重组人生长激素对大鼠急性胰腺炎的治疗作用

目的观察重组人生长激素(rhGH)对大鼠急性胰腺炎(AP)的治疗并探讨其机制。方法ipE.coli复制大鼠AP模型。42只健康♀SD大鼠随机分为对照组(C组)、急性胰腺炎组(AP组)及rhGH治疗组(T组)。AP、T组再按观察时点分为1、3 d两个亚组。C组ip 15 m.lkg-1生理盐水;AP组ip 15 m.lkg-1E.coli(1×1010CFU.L-1)后立即im生理盐水;T组于ipE.coli后立即im 2.25 U.kg-.1d-1rhGH。观察胰腺的病变程度并进行评分,测定血清淀粉酶的活性,免疫组化检测胰腺组织中ICAM-1蛋白的表达及NF-κB核的阳性率。结果AP两亚组胰腺组织病理评分、血清淀粉酶活性、ICAM-1蛋白表达及NF-κB核阳性率均明显高于C组水平(P<0.05);rhGH治疗能明显降低上述指标水平,尤以T3d组降低最为显著。结论rh-GH治疗能明显减轻大鼠急性胰腺炎的损伤程度,其机制可能与降低NF-κB活化程度及ICAM-1蛋白的表达水平等有关。

人与狗迷走/交感干的比较解剖及其喉上神经外支纤维成分

目的对人与狗的颈段迷走/交感干进行比较解剖,并鉴定狗的喉上神经外支的纤维成分。方法随机解剖经福尔马林固定的成年人尸体颈部(n=50)及狗的颈部(n=10),暴露其颈交感干与喉上神经及其外支间的交通;并取狗的喉上神经外支,甲醛固定,明胶包埋,恒冷切片后用Karnovsky AchE组化方法染色并观察。结果狗的迷走神经结状神经节与颈上神经节完全或部分融合,迷走神经干与交感神经干完全或部分融合为迷走-交感干;而人的结状神经节与颈上神经节互相分离;颈上神经节与喉上神经及其分支之间存在交通,其中颈上神经节与喉上神经外支相交通者占86%。AchE染色显示:狗的喉上神经外支含AchE阳性有髓神经纤维、AchE阴性有髓神经纤维和AchE阳性无髓神经纤维。结论喉上神经外支呈袢状,而非干式,含躯体运动、交感神经节后及躯体感觉纤维,因此喉上神经外支为一混合神经。

“以器官系统为中心，基础与临床全线整合”教学模式解剖学知识点整合的实践与思考

回顾高等医学教育课程模式,20世纪50年代“以器官系统为中心”的课程模式问世;90年代,美国医学院校协会在全国推行“医学院校培养目标研究项目”,许多院校实行了以器官系统为中心的课程、以问题为导向的课程、以社区为基础的课程等整合课程,成为第2次医学教育改革,对世界医学教育产生了深远的影响[1-2]。我国权威的医学教育专家认为[3],根据我国国情,以“器官系统”为中心的医学整合课程教学模式更符合当前和未来各高等医科院校对临床医学人才培养的方式。2008年9月,教育部、卫生部发布的《本科医学教育标准—临床医学专业(试行)》.

水通道蛋白4和8在人不同病理级别星形细胞瘤组织中的表达

目的:观察水通道蛋白(AQP)4和AQP8在人不同病理级别星形细胞瘤组织中的表达变化,进一步阐明星形细胞瘤的发病机制。方法:收集人各个病理级别星形细胞瘤标本55例。以肿瘤周围相对正常脑组织作为对照,采用石蜡切片HE染色行病理诊断和分级,Western blotting、RT-PCR以及免疫组织化学方法观察瘤组织中AQP4和AQP8的表达情况。结果:AQP4和AQP8主要分布在不同病理级别星形细胞瘤组织中瘤细胞的胞膜和胞浆内;和对照组比较,AQP4及其mRNA在低级别(Ⅰ～Ⅱ级)肿瘤组织中的表达降低,但在高级别(Ⅲ～Ⅳ级)星形细胞瘤组织中表达又上调;而AQP8及其mRNA在低级别肿瘤组织的表达增强,在高级别肿瘤组织中表达进一步增强;AQP4和AQP8分别在低级别之间、高级别之间比较,均没有显著差异(P>0.05)。结论:AQP4与AQP8在肿瘤组织中的表达是有差异的,两者在人星形细胞瘤组织中的表达变化与肿瘤恶性程度有关。

