基于多试验信息的可靠性综合评估方法

针对在长寿命高可靠产品的样本及数据极少的情况下,同一个样本由于经历了不同环境下的试验而无法进行寿命及可靠性评估的问题,通过对产品进行可靠性建模,并在此基础上进行失效率预计,由预计结果计算获取了各种试验环境下的环境折合因子,由此得到不同环境下的试验所对应规定环境下的试验信息,可对产品的寿命及可靠性进行评估。

三种方法提取毛霉菌核酸效能的比较实验研究

目的 比较改良碱裂解法、一步法和磁珠法提取毛霉菌核酸效能的差异,探索一种用于PCR扩增的快速、高效、简便、经济的毛霉菌核酸提取方法。方法 分别用改良碱裂解法、一步法和磁珠法提取黑根毛霉(Rhizomucor miehei,R.miehei)、伞枝犁头霉(Lichtheimia corymbifera,L. corymbifera)和卷枝毛霉(Mucor circinelloides,M. circinelloides)3株毛霉菌核酸,使用Qbit4核酸浓度测定仪测定核酸浓度,并进行实时荧光定量PCR扩增实验,比较其扩增后的循环阈值(Ct)差异和核酸提取效率。结果 改良碱裂解法、一步法及磁珠法均能提取R. miehei,L. corymbifera和M.circinelloides 3株毛霉菌核酸,其中一步法提取所得核酸的浓度最高,改良碱裂解法次之,磁珠法最低,差异具有统计学意义(F=38.803,2 160.759,325.175,均P<0.05)。改良碱裂解法提取毛霉菌核酸耗时最短(10.00±1.50 min),一步法次之(25.00±1.50 min),磁珠法最长(75.00±1.50 min),差异有统计学意义(F=2 574.074,P<0.01)。磁珠法提取毛霉菌核酸耗费成本和设备依赖度最高,其次是一步法次之,改良碱裂解法最低。改良碱裂解法、一步法及磁珠法提取的3株毛霉菌核酸均能扩增出阳性结果。三种方法提取R. miehei菌株核酸扩增后Ct值分别为18.72±0.18,17.42±0.46和18.97±0.46,差异有统计学意义(F=22.375,P<0.01),其中改良碱裂解法和磁珠法提取的核酸扩增后Ct值差异无统计学意义(t=1.114,P>0.05),一步法提取的核酸扩增后的Ct值小于另外两种方法,差异有统计学意义(t=5.852,5.277,均P<0.05)。提取L. corymbifera菌株核酸扩增后Ct值分别为16.23±0.13,21.23±0.25和14.53±0.04,差异有统计学意义(F=2 298.548,P<0.01),其中改良碱裂解法提取的核酸扩增后的Ct值小于一步法,差异有统计学意义(t=40.031,P<0.01),磁珠法提取的核酸扩增后的Ct值小于另外两种方法,差异有统计学意义(t=27.953,60.265,均P<0.05)。提取M. circinelloides菌株核酸扩增后Ct值分别为16.77±0.28,15.38±0.88和16.13±0.20,差异有统计学意义(F=8.152,P<0.01),其中改良碱裂解法提取的核酸产物扩增后的Ct值大于另外两种方法,差异有统计学意义(t=3.372,4.106,均P <0.05),一步法和磁珠法提取的核酸产物扩增后的Ct值差异无统计学意义(t=1.866,P> 0.05)。结论 改良碱裂解法、一步法及磁珠法均可成功提取毛霉菌核酸,其中改良碱裂解法操作简便、耗时最短、耗费成本和设备依赖性最低,所提取毛霉菌核酸模板能够满足实时荧光定量PCR扩增要求。

