槲皮素对骨肉瘤MG-63细胞凋亡及诱导自噬、抑制侵袭的作用

目的探讨槲皮素对骨肉瘤MG-63细胞凋亡及诱导自噬、抑制侵袭的作用。方法取人骨肉瘤MG-63细胞,分为二甲基亚砜组和槲皮素组,分别给予0.1%二甲基亚砜、200μg/mL槲皮素处理。培养48 h后,使用流式细胞仪检测2组细胞凋亡情况,运用腺病毒双荧光载体mRFP-GFP-LC3转染技术检测2组人骨肉瘤MG-63细胞自噬情况。另取人骨肉瘤MG-63细胞,设空白对照组,采用Transwell侵袭小室试验检测不同浓度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)槲皮素处理后的细胞侵袭能力。结果与二甲基亚砜组比较,槲皮素组MG-63细胞早期凋亡率、晚期凋亡和坏死率均明显增高(P均<0.05),MG-63活细胞率明显降低(P<0.05),MG-63细胞自噬水平明显上调(P<0.05)。25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L槲皮素处理后的穿膜细胞数分别为空白对照组的(86.48±5.02)%,(70.02±4.93)%和(42.87±4.62)%,呈浓度依赖性降低,两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论槲皮素可诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡和自噬,并可抑制骨肉瘤细胞的侵袭,具有抗骨肉瘤作用。

树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞联合索拉非尼治疗晚期肾癌的效果

目的探讨树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)联合索拉非尼治疗晚期肾癌的临床效果。方法纳入64例晚期肾癌患者,随机双盲对照分为观察组(n=32)和对照组(n=32),观察组给予DC-CIK联合索拉非尼治疗,对照组单纯给予索拉非尼治疗,比较两组患者的疾病控制率(DCR)、客观有效率(ORR)、无进展生存期(PFS)、不良反应、生活质量差异。结果 (1)观察组与对照组各有1例因经济原因中途退出试验,未进行结果评价,观察组和对照组的DCR分别为83.87%和80.65%,ORR分别为19.35%和19.35%,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)观察组和对照组的中位PFS分别为12个月和10个月,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在生活质量方面,观察组与对照组的Karnofsky评分总提高率分别为90.33%及64.52%,差异有统计学意义(P<0.05),观察组与对照组比较,胃纳差、睡眠障碍、疲乏等基本情况显著好转,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)两组患者不良反应发生率相近,主要表现为手足皮肤综合征、消化道反应、高血压、全身反应、肝功能损害、发热,两组间差异无统计学意义(P>0.05),观察组仅有2例患者出现发热,发生率为6.5%,未见严重不良反应。结论 DC-CIK联合索拉非尼治疗晚期肾癌可延长患者的PFS,提高生活质量,不良反应小。

DC-CIK治疗肾癌研究进展

树突状细胞(DC)是目前已知体内功能最强的抗原递呈细胞。细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞是一种高效、广谱杀瘤活性的非主要组织相容性复合体限制性免疫效应细胞。DC细胞与CIK细胞的有机结合可产生特异性免疫和非特异性免疫的双重抗肿瘤作用。DC-CIK合理应用可有效提高机体抗肿瘤作用,能够杀伤清除不能用手术切除的极微小瘤灶或体内散存的肿瘤细胞,起到延缓或阻止肿瘤转移或复发的作用,为肾癌治疗开辟了一条新的治疗途径。现就DC-CIK治疗肾癌的研究进展予以综述。

槲皮素对骨肉瘤MG-63细胞生长周期及PI3K-Akt-mTOR通路表达的影响

目的探讨槲皮素对骨肉瘤MG-63细胞生长周期及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达的影响。方法取人骨肉瘤MG-63细胞分为对照组和实验组,分别给予0.1%二甲基亚砜、200μg/mL槲皮素处理24 h、48 h、72 h。使用流式细胞仪检测各组细胞的生长周期,运用免疫蛋白印迹法检测各组细胞中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。结果干预后48 h,与对照组比较,实验组的G_(1)期细胞比例增加,而S期细胞比例减少,且p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达水平降低(均P<0.05)。结论槲皮素可能通过阻断PI3K-Akt-mTOR通路阻滞骨肉瘤MG-63细胞生长,从而发挥抗骨肉瘤效应。

