骨髓增生异常综合征造血细胞bcl-2 VEGF抗原表达及原位凋亡的研究

目的:研究骨髓增生异常综合征(MDS)bcl-2、VEGF抗原表达及造血细胞原位凋亡之间的关系,探讨MDS发病机理。方法:对MDS患者骨髓活检标本光镜下观察骨髓增生程度、各系造血细胞形态异常情况、不成熟前体细胞异常定位(ALJP)等组织病理学改变,免疫组织化学染色观测bcl-2及VEGF抗原的表达,TUNEL法检测造血细胞原位凋亡结果:13例患者骨髓均有不同程度的异常造血,异常造血主要累及的细胞系列不尽相同,RA、RAEB两组患者异常造血未见明显区别;有6例患者检出ALIP现象,其中RA 3例(3/8,37.50%),RAEB 3例(3/5,60.00%);VEGF阳性者占9例(9/13,69.23%),其中RA 6例(6/8,75.00%),RAEB 3例(3/5,60.00%);bcl-2阳性者占7例,其中RA4例(4/8,50.00%),RAEB 3例(3/5,60.00%);TUNEL检测13例患者均为阳性,检出ALIP现象者,其造血细胞发生原位调亡明显,而bcl-2、VEGF与TUNEL结果之间未见明显关联。结论:MDS患者均存在不同程度的细胞凋亡异常,而TUNEL法提供了简便、实用、敏感、快速特异的检测MDS细胞原位凋亡的方法结果初步显示MDS患者ALlP现象明显者其细胞凋亡也明显,提示调控MDS患者细胞凋亡和恶性克隆增殖可能是两种完全不同的机制。

rhTPO的分子克隆表达及活性测定

目的；分子克隆并表达具有生物学活性的人血小板生成素（rhTPO）。方法：采用PCR、序列测定、原核表达及亲和层析法。结果：以人全长的TPOCDNA为模板[1]，用PCR法获得了编码195个氨基酸残基的hTPO195cDNA并克隆至原核表达质粒pMal－p2中，以麦芽糖融合蛋白（MBP）方式进行了表达。经Amylose树脂系和层析纯化获得了较高纯度的rhTPO195融合蛋白。生物学活性测定结果显示，其促进体外培养的巨核细胞集落形成与日本麒麟（Kirin）公司产品类似。结论；获得了具有天然生物学活性rhTPO，并在原核细胞中获得表达。

异基因造血干细胞移植后血巨细胞病毒定量监测及临床意义

目的 探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后巨细胞病毒（CMV）的易感因素及CMV血症对allo-HSCT患者生存的影响。方法 Allo-HSCT患者从预处理开始至移植后3个月内，采用荧光定量PCR方法每周检测1次外周血单个核细胞CMV DNA拷贝数，应用单因素分析及多因素回归分析发生CMV血症的危险因素，比较并分析CMV血症与无CMV血症患者5年总生存率的差别。结果 183例患者中有132例（72.1%）发生CMV血症，其中78例（59.1%）发生在回输干细胞1个月后，54例（40.9%）发生在回输干细胞1个月内，回输干细胞后3个月内血中CMV检测持续阴性者51例（27.9%）。183例患者中只有2例明确诊断为CMV病，发生率为1.1%。单因素分析及多因素回归分析均显示，发生CMV血症的危险因素为移植方式和环孢素A（CsA）浓度＞300 μg/L。不同移植方式间两两比较显示亲缘相合移植与亲缘不全相合、无关供者及脐带血移植组之间CMV血症发生率差异均有统计学意义（P〈0.05），而亲缘不全相合、无关供者和脐带血移植组两两比较差异均无统计学意义，进一步将患者分为使用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）组和未用ATG组进行统计分析，结果显示两组间CMV血症差异存在统计学意义（P〈0.001）。Kaplan-Meier生存曲线显示CMV血症与无CMV血症患者5年总生存率之间差异无统计学意义（P=0.387）。结论 Allo-HSCT后CMV血症发生率高达72.1%，使用ATG以及CsA浓度〉300 μg/L是发生CMV血症的主要危险因素。CMV血症对allo-HSCT患者的累计总生存率无显著影响，及时治疗CMV血症对防止CMV病有重要意义。

自体造血干细胞移植治疗原发性淀粉样变性的临床研究

目的探讨原发性淀粉样变性患者自体造血干细胞移植（auto—HSCT））治疗的适应证、预处理方案的选择、疗效和死亡原因。方法回顾性分析20例原发性淀粉样变性患者移植前器官功能状态、移植动员方案以及预处理方案等因素对治疗结果的影响，并对死亡原因进行分析。结果20例患者中有15例可进行血液学治疗反应评价，11例达血液学缓解，其中完全缓解6例（40％），起效中位时间为移植后3．0（1．5～4．0）个月；部分缓解5例（33％），起效中位时间为移植后4（3—5）个月。11例血液学缓解患者均有肾脏器官治疗反应，起效中位时间为移植后3（2～6）个月。除去3例早期死亡患者，其余17例中位随访15（4～55）个月，3年总生存率达71．4％。死亡患者分别合并心、肾功能不全和凝血功能障碍；单独使用G—CSF即可获得满意的动员效果，多数患者能够耐受140—200mg／m2马法兰的预处理方案。结论auto—HSCT治疗原发性淀粉样变性疗效好。移植前心血管系统受累和肾功能损伤以及凝血功能异常是其主要死亡原因，应严格掌握适应证。