水通道蛋白1、5在星形细胞瘤中的表达变化

目的：观察水通道蛋白1、5（AQPl、5）在人不同病理级别星形细胞瘤组织中的表达差异，探讨星形细胞瘤增殖、生长的分子机制。方法：收集人各个病理级别星形细胞瘤标本55例，以肿瘤周围相对正常脑组织作为对照，采用H—E染色诊断分级，石蜡切片免疫组织化学、免疫印迹分析及逆转录聚合酶链式反应观察AQPl、5及其mRNA的表达变化。结果：与正常脑组织相比，人星形胶质瘤组织中AQPl及其mRNA表达上调，随着星形细胞瘤病理级别的升高，AQPl及其mRNA表达增强，胶质母细胞瘤组织表达最强烈；而AQP5及其mRNA仅在高恶性星形细胞瘤组织中表达增强。结论：AQPl在人星形细胞瘤组织中表达与其病理级别相关，而AQP5仅在人高恶性星形细胞瘤组织中表达增强，提示不同病理级别胶质瘤组织中AQP的表达规律不尽相同。

IGF-1对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用及其机制

目的探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对β-淀粉样蛋白25-35(amyloid-beta protein,Aβ_(25-35))诱导PC12细胞凋亡的保护作用及可能的信号机制。方法以10μmol/L Aβ_(25-35)处理PC12细胞作为阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)细胞模型。实验分为对照组、Aβ_(25-35)处理组、IGF-1+Aβ_(25-35)处理组。条件孵育24 h,采用噻唑蓝比色法(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)检测细胞存活率,Western blot检测各组细胞磷酸化-Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白表达水平。结果 MTT法检测显示,10μmol/L Aβ_(25-35)孵育24 h,PC12细胞存活率为(39.8±3.7)%,与对照组[(100.0±2.3)%]相比显著下降(P<0.05)。IGF-1+Aβ_(25-35)处理组,PC12细胞存活率为(56.4±4.2)%,与Aβ_(25-35)处理组[(39.8±3.7)%]相比显著增高(P<0.05)。Western blot显示,IGF-1+Aβ_(25-35)处理组p-Akt蛋白表达水平(0.794±0.037)高于Aβ_(25-35)处理组(0.493±0.050),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-1能抑制Aβ_(25-35)所导致的PC12细胞凋亡,其保护作用可能与上调Akt磷酸化的表达有关。

单羧酸转运蛋白4在癫痫患者脑组织中的表达

目的检测癫痫患者脑组织中单羧酸转运蛋白4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)的表达,以探讨其在癫痫发生中的作用。方法收集16例颞叶癫痫患者和6例脑外伤患者清创术后颞叶脑组织作为研究对象,采用免疫组织化学和免疫印记检测脑组织MCT4蛋白表达,并进行图像分析和统计学处理。结果免疫组织化学显示,对照组及癫痫组患者脑内均可见MCT4阳性细胞表达,IPP软件分析显示癫痫组脑内MCT4阳性细胞平均光密度值(0.266±0.012)高于对照组(0.230±0.023),差异具有统计学意义(P<0.05)。蛋白印记检测显示MCT4蛋白在癫痫患者脑内的表达水平(0.426±0.019)较对照组相比明显增加(0.311±0.044),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫患者脑组织中MCT4表达增高,提示MCT4与癫痫脑内异常的能量代谢密切相关。

