加葡萄糖和脱毒处理,可直接用于发酵合成生物丁醇。

Clostridium saccharobutylicum DSM 13864细胞表面理化特性及固定化细胞产丁醇的性能

糖丁基梭菌Clostridium saccharobutylicum DSM 13864能利用多种糖类为底物发酵产丁醇。本文研究了该菌体细胞表面的理化特性,并以砖块作为细胞固定化材料进行丁醇发酵。采用细菌吸附有机溶剂（MATS）法证明糖丁基梭菌细胞表面有强烈的亲水性,并且等电点在p H值为3左右,这些特性有利于菌体与表面亲水多孔的砖块吸附。在60g/L葡萄糖发酵培养基中,以5~8目砖块作为固定化材料,流速为1.1L/min,发酵48h后,丁醇的浓度、得率和生产率分别达到11.02g/L、0.18g/g和0.23g/（L？h）,相比悬浮细胞发酵分别提高了10.53%、5.88%和9.52%。结果表明：砖块作为一种固定化材料可有效提高糖丁基梭菌的发酵产丁醇水平。

高产小麦旗叶细胞结构与产量关系的研究

本文旨在揭示小麦旗叶结构与产量的关系。通过对四个品种小麦旗叶进行离析、显微观察、拍照、数据统计,并计算出叶肉细胞环数的期望,分别作了同产量的相关分析和回归分析。结果表明,气孔密度、气孔面积、表皮细胞面积、叶肉细胞环数的期望同产量呈正相关关系,并建立了同产量的回归方程。

双芳基酮还原酶的基因挖掘及催化性质

通过基因挖掘,获得了来源于Kluyveromyces polysporus的醇脱氢酶基因kpadh,并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现了可溶性表达。其编码的醇脱氢酶KpADH属于短链脱氢酶家族,可催化双芳基酮不对称还原生成手性双芳基醇,且可利用异丙醇为辅底物进行底物偶联型辅因子循环。采用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白KpADH进行纯化,并研究了酶学性质。研究发现:KpADH的还原和氧化反应的最适pH分别为5.5和9.5;KpADH对1-(4'-氯苯基)-(吡啶-2'-基)-甲酮[1-(4'-chlorophenyl)(pyridin-2'-yl)methanone,CPMK]的K_m和V_(max)为0.500mmol/L和25.0μmol/(min·mg),对辅底物异丙醇的K_m和V_(max)分别为6.36 mmol/L和21.4μmol/(min·mg);KpADH对酮酯类底物和2,3-丁二醇有较高的催化活力。运用该重组菌对100 mmol/L的CPMK进行不对称还原,反应10 h后,底物转化率大于99.8%,产物(R)-CPMA的ee值为82%,摩尔收率88.7%。本研究为利用醇脱氢酶KpADH高效合成光学纯CPMA奠定了基础。