灯盏花素调节lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2轴抑制哮喘模型小鼠气道炎症

目的探究灯盏花素通过长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1/microRNA(miR)-9-5p/SLC26A2轴对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及分子机制。方法15只6~8周雄性C57BL/6J小鼠,按照随机数字表法分为三组,即对照组、哮喘模型组和灯盏花素组。灯盏花素组小鼠在哮喘模型构建完成后每天1次灌胃10 mg/kg灯盏花素,连续7 d;对照组及哮喘模型组则使用等体积0.9%生理盐水进行灌胃处理。采用苏木素-伊红(HE)染色和过碘酸雪夫(PAS)染色对小鼠肺组织进行组织病理学观察。采用Wright-Giemsa对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行染色及细胞学检测。酶联免疫吸附实验检测BALF及血清中炎性因子的水平。荧光原位杂交检测NEAT1的表达。实时荧光定量PCR检测lncRNA-NEAT1、miR-9-5p和SLC26A2 mRNA的表达。蛋白免疫印迹检测SLC26A2的蛋白表达。结果与对照组比较,哮喘模型组小鼠的BALF炎性细胞总数[(68.32±7.25)×10^(4)/mL比(17.71±3.14)×10^(4)/mL,P<0.01]、中性粒细胞数[(5.50±0.58)×10^(4)/mL比(0.72±0.15)×10^(4)/mL,P<0.01]、巨噬细胞数[(13.02±1.04)×10^(4)/mL比(2.70±0.61)×10^(4)/mL,P<0.01]、淋巴细胞数[(23.07±2.90)×10^(4)/mL比(4.13±0.53)×10^(4)/mL,P<0.01]、嗜酸性粒细胞数[(22.13±2.21)×10^(4)/mL比(1.63±0.22)×10^(4)/mL,P<0.01]增加;肺组织炎性细胞浸润水平增加[(2.49±0.25)分比(0.26±0.04)分,P<0.01],PAS评分升高[(2.24±0.16)分比(0.26±0.08)分,P<0.01];血清IgE[(3.52±0.32)IU/mL比(1.02±0.08)IU/mL,P<0.01]及BALF中白细胞介素-5(IL-5)[(154.48±9.27)pg/mL比(54.56±3.35)pg/mL,P<0.01]、白细胞介素-13(IL-13)[(96.86±6.45)pg/mL比(79.18±3.34)pg/mL,P<0.05]、白细胞介素-17(IL-17)[(185.24±7.24)pg/mL比(73.32±4.15)pg/mL,P<0.01]表达上升,干扰素-γ(INF-γ)表达下降[(48.46±3.81)pg/mL比(84.76±2.91)pg/mL,P<0.01]。与哮喘模型组比较,灯盏花素组小鼠BALF炎性细胞总数[(52.10±7.59)×10^(4)/mL比(68.32±7.25)×10^(4)/mL,P<0.05]、中性粒细胞数[(4.21±0.54)×10^(4)/mL比(5.50±0.58)×10^(4)/mL,P<0.05]、巨噬细胞数[(3.61±0.28)×10^(4)/mL比(13.02±1.04)×10^(4)/mL,P<0.01]、淋巴细胞数[(9.52±1.23)×10^(4)/mL比(23.07±2.90)×10^(4)/mL,P<0.01]、嗜酸性粒细胞数[(8.87±1.33)×10^(4)/mL比(22.13±2.21)×10^(4)/mL,P<0.01]降低;肺组织炎性细胞浸润水平[(1.46±0.15)分比(2.49±0.25)分,P<0.01]及PAS评分降低[(0.58±0.07)分比(2.24±0.16)分,P<0.01];血清IgE[(1.83±0.14)IU/mL比(3.52±0.32)IU/mL,P<0.01]及BALF中IL-5[(78.25±4.44)pg/mL比(154.48±9.27)pg/mL,P<0.01]、IL-13[(59.34±5.32)pg/mL比(96.86±6.45)pg/mL,P<0.01]、IL-17[(125.60±5.88)pg/mL比(185.24±7.24)pg/mL,P<0.01]表达下降,INF-γ[(65.48±4.49)pg/mL比(48.46±3.81)pg/mL,P<0.05]表达上升。与对照组比较,哮喘模型组小鼠肺组织中NEAT1[(3.96±0.32)比(1.00±0.15),P<0.01]、SLC26A2相对表达上升[(3.91±0.32)比(1.00±0.08),P<0.01],miR-9-5p相对表达量显著下降[(0.48±0.07)比(1.00±0.09),P<0.01]。与哮喘模型组比较,灯盏花素组小鼠NEAT1[(1.82±0.28)比(3.96±0.32),P<0.01]、SLC26A2相对表达降低[(2.00±0.23)比(3.91±0.32),P<0.01],miR-9-5p相对表达增加[(0.67±0.06)比(0.48±0.07),P<0.05]。结论灯盏花素可能通过调节lncRNA NEAT1/miR-9-5p/SLC26A2轴抑制哮喘小鼠的气道炎症。