生长激素对急性胰腺炎大鼠胰腺微循环改变的影响

目的观察急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺微循环功能的变化及重组人生长激素(rhGH)对其影响。方法采用ipE.coli复制大鼠AP模型,SD大鼠随机分为对照组(C组)、AP组及rhGH治疗组(T组)。C组仅ip生理盐水(15 ml.kg-1);AP组ipE.coli(1×1010CFU.L-1,15 ml.kg-1);T组于ipE.coli后,im rhGH2.25 U.kg-.1d-1。AP、T组又依观察时点再分为1、3 d两个亚组。采用异硫氰酸荧光素标记红细胞(FITC-RBC)技术及微循环观测系统观察胰腺微循环的变化。结果AP组大鼠胰腺微循环红细胞流量、血液流速、血管数及功能血管数均明显低于C组的水平,尤以1 d时最为明显;T组大鼠的均明显高于AP组的水平,尤以3 d时最为明显。结论rhGH可明显改善AP大鼠胰腺微循环功能的障碍。

脑外伤后ERK信号通路调节AQP4及其锚定蛋白DG的表达

脑外伤是青年人最主要的致死与致残疾病。脑水肿是脑外伤的严重并发症,其形成与脑内最主要的水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)关系密切。AQP4对水的转运与其在星形胶质细胞胞膜上的极性分布有关。肌营养不良-肌萎缩蛋白复合物(dystrophin-dystroglycan complex,DDC)可能与AQP4的锚定及极性分布有关。肌萎缩蛋白(dystroglycan,DG)是该复合物的核心成员,但其对AQP4锚定及极性表达的作用目前并不清楚。脑外伤后,AQP4的表达改变是否与DG有关,其二者表达变化的调控机制均不清楚。为了揭示以上科学问题,为临床治疗脑外伤后脑水肿提供理论依据,分别进行在体、离体及离体干扰实验。研究发现脑外伤后,AQP4、α-DG、β-DG的表达,于6h增至峰值,后逐渐减弱,于24 h降至最低,48 h再次表达上调。在此过程中,其表达变化规律虽基本一致,但确实存在不一致的现象。排除其他因素干扰,在星形胶质细胞划伤后,DG与AQP4及p-ERK的表达改变完全一致;抑制及激活ERK信号通路后,分别导致DG与AQP4的表达下调及上调。以上结果证实,脑外伤后,DG参与AQP4在星形胶质细胞的锚定,但并非AQP4极性表达的专属锚定蛋白质;机械损伤后,早期ERK信号通路激活,并上调DG及AQP4的表达。

参与医学创新实验课题对器官系统课程学习效果的促进作用

为了加强基础与临床知识的联系和渗透,以及培养学生的临床胜任力,重庆医科大学进行了器官系统教学模式的改革。此外,学校开展了本科生创新实验课题计划,以培养学生的创新能力和科研思维能力。医学生在参与创新实验课题的过程中,通过查阅文献资料以确定选题、撰写申请书、开展实验及写作论文等不同环节的学习和锻炼,有利于扩大其知识面,增强其自主学习能力、动手能力和团队合作精神等,从而促进其对器官系统课程知识的学习。因此,鼓励学生参加创新实验课题并做好各环节的工作,对于提高器官系统课程的学习效果,培养高素质的创新型医学人才具有重要意义。

医学相关类专业人体系统解剖学课程教学模式的改革与实践

医学相关类专业是指除临床医学外的医学检验技术、医学影像技术、口腔技术、护理、预防医学、临床药学等众多专业,是我国高等医药院校教育的重要组成部分,涵盖面广,且招生人数众多。而医学相关类专业解剖学课程设置没有一个全国性的指导意见,各地院校在教学内容、教材选用上“百花齐放”。教学过程中也发现学生存在学习目的不明确、自主性差、对基础学科重要性认识不足等现象。

可溶性血管内皮生长因子受体1真核克隆表达及其对血管内皮细胞增殖的影响

本研究旨在构建可溶性血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体1(soluble fmslike tyosine kinase-1,sFlt-1)的真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,并观察sFlt-1对血管内皮细胞增殖的影响。提取人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)总RNA,扩增Flt-1基因胞外1-3结构域,构建真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,测序鉴定基因序列。将重组质粒转染Lewis肺癌细胞,采用RT-PCR和SDS-PAGE检测sFlt-1在基因及蛋白水平的表达情况。MTT法检测sFlt-1对VEGF诱导的HUVECs生长的影响。结果显示:①插入片段序列正确;②sFlt-1在基因水平成功表达且转染后的Lewis肺癌细胞能分泌表达sFlt-1;③含sFlt-1的细胞上清液可明显抑制VEGF诱导的HUVECs增殖。本研究成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-sFlt-1,sFlt-1,在基因和蛋白水平均获得有效表达,且表达的蛋白可明显抑制由VEGF诱导的血管内皮细胞增殖。