四联疗法治疗肺癌骨转移1例

1病历摘要 患者男，57岁，2008年8月因．咳嗽、痰中带血、右侧胸痛行胸部CT检查诊断右下肺癌，行右下肺叶切除＋纵隔淋巴结清扫术．术后病理示分化差的神经内分泌癌，较符合大细胞未分化癌。给予化疗三周期（方案不详），08年12月查ECT示：L5、左第5、10后肋、右第5～8肋骨多发转移．患者未诉骨痛；09年2月入我院治疗，入院查体：

rhG-CSF动员外周血干细胞对健康供者的影响

目的探讨rhG-CSF对健康供者的影响。方法8例健康供者应用rhG-CSF5～10ug.kg-1.d-1动员,观察动员及采集过程的不良反应,检测动员前后血常规、CD3、CD19、CD3+4、CD3+8、CD16+56细胞比例,并随访所有供者。结果50%(4/8)供者无任何不适,2例出现低热,一例头痛,一例腰痛等副作用,无需终止动员,动员后WBC较动员前显著升高,停止动员后3天恢复动员前水平。HB、PLT、CD3、CDl9、CD3+4、CD3+8、CD16+56细胞比值与动员前、动员72h、96h的变化无统计学意义。结论健康供者可耐受5～10ug.kg-1.d-1剂量的rhG-CSF动员且对淋巴细胞亚群分布无影响。

非血缘造血干细胞移植的临床研究

目的探讨非血缘性(无关供者)异基因造血干细胞移植治疗白血病。方法HLA配型不相合非血缘脐血移植治疗儿童白血病3例(ALL,CR2),无关供者异基因外周血造血干细胞移植治疗成人白血病1例(M6,NR),输入的脐血有核细胞(4.98～6.68)×107.kg-1,CD34+(2.24～4.93)×105.kg-1。输入的外周血的单个核细胞7.04×108.kg-1,CD34+1.08×106.kg-l。预处理主要为:阿糖胞苷,马利兰,环磷酰胺,甲基环已亚硝脲,抗胸腺细胞球蛋白。结果4例患者完全植入,+15～+25天白细胞(WBC)>1.0×109L-1,+35天～+51天血小板(PLT)>20×109L-1。例1移植后+12及+51天出现可疑为急性GVHDI度,例4于+16天出现肝静脉闭塞综合征(轻型)(VOD),+17天出现急性消化道GVHDI度,+30天出现出血性膀胱炎(HC),例2于移植后六个月复发,放弃治疗而死亡。余3例正常生活或工作。结论无关供者或对于HLA不相合的异基因造血干细胞移植是治疗白血病的有效方法,且可以是安全、可行的。

中药联合艾灸治疗腹泻型肠易激综合征的临床研究

【目的】观察中药联合艾灸治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者的临床疗效及对患者生活质量的影响。【方法】将74例IBS-D患者随机分为治疗组和对照组,每组各37例。治疗组给予自拟中药(以四神丸合参苓白术散为基础方)联合艾灸(取穴神阙、中脘、足三里、天枢、脾俞、肾俞)治疗,对照组给予口服匹维溴铵片,疗程4周。观察2组治疗前后中医证候和生活质量(QOL)的变化情况,评价2组的临床疗效及安全性。【结果】(1)2组各有2例患者无法坚持服药而退出研究,即最终2组各有35例患者完成试验。(2)治疗4周后,治疗组的总有效率为91.43%,对照组为85.71%,2组疗效比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。(3)治疗后,治疗组的大便泄泻、腹痛腹胀、脘腹痞满、倦怠乏力、神疲懒言、畏寒肢冷、腰膝酸软、食欲不振8个证候评分均较治疗前明显降低(P <0.01);而对照组仅大便泄泻、腹痛腹胀、脘腹痞满、倦怠乏力4个证候评分较治疗前降低(P <0.05或P <0.01);治疗组在改善各项中医证候评分方面优于对照组(P <0.05或P <0.01)。(4)治疗后,2组IBSQOL 8个项目评分均有不同程度改善(P <0.05或P <0.01),且治疗组在改善情绪状况、精神状态、睡眠状况和饮食影响方面优于对照组(P <0.05或P <0.01)。(5)治疗组和对照组的不良反应发生率分别为5.71%和11.42%。【结论】中药与艾灸联合治疗IBS-D疗效确切,能明显改善患者的临床症状,提高患者的生活质量,且无明显的不良反应。