43例儿童A组乙型溶血性链球菌临床耐药性分析

目的了解A组乙型溶血性链球菌(GAS)阳性的猩红热患儿的耐药情况,以便指导临床用药,减少临床并发症的发生。方法采集猩红热患儿咽拭子标本,分离GAS 43株,进行药物敏感性试验。结果 GAS对红霉素耐药率81.4%(35例),对克林霉素耐药率67.4%(29例),对四环素耐药率79.1%(34例),对左氧氟沙星耐药率13.9%(6例),仅1例对氯霉素耐药。对青霉素、氨苄西林、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、万古霉素均未发现耐药。结论 GAS对存在对多种抗生素耐药,但以对大环内酯类抗生素耐药性为主,对青霉素及头孢类抗生素仍敏感,未发现耐药的菌株。

儿童细菌性痢疾36例多重耐药的分析

目的 进一步了解儿童多重耐药志贺菌感染的菌群分布及药敏情况。方法 对杭州市儿童医院2011年4月至2013年6月就诊的14周岁以下患儿多重耐药志贺菌感染的菌群及药敏结果进行统计分析。结果 在培养出多重耐药志贺菌的36名患儿中，男童23名，女童13名，男女比例为1．77：1，年龄分布10个月至9岁，平均年龄3．14±1．23岁。在收集到的36株多重耐药志贺菌中，有27株分离于0～5岁患儿粪便，占75．0％；9株分离于6～10岁患儿粪便，占25．0％。药敏结果显示，氨苄西林、庆大霉素以及头孢唑林的耐药率最高达100．0％。收集的36株志贺菌全部多重耐药，均对头孢唑林、氨苄西林、庆大霉素耐药；四重耐药只有福氏志贺菌4株，宋内志贺菌1株，共占13．9％（5／36），其余31株均为四重以上耐药，占86．1％（31／36）。结论 本地区儿童疑为多重耐药志贺菌感染时，宜首选呋喃妥因、头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦等抗菌素。

小儿柴桂退热颗粒对疱疹性咽峡炎患儿的疗效分析

目的:探讨小儿柴桂退热颗粒治疗疱疹性咽峡炎患儿的临床效果。方法:选取2015年1月~2015年12月浙江省杭州市第三人民医院及杭州市儿童医院收治的200例疱疹性咽峡炎患儿进行回顾性分析,其中观察组100例采用常规西医疗法+柴桂退热颗粒治疗,对照组100例采用常规西医疗法治疗,疗程3天。结果:观察组流涎症状消失、体温恢复、疱疹愈合时间及总病程均显著短于对照组(P<0.05);治疗3天后,观察组血清IgA、IgM水平显著高于对照组(P<0.05),中医症候评分显著低于对照组(P<0.05),愈显率显著高于对照组(P<0.05)。两组患儿总有效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:小儿柴桂退热颗粒辅助治疗疱疹性咽峡炎患儿较单纯西医疗法的效果更好。

EV-71感染危重型手足口病危险因素分析

目的探讨EV-71感染的普通型手足口病(HFMD)进展为危重型的影响因素,建立危重型HFMD的早期预警模型。方法选择2016年杭州市某儿童医院收治的65例确诊为EV-71感染的手足口病患儿为研究对象,其中普通型30例,危重型35例。比较两组患儿的一般情况、现病史和实验室检查指标,采用单因素分析筛选风险因素,Logistic回归分析独立危险因素。建立早期预警模型,并采用受试者工作曲线(ROC)评价。结果EV-71感染的普通型HFMD与危重病例在口腔疱疹、发热天数、最高体温、高热天数、发病至初诊时间、发病至入院时间、血糖、血清IgG水平存在明显差异(P<0.05),Logistic模型显示血糖、最高体温、高热天数、发病至初诊时间和口腔疱疹是危重型手足口病的独立危险因素(P<0.05)。预测模型ROC曲线下面积(AUC)为0.915,模型的敏感度为89.2%,特异度为90.5%,总体准确率为89.7%。结论密切观察EV-71感染的普通型HFMD患儿的血糖、最高体温、高热天数、发病至初诊时间和口腔疱疹,能够对危重症倾向进行早期预警。

家庭内感染手足口危险因素分析

手足口病是由柯萨奇16（CoxAl6）、EV71等肠道病毒引起的传染性疾病，多见于于5岁以下儿童，尤其是3岁以下发病率最高。传染源主要为发病患儿及隐性感染者，主要通过消化道、呼吸道和密切接触等途径传播。

