重组嗜热β-葡萄糖苷酶转化稀有人参皂苷Rd和CK

利用高效液相色谱(HPLC)法,对重组嗜热β-葡萄糖苷酶(Fpglu1)转化稀有人参皂苷(Rd和CK)进行研究,并表征了其催化动力学参数.利用同源模建和分子动力学模拟等生物信息学技术,探究了Fpglu1转化人参皂苷的结构基础及其相互作用.结果表明,Fpglu1能够水解人参总皂苷生成稀有皂苷Rd和CK,其催化人参皂苷Rb_1,Rb_2和Rc的K_m值分别为0.318,1.840和5.269 mmol/L;酶的转换数(k_(cat))值分别为144.191,0.572和0.011 s^(-1).当转化时间分别为6和102 h时,Rd和CK的产率达到最大,分别为60%和93%.通过对该酶的结构预测及皂苷分子的对接研究发现,底物位于由疏水性氨基酸构成的底物口袋中,氨基酸残基Glu194和Glu367是参与催化作用的关键,且实验测得的酶促反应动力学参数(K_m)与对接的相互作用能量值存在线性关系.

超大跨径活性粉末混凝土拱桥试设计研究

进行了600 m跨径的高强混凝土(HSC)拱桥和活性粉末混凝土(RPC)拱桥的试设计,利用MIDAS软件建立空间有限元模型进行内力计算,依据公路圬工桥涵设计规范(JTG D61—2005)对RPC拱桥进行强度与稳定的验算。从拱圈截面刚度、内力与稳定和工程数量等方面,对这两种拱桥的受力性能和施工性能进行比较,分析RPC在超大跨径混凝土拱桥上应用的可行性,为我国拱桥向超大跨径发展提供参考。

基于RFID技术的X光机安检图像识别绑定分流方法

当前物流包裹在寄递托运安检过程中存在两方面的问题:一是因物流繁忙导致包裹内危险品不能完全被检查出来,二是X光机包裹图像没有绑定单号导致相关收发等信息追溯困难。提出了利用RFID技术实现包裹电子单号与X光机安检图像的自动绑定的必要性和实现方案。该方案还将包裹信息和相关X光机图像进行同步显示、同步存储,从而不仅提高安检现场查验的效果,方便了与包裹相关人员联系,而且给X光机图像的重复分析、远程分析、事后分析、责任追究等提供了数据保障。最后,对X光机包裹图像绑定电子单号条件下的分流效果进行了测试和分析。

预应力碳纤维板在准连续T梁加固中的设计应用

对预应力碳纤维板加固进行简要介绍,以某预应力混凝土准连续T梁桥加固为例,对原结构进行详细的验算,分析病害产生原因,通过加固方案比选,确定预应力碳板加固措施,并介绍预应力碳板加固设计中碳纤维板尺寸选择、张拉控制应力、预应力损失等关键技术,最后对加固前后效果进行比较。实践结果表明:采用预应力碳板加能够显著改善梁体应力分布及提高抗弯承载能力,达到理想的加固效果。

兔急性肺损伤中胸腔热灌注对C反应蛋白的影响

目的观察胸腔热灌注(IHP)对兔急性肺损伤(ALI)中C反应蛋白(CRP)的影响。方法选取新西兰大白兔31只,随机分为假撞击组(A)、胸部撞击组(B)、撞击+35度灌洗组(C)和撞击+43度热灌注组(D),垂直撞击右侧胸部,造成ALI,行IHP观察CRP的影响。结果IHP后6和12小时,4组CRP分别是A组(0.97±0.16和0.91±0.13),B组(15.42±0.29和2.73±0.19),C组(14.53±0.21和9.34±0.17),D组(11.72±0.19和11.35±0.24)。D组CRP与B组比较,差异有统计学意义(P<0.01),与C组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对胸部撞击致兔ALI,IHP的CRP明显降低,减轻了炎症反应,为IHP对ALI的治疗提供理论依据。

人参皂苷的口服吸收及体内转化

人参中的活性成分人参皂苷具有较好的生物活性和药理作用,疗效确切,毒副作用小,应用广泛,然而其易被胃酸分解、肠内菌群代谢,且肠黏膜通透性差,导致其口服生物利用度极低。本文对人参皂苷的口服给药药代动力学特点及体内生物转化作用进行了概述,并对其未来研究方向进行了展望,为今后的研究提供新的思路。

嗜热β-葡萄糖苷酶的原核表达、纯化及其活性

目的原核表达、纯化嗜热β-葡萄糖苷酶,并检测其活性。方法从嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans基因组DNA中PCR扩增β-葡萄糖苷酶基因,插入原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)Codon Plus,筛选阳性重组菌,IPTG诱导表达。采用镍柱亲和层析法纯化重组酶;紫外吸收法检测酶活力和底物选择性。结果 PCR退火温度为67℃时,可扩增得到单一的目的基因条带;测序结果显示,重组表达质粒中目的基因的核苷酸序列与细菌基因组中该基因序列同源性为100%,未发现终止密码子及氨基酸的改变;表达的重组酶相对分子质量约为54 000;纯化的目的蛋白纯度达95%,浓度为10 mg/L;该重组酶能够高效催化对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(p NPG)的水解,60℃条件下的比活力达124 293.5 U/mg。结论成功在E.coli中表达了嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans来源的具有较高催化活力和底物专一性的β-葡萄糖苷酶。