CT引导下125Ⅰ粒子植入治疗晚期肺癌的临床研究

目的探讨分析CT引导下经皮植入125Ⅰ粒子治疗晚期肺癌的应用效果。方法：入组108例晚期肺癌患者在CT引导下植入125Ⅰ，术后1、3、6、12个月定期复查胸部cT，观察肿瘤大小变化评估疗效。结果：植入病例全部成功，术后16例达完全缓解（Complete remission，CR）,70例达到部分缓解（Partial response，PR），12例稳定（Stable disease，SD），10例为进展（Progres．sion disease，PD），总有效率达到90．7％术中出现气胸4例，其中2例术中同步抽气，术后抽净气拔出穿刺针。2例置入胸腔闭式引流管，5例少量出血，其中2例肺内渗血，2例少量胸腔淤血，1例痰中带血，经对症处理均好转。结论：CT引导下125Ⅰ粒子组织间植入治疗晚期非小细胞肺癌疗效肯定，安全性好，并发症少。

槲皮素对人骨肉瘤MG-63细胞周期及自噬流的影响

【目的】观察槲皮素对人骨肉瘤MG-63细胞体外生长周期及自噬的影响。【方法】以不同质量浓度的槲皮素作用于体外培养的MG-63细胞,流式细胞术检测MG-63细胞生长周期,荧光显微镜观察单体红色荧光蛋白(mRFP)—绿色荧光蛋白(GFP)—微管相关蛋白轻链3(LC3)双标腺病毒转染MG-63细胞后自噬小体的形成和自噬流的变化。【结果】槲皮素显著增加处于G1期的骨肉瘤MG-63细胞数量,上调MG-63细胞自噬水平。【结论】槲皮素可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,使其停滞在细胞周期G1期,并诱导细胞自噬。

miR-204靶向GPRC5A对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-204(miR-204)对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法 体外培养人正常结肠上皮细胞(FHC)和人结肠癌肿瘤细胞(HCT116);将HCT116细胞随机分为对照组、miR-204 mimic组和miR-204 NC组;利用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组HCT116细胞miR-204及G蛋白耦联受体C型家族(GPRC)5A表达情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组HCT116细胞的增殖情况;划痕实验检测各组HCT116细胞的迁移能力;Transwell法检测各组HCT116细胞的侵袭能力;Western检测各组HCT116细胞GPRC5A蛋白的表达情况;采用双荧光素酶报告实验验证miR-204与GPRC5A的靶向关系。结果 与正常组相比,各组HCT116细胞miR-204表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组和miR-204 NC组相比,miR-204 mimic组HCT116细胞miR-204表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、GPRC5A mRNA及GPRC5A蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与GPRC5A-3′UTR-WT+miR-204 NC组比较,GPRC5A-3′UTR-WT+miR-204 mimic组荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论 过表达miR-204可能靶向下调GPRC5A基因表达,抑制人结肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭行为。

阿昔替尼与索拉非尼一线治疗晚期肾癌的临床疗效

目的:比较阿昔替尼与索拉非尼一线治疗晚期肾癌的临床疗效,探讨分子靶向药物阿昔替尼能否作为一线治疗晚期肾癌的优选药物。方法:选取海口市人民医院肿瘤科60例晚期肾癌患者,以数字表法随机分为试验组和对照组,每组30例。实验组给予阿昔替尼,对照组给予索拉非尼治疗,比较两组患者的DCR、ORR、PFS、OS及不良反应的差异。结果:两组患者均能完成试验并进行结果评价。试验组和对照组的DCR分别为83.33%和80.00%、ORR分别为20.00%和20.00%,差异均无统计学意义(P>0.05);试验组和对照组的中位PFS分别为12.8个月和10.1个月,差异有统计学意义(P<0.05);中位OS分别为22.2个月和22.8个月,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者不良反应发生率相近,差异无统计学意义(P>0.05),主要表现在高血压、全身反应、手足皮肤综合征、消化道反应、肝功能损害,未见严重不良反应。结论:分子靶向药物阿昔替尼较索拉非尼一线治疗晚期肾癌更能延长患者中位PFS,两药治疗后患者的DCR、ORR、OS及不良反应相似,阿昔替尼可以作为一线治疗晚期肾癌的优选。

lncRNA-PCAT6通过调控miR-185/SIX1轴对肺癌A549细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响

