苹果树腐烂病菌多聚半乳糖醛酸酶基因Vmpg7和Vmpg8的功能

【目的】前期转录组分析表明苹果树腐烂病菌(Valsa mali)两个多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因Vmpg7和Vmpg8在病菌侵染定殖过程中显著上调表达。论文旨在分析Vmpg7和Vmpg8在病菌营养生长、致病力、果胶酶活性、对果胶的利用等方面的作用及基因双敲除对同家族内其他基因表达水平的影响,明确Vmpg7和Vmpg8在病菌致病过程中的生物学功能,为进一步解析苹果树腐烂病菌致病分子机理提供基础。【方法】通过q RT-PCR检测基因在病菌侵染过程中的表达水平及基因双敲除后PG家族内其他PG基因的表达量;利用double-joint PCR构建基因敲除载体并通过PEG介导的原生质体转化技术进行基因敲除,经4对引物PCR检测及Southern blot验证获得基因单敲除和双敲除突变体,并利用gap-repair技术对基因进行回复;利用PDA培养基常规培养法观察突变体营养生长状况;通过离体接种富士苹果叶片及枝条的方法检测基因缺失对病菌致病力的影响;通过3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法检测各突变体胞外果胶酶活性;利用Czapek培养基培养法分析突变体对果胶的利用情况。【结果】q RT-PCR分析表明,Vmpg7和Vmpg8在病菌侵染3 d后分别上调表达27.73和8.19倍。通过基因敲除技术,分别获得3个Vmpg7基因单敲除突变体、1个Vmpg8基因单敲除突变体和3个Vmpg7/Vmpg8基因双敲除突变体,并获得了Vmpg7和Vmpg8单敲除突变体的回复突变体。将突变体接种到PDA培养基上,菌落形态和生长速率均没有发生变化;接种到苹果叶片和枝条上,Vmpg7单敲除突变体及Vmpg7/Vmpg8双敲除突变体在叶片和枝条上的致病力显著降低,而Vmpg8单敲除突变体在叶片上的致病力显著降低;进一步对果胶酶活性及对果胶的利用分析,发现Vmpg8单敲除突变体及Vmpg7/Vmpg8双敲除突变体胞外果胶酶活性均显著降低,且所有突变体在果胶培养基上生长均明显减慢。此外,基因回复后突变体的致病力、果胶酶活性及在果胶上的生长速率均回复到野生型菌株03-8水平。重要的是,Vmpg7/Vmpg8双敲除后影响了PG家族中其他PG基因的表达水平,3个基因显著上调表达。【结论】多聚半乳糖醛酸酶基因Vmpg7和Vmpg8可能与同家族内其他基因协同作用,通过调节果胶酶活性参与苹果树腐烂病菌致病过程。

苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因Vmpl4的致病功能研究

【目的】通过研究苹果树腐烂病菌果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Vmpl4敲除突变体的致病力、对果胶的利用和基因敲除后家族内其他基因的表达水平变化,探明Vmpl4在致病过程中的作用。【方法】采用q RT-PCR技术检测Vmpl4在野生菌株03-8与寄主互作过程中的表达水平及Vmpl4敲除后PL家族内其他基因的表达水平,通过Doublejoint PCR构建基因敲除载体,并通过PEG介导原生质体遗传转化获取转化子、PCR及Southern blot验证基因敲除突变体。利用苹果叶片和枝条离体接种方法检测突变体致病力;接种至PDA及果胶培养基,观察突变体的营养生长和对果胶的利用情况。【结果】Vmpl4在病菌侵染过程中上调表达高达10.20倍;通过验证得到1个基因敲除突变体,其在叶片和枝条上的致病力均显著降低,在果胶培养基上生长速率也明显降低,Vmpl4敲除后家族内4个基因在病菌侵染过程中表达水平显著上调。【结论】果胶裂解酶基因Vmpl4通过降解果胶参与致病过程,PL家族内其他基因与Vmpl4在病菌致病性方面共同发挥作用。

53例抑郁症患者护理体会

抑郁症是精神科常见的一种情感性疾病，患者住院期间因情绪问题导致的自杀、自伤行为是精神科护理工作的重点之一。因而掌握患者在不同病程阶段的心理活动，适时进行护理干预，对避免或杜绝意外事件的发生具有重要意义。本文对抑郁症患者住院期间不同时期的护理体会进行了总结，以期为抑郁症的护理干预提供依据。