布地奈德联合硫酸特布他林雾化吸入对支气管哮喘患儿血清趋化素样因子-1、环氧化酶2水平变化的影响

目的探讨布地奈德联合硫酸特布他林雾化吸入对支气管哮喘患儿血清环氧化酶2(COX-2)及趋化素样因子-1(CKLF-1)水平变化的影响。方法选取杭州市儿童医院2016年4月至2017年8月收治的支气管哮喘患儿78例,采用随机数字表法分为对照组(n=39)与研究组(n=39)。对照组采取常规治疗,研究组于对照组基础上加用布地奈德+硫酸特布他林,均治疗7d。疗程结束后统计两组临床疗效、临床症状改善及住院用时、治疗前后血清COX-2及CKLF-1水平、不良反应发生率。结果研究组总有效率(94.87%)高于对照组(74.36%)(χ^2=6.303,P<0.05);研究组胸闷、喘息及咳嗽改善用时、住院时间短于对照组(t1=13.054,t2=7.365,t3=4.944,t4=8.342,P<0.05);治疗前两组血清COX-2及CKLF-1水平差异无统计学意义(P>0.05),疗程结束后两组血清COX-2及CKLF-1水平较治疗前降低,且研究组低于对照组(t1=4.934,t2=4.660,P<0.05);研究组不良反应发生率(12.82%)与对照组(7.69%)相比差异无统计学意义(χ^2=0.139,P>0.05)。结论联合采取布地奈德及硫酸特布他林雾化吸入治疗支气管哮喘患儿,可有效缓解其临床症状,并降低血清COX-2及CKLF-1水平,提高治疗效果,促使患儿及早康复出院,且不良反应发生率较低,具有安全性。

胸腺活化调节趋化因子在儿童肺炎支原体感染致哮喘发作中的作用

目的研究胸腺活化调节趋化因子(TARC)在儿童肺炎支原体(MP)感染致哮喘发作中的作用。方法收集肺炎患儿73例(支气管哮喘患儿除外)。在入院时(急性期)采集静脉血用被动凝集法检测MP-Ig M并用间接免疫荧光法检测其他7种呼吸病原体Ig M,并于-70℃保存部分血清;采集咽拭子用荧光定量-聚合酶链反应检测MP-DNA。根据临床诊断和MP-Ig M或MP-DNA拷贝数分为MP感染组和非MP感染组。在病情明显好转时(恢复期),对伴有哮喘发作的患儿采静脉血分离血清,置于-70℃保存。采用酶联免疫吸附试验测定患儿血清中TARC的水平。评价血清中TARC水平在两组患儿之间以及急性期和恢复期之间的差异性。结果 MP感染组患儿中有哮喘发作的比例高于非MP感染组,差异有统计学意义(χ2=4.44,P=0.04)。MP感染组患儿的TARC水平高于非感染组,差异有统计学意义(t=4.01,P=0.00)。MP感染组,有哮喘发作患儿的TARC水平高于非MP感染组有哮喘发作患儿和无哮喘发作患儿,差异有统计学意义(t=2.62,P=0.01;t=5.21,P=0.00);TARC水平无哮喘发作患儿的高于非MP感染组无哮喘发作患儿,差异有统计学意义(t=2.07,P=0.05)。MP感染组和非MP感染组,有哮喘发作患儿的TARC水平均高于无哮喘发作患儿,差异有统计学意义(t=2.11,P=0.04;t=2.03,P=0.05);有哮喘发作患儿恢复期的TARC水平较急性期均有下降,差异有统计学意义(t=4.69,P=0.00;t=2.37,P=0.05)。结论 TARC在MP感染诱发哮喘发作中起重要作用。

西替利嗪联合抗幽门螺杆菌三联疗法治疗儿童慢性荨麻疹的疗效观察及其对血清炎性因子、免疫球蛋白水平的影响

目的探讨西替利嗪联合抗幽门螺杆菌（Hp）三联疗法治疗慢性荨麻疹的效果及对其血清炎症因子、免疫球蛋白水平的影响。方法选择Hp检测为阳性慢性荨麻疹患儿86例，按随机数字表法分为两组，各43例，对照组患儿给予西替利嗪治疗（4周），观察组患儿在对照组治疗的基础上加用抗Hp三联疗法（奥美拉唑＋阿莫西林＋克拉霉素干混悬剂）治疗1周，治疗1周后观察组患儿行Hp检测，判定Hp转阴情况。全部患儿治疗4周后根据临床症状积分变化情况判定治疗效果；并且治疗前后均采集外周静脉血，以检测白细胞介素4（IL-4）、肿瘤坏死因子仪（TNF—d）、免疫球蛋白（IgE）水平。结果观察组治疗总有效率为90．0％，明显高于对照组（63．4％），差异有统计学意义（）f。=4．036，P〈0．05）。两组治疗前IL4、TNF-a、IgE水平无明显差异（P〉0．05），治疗后观察组IL-4、TNF-a、IgE水平明显低于对照组（t=11．362、6．581、17．393，均P〈0．05）。观察组中Hp转阴患儿总有效率为96．6％，明显高于Hp未转阴患儿（72．7％），差异有统计学意义（x。=3．975，P〈0．05），且治疗后Hp转阴患儿IL-4、TNF-a、IgE水平明显低于Hp未转阴患儿，差异有统计学意义（t=10．274、5．983、9．146，均P〈0．05）。结论Hp感染可能是引起儿童慢性荨麻疹的重要因素，西替利嗪联合抗Hp三联疗法治疗慢性荨麻疹可有效降低血清炎性因子、免疫球蛋白水平，缓解临床症状，提高临床疗效，值得进一步研究应用。