目的:探讨长链非编码RNA-PCAT6(lncRNA-PCAT6)对肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)和化疗敏感性的影响,以及对微小RNA-185(miR-185)/SIX1轴的调控作用。方法:取A549细胞,分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒(PCAT6-Si)组、不含lncRNA-PCAT6-Si的空病毒载体(eGFP-Si-1)组、miR-185低表达腺病毒(miR-185-Si)组、不含miR-185-Si的空病毒载体(eGFP-Si-2)组、PCAT6-Si与miR-185-Si共转染(PCAT6-Si+miR-185-Si)组。RT-qPCR法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;Transwell法测定细胞侵袭、迁移能力;免疫荧光检测EMT标志物N-cadherin阳性表达;Western blot法测定SIX1、EMT标志蛋白E-cadherin、Vimentin及N-cadherin表达。取A549细胞系及其顺铂耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR及Western blot法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达。取A549/DDP转染PCAT6-Si与miR-185-Si,并分为A549组、A549/DDP组、PCAT6-Si组、miR-185-Si组、PCAT6-Si+miR-185-Si、eGFP-Si-1组、eGFP-Si-2组;RT-qPCR检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;CCK-8法检测各组细胞半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI);Western blot法检测SIX1、耐药相关蛋白P-gp表达;裸鼠荷瘤试验验证PCAT6对A549/DDP细胞化疗敏感性的作用。双荧光素酶试验验证PCAT6与miR-185之间的靶向关系。结果:与A549细胞相比,A549/DDP细胞IC50及RI、lncRNA-PCAT6、SIX1及P-gp表达升高(P<0.05),miR-185表达降低(P<0.05)。敲低A549细胞中lncRNA-PCAT6表达后,miR-185表达升高,SIX1蛋白表达降低,细胞侵袭、迁移能力及EMT进程降低,IC50及RI降低、肿瘤体积减小,且各指标变化差异显著(P<0.05)。敲低miR-185可逆转lncRNA-PCAT6的上述作用。双荧光素酶报告试验证实lncRNAPCAT6与miR-185之间有靶向负调控作用。结论:肺癌A549细胞中lncRNA-PCAT6低表达可靶向上调miR-185,下调SIX1,抑制EMT进程,增强对DDP化疗的敏感性。

中药双降汤结合西药治疗老年糖尿病合并高血压效果评价

目的在使用西药的基础上联合使用中药双降汤治疗112例糖尿病合并高血压的老年患者，并观察临床疗效。方法选取在2016年11月-2017年4月入住海口市人民医院中医科并将医生确诊为患有糖尿病合并高血压的112例老年病人随机自由组合为两组。对照组：本组的56例患者使用西药进行治疗。观察组：本组的56例患者使用西药的基础上联合使用中药双降汤进行治疗。经过36天的临床治疗后，对两组患者临床症状改善率及不良反应发生率进行对比。结果经比较，观察组的治疗方法患者的临床症状改善率高于时照组P〈0.05，对照组的治疗方法患者发生不良反应发生率高于观察组P〈0.05。结论在使用西药的基础上联合使用中药双降汤治疗老年糖尿病合并高血压临床效果好，不良反应发生率较低，为临床应用提供参考。

^(125)I粒子组织间植入治疗非小细胞肺癌的疗效观察

目的探讨CT引导下^(125)I粒子组织间植入治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法选取2012年9月至2014年6月间海南省海口市人民医院收治的100例晚期非小细胞肺癌患者,在CT引导下植入^(125)I,术后2个月和6个月时复查胸部CT评估疗效,观察患者术后并发症。结果植入病例全部成功,术后13例患者达完全缓解(CR),55例患者部分缓解(PR),20例患者稳定(SD),12例患者为进展(PD),总有效率达到88.0%,1年生存率为59.0%,中位无疾病进展时间为12个月。术后并发症:气胸7例,痰中带血9例,胸腔积液9例,白细胞下降4例,经对症处理均好转。结论 CT引导下^(125)I粒子组织间植入治疗晚期非小细胞肺癌疗效好,无严重并发症。