LCD教学模式在解剖实验教学中的实践探索

结合本校教学实际，重庆医科大学解剖学教研室在解剖实验教学过程中建立了LCD（learuing．communication ＆ discussion）教学模式。该模式包括3个基本环节；L指学习（learning），包括在教学大纲的指导下进行学习（syllabus orientated learning）、拓展性学习（extended learning）以及基于专题的自主学习（topicbased learning）；C和D（communication ＆ discussion）是指在学习的基础上进行交流和讨论。LCD教学可提高学生学习解剖学知识的兴趣，加深其对基础知识的理解。促进基础和临床的结合，使学生的自主学习和创新学习等能力得到提高。

AQP3在人不同病理级别星形细胞瘤组织中的表达变化研究

目的探讨水通道蛋白3(AQP3)的表达变化与人不同病理级别星形细胞瘤的关系。方法收集人各个级别星形细胞瘤标本50例,取肿瘤周围相对正常脑组织作为对照组,采用石蜡切片免疫组织化学、Western blot及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等技术观察AQP3及其mRNA的表达变化。结果50例标本中Ⅰ级5例,Ⅱ级11例,Ⅲ级20例,Ⅳ级14例,免疫组织化学显示AQP3主要分布在星形细胞瘤组织细胞内,呈不均匀分布;Western blot和RT-PCR结果显示在对照组及各肿瘤组织中均可观察到AQP3及其mRNA特定的免疫阳性反应产物,且高级别肿瘤组织显示灰度比低级别和对照组明显增强。免疫组织化学半定量分析与Western blot、RT-PCR结果一致显示,与对照组比较,高级别星形细胞瘤组织AQP3及其mRNA表达上调(P<0.05),而低级别星形细胞瘤组织中无明显变化(P>0.05)。结论AQP3及其mRNA仅在人高级别星形细胞瘤组织中表达增强,AQP3的表达变化与人星形细胞瘤的恶性程度有关。

在解剖学实验教学中增强医学生参与创新实验能力的实践

在医学生中开展创新实验是提高培养质量的重要途径。重庆医科大学解剖教研室教师在实验教学中,将解剖知识拓展至基本科研技术,提升学生参与创新实验课题的信心;将解剖结构与热点医学研究问题相结合,助力学生创新实验选题;将新媒体教学法融入解剖学教学中,启发学生完善课题设计;在局部解剖学实践中,引导学生开展创新实验及撰写论文。以上措施的开展,在提升解剖教学质量的同时,提高了学生的科研能力,为他们参与创新实验课题奠定了基础。

婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1真核表达系统对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效果

目的观察婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1真核表达系统对Lewis肺癌(LLC)小鼠的抑瘤效果。方法将24只C57BL/6LLC小鼠随机分为pcDNA3.1婴儿双歧杆菌组(A组)、pcDNA3.1-sFlt-1重组婴儿双歧杆菌组(B组)及生理盐水对照组(C组)。观察小鼠的生存质量、肿瘤体积、肿瘤重量及抑瘤率,并取血、肿瘤组织及其他组织进行厌氧培养;另取45只荷瘤鼠观察生存率。结果 B组小鼠的肿瘤体积及重量明显小于A、C组,抑瘤率明显高于A组;A、B组的肿瘤组织厌氧培养时可见大量白色菌落生长,其他组织未见菌落生长,血培养仅见几个菌落生长。B组小鼠的存活率及生存质量明显优于A、C组。结论婴儿双歧杆菌介导的sFlt-1真核表达系统可明显抑制肿瘤生长、显著提高荷瘤鼠的存活率,具有良好的安全性及肿瘤靶向性。