肠道活菌制剂对慢性阻塞性肺疾病急性加重患者的疗效

目的探讨肠道活菌制剂对慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者的治疗效果。方法选择2019年5月至10月昆明市第一人民医院甘美医院呼吸与危重症医学科60名AECOPD住院患者为研究对象,随机分为对照组(常规治疗)和治疗组(常规治疗+肠道活菌制剂)各30例。治疗2周后,比较两组在呼吸困难评分、肺功能、大便菌群球杆比失衡发生率、大便中双歧杆菌及乳酸杆菌、住院天数之间的差异。分析肠道活菌制剂的安全性。结果治疗组治疗后大便菌群中球杆比失衡发生率较对照组治疗后明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组、对照组治疗后MMRC均较治疗前下降,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组、对照组治疗后FEV1%pre均较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后大便双歧杆菌及乳酸杆菌Ct值较治疗前均下降,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组治疗后大便双歧杆菌及乳酸杆菌Ct值较治疗前均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组与对照组治疗后大便双歧杆菌及乳酸杆菌Ct值差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗前后的MMRC、大便双歧杆菌及乳酸杆菌Ct值的差值与对照组治疗前后差值之间均有统计学意义(P<0.05);治疗组的住院天数短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肠道活菌制剂治疗过程中无不良安全事件出现。结论肠道活菌制剂治疗AECOPD,可以降低患者大便菌群中球杆比失衡发生率、降低MMRC评分,改善肺功能,改善患者肠道益生菌群,缩短住院时间,安全性好。

昆明地区儿童血清25羟基维生素D水平检测及维生素D营养状态分析

目的了解昆明地区儿童血清25羟基维生素D[25(OH)D]水平及维生素D营养状态,为儿童合理补充维生素D提供科学依据。方法选取昆明市第一人民医院2016年11月~2019年10月体检儿童0~14岁600例为研究对象,采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法检测血清25(OH)D水平,分析不同性别、年龄及季节儿童血清25(OH)D水平及营养状态。结果600例0~14岁儿童血清25(OH)D水平为27.44±8.82 ng/ml。血清25(OH)D缺乏率为19.33%(116/600),不足率为47.67%(286/600),充足率为33.00%(198/600)。女童的缺乏率(24.83%)高于男童(14.33%),儿童血清25(OH)D的缺乏、不足和充足率在不同性别间差异有统计学意义(χ^2=11.784,P<0.01)。6~14岁儿童血清25(OH)D缺乏率高于0~1岁、1~3岁和3~6岁儿童(46.81%vs 5.88%,5.86%和19.53%),血清25(OH)D的缺乏、不足和充足率在不同年龄段上差异有统计学意义(χ^2=188.515,P<0.01)。夏、冬季的儿童血清25(OH)D缺乏率高于春、秋季(22.00%,27.50%vs 12.80%,11.43%),不同季节血清25(OH)D的缺乏、不足和充足率差异有统计学意义(χ^2=14.492,P<0.05)。结论昆明地区0~14岁儿童血清25(OH)D营养状况欠佳,应加强维生素D健康宣传工作,提高儿童血清25(OH)D的监测,特别关注3~14岁阶段儿童维生素D的补充。

云南地区肾移植受者HLA基因分布频率分析

目的探讨云南地区肾移植受者人类白细胞抗原(HLA)-A、B、DRB1和DQB1位点等位基因分布频率。方法收集2017年6月至2020年11月该院1251例肾移植受者HLA基因检测结果,分析HLA-A、B、DRB1和DQB1位点等位基因分布频率。结果HLA-A位点检出等位基因17种,其中A*11、A*02和A*24分布频率较高,分别为0.3145、0.2802和0.1930。HLA-B位点检出等位基因31种,其中B*15、B*40和B*46分布频率较高,分别为0.1926、0.1199和0.1199。HLA-DRB1位点检出等位基因14种,其中DRB1*12、DRB1*04、DRB1*09分布频率较高,分别为0.2178、0.1399和0.1171。HLA-DQB1位点检出等位基因7种,其中DQB10301、DQB1*05和DQB1*06分布频率较高,分别为0.2866、0.2010和0.1671。结论云南地区肾移植受者HLA-A、B、DRB1和DQB1位点中,A*11、B*15、DRB1*12和DQB10301分别为分布频率最高的等位基因,符合南方汉族人群HLA基因多态性的分布特征。