阿昔替尼联合 DC-CIK 细胞治疗晚期难治性肾癌的疗效

晚期肾癌（advanced renal cell carcinoma，aRCC）预后差，中位总生存期（OS）＜12个月，5年生存率＜10％。因此，寻找一种有效且不良反应小的疗法显得尤为重要。2015年美国国立综合癌症网络将阿昔替尼作为既往接受过一种酪氨酸激酶抑制剂或细胞因子治疗失败的进展期肾癌患者的Ⅰ类推荐，因此对于晚期难治性肾癌首选阿昔替尼治疗。

外周血造血干细胞的动员、采集和移植后造血重建

目的对13例健康供者及患者外周血造血干细胞的动员和采集效果进行分析。方法健康供者用rhG-CSF动员;患者采用强化疗加rhG-CSF或和rhGM-CSF动员,COBESpectro血细胞分离机全自动造血干细胞程序采集单个核细胞。结果13例移植中8例一次采集成功,1例(即首例)采集4次,余者采集2次。采集后的MNC6×108/kg～12×108/kg,CD3+4细胞3×106/kg～34×106/kg。移植后全部患者造血均获重建,异基因外周血造血干细胞移植一个月后DNA指纹图均提示植活。结论rhG-CSF可作为健康供者的安全有效动员剂,强化疗加rhG-CSF或/和rhGM-CSF是白血病、淋巴瘤自体外周血造血干细胞移植的有效动员方法之一。

培美曲塞联合奈达铂二线治疗晚期非小细胞肺癌临床观察

目的观察培美曲塞(Pemetrexed,PEM)联合奈达铂(Nedaplatin,NDP)方案二线治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效及不良反应。方法自2003年1月～2007年8月间,收集在我院肿瘤科经4～6个周期的一线化疗后复发或转移的晚期NSCLC患者36例,给予PEM500mg/m2,静注,第1d,NDP100mg/m2,静注,第2d;21d为1疗程,两个周期化疗后评价临床疗效及不良反应,随访一年。结果入组的36例患者均可评价疗效,其中部分缓解(PR)5例,稳定(SD)14例,进展(PD)17例,有效(RR)为13.89%,稳定率为52.78%,中位生存期为10.2个月,1年存活率36.11%。主要的不良反应是骨髓抑制,白细胞下降达Ⅲ、IV度者为10例(27.78%),血小板下降达Ⅲ、IV度者5例(13.89%),血红蛋白下降达Ⅲ、IV度者4例(11.11%),胃肠道反应如恶心、呕吐占3例(8.33%),脱发、皮疹、腹泻等发生率均较低。结论培美曲塞联合奈达铂二线治疗晚期非小细胞肺癌疗效确切,且不良反应可以耐受。

肿瘤标志物12项在肺癌患者外周血的表达

目的探讨肿瘤标志物12项在肺癌患者外周血的表达及临床意义。方法采用化学发光酶联免疫法检测124例肺癌患者、60例肺部良性病变者、60例健康体检者血清中12项肿瘤标志物的水平。结果肺癌组CA-199、NSE、CEA、CA242、Ferritin、Beta-HCG、AFP、PSA、free-PSA、CA125、HGH、CA15-3的阳性率分别是25.81%、4.84%、50.81%、15.32%、79.84%、6.45%、11.29%、4.84%、3.23%、47.58%、4.03%、12.10%,以CEA、Ferritin、CA125为主;肺癌组CEA+CA125、CEA+Ferritin、CEA+CA125+CA19-9、CEA+CA125+Ferritin、CEA+CA125+CA19-9+Ferritin、CEA+CA125+CA19-9+Ferritin+CA242的阳性率分别是67.74%、90.32%、68.55%、92.74%、92.74%、92.74%。结论CEA、CA125、CA19-9的联合检测可以为肺癌的诊断提供有价值的实验室依据。