铜死亡相关lncRNA预测三阴性乳腺癌患者预后及与肿瘤免疫微环境的关系

目的 明确铜死亡相关长链非编码RNA(lncRNA)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的预后价值及与肿瘤免疫微环境的关系。方法 收集肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中收录的TNBC患者临床信息和转录组测序数据,利用共表达分析筛选铜死亡相关lncRNA,通过Cox回归分析构建预后模型。基于所构建的预后模型,将TNBC患者分为不同风险分组,利用功能富集、免疫浸润分析,评估不同分组患者的肿瘤免疫微环境状态。结果 TCGA中筛选到TNBC铜死亡相关lncRNA 111个,Cox回归分析建立由MELTF-AS1、APTR、DHRS4-AS1、LINC02188和URB1-AS1等5个铜死亡相关lncRNA组成的TNBC预后模型。低风险组患者生存时间明显长于高风险组(P<0.05)。高风险组患者肿瘤组织中免疫抑制性细胞浸润增加。结论 基于铜死亡相关lncRNA所建立的预后模型可有效预测TNBC患者预后及评估肿瘤免疫微环境。

女性精神分裂症患者配偶的心理调查及对策

目的:探讨女性精神分裂症患者配偶的心理健康状况,对所存在的问题进行心理干预。方法:采取症状自评量表(SCL-90)对48名女性精神分裂症患者配偶进行心理健康调查。结果:女性精神分裂症配偶的心理健康状况,与国内常模比较,9个因子除偏执因子分外,其余8个因子差异显著(P<0.01)。结论:女性精神分裂症患者配偶存在心理问题,应对其进行心理干预及帮助。使他们的生活质量加以改进。

大剂量MTX治疗骨肉瘤毒副反应的预防及护理

骨肉瘤系最常见的原发性恶性骨肿瘤，临床上以青少年多发，单纯手术治疗5年生存率仅为20％左右，预后较差。目前，采用新辅助化疗配合手术治疗，使骨肉瘤5年生存率提高到55％～80％，以高浓度甲氨蝶呤（HD-MTX）、异环磷酰胺（IFO）、阿霉素（Adr）、卡铂（Carboplatin）等多药物联合化疗是国际上标准的化疗方案，其中MTX用量可达8～12g／m^2，

脊柱转移瘤围手术期的护理

脊柱转移瘤是临床上较为常见的一类恶性肿瘤，约占所有骨转移瘤的20％，有5％～14％的转移瘤患者出现脊髓压迫症状。最常见的症状有：疼痛、神经刺激症状、压迫症状，部分患者全瘫或不全瘫。手术治疗脊柱转移瘤，可使病人的疼痛显著缓解，脊柱功能不同程度得到恢复，

矿区植物与丛枝菌根真菌共生效应

采用野外调查与室内分析相结合的方法,对邯郸武安煤矿区植物进行了菌根共生效应的研究,分析了20个科41种主要植物根系与丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizae Fungi,AMF)的共生状况,筛选出该地区建群的优势植物,并探讨了不同科、植被间侵染率、侵染强度、孢子密度的关系。结果表明:18个科35种植物都能与丛枝菌根真菌形成共生关系,在不同科中,萝藦科、豆科、马鞭草科植物的侵染率较高;从植物种类上看,侵染率最高的是杠柳,其次是紫穗槐和牡荆,分别高达92.33%、85.30%和70.78%,不同植被类型中,乔木、灌木、草本类植被的菌根侵染率差异显著,从侵染强度上分析,不同植物间存在差异,但不显著;侵染率和孢子密度的关系因植物不同而异,二者没有严格的对应关系。

厦门地区高尔夫球场草种选择与绿化布局的初步探讨

本文就厦门地区高尔夫球场草种选择和绿化问题作了初步探讨。作者认为,厦门地区的自然条件适合暖地型草种的生长,草种应以狗牙根(Cynodon spp.)和结缕草(Zoysia spp.)为主。绿化设计应体现南亚热带滨海风光的植被景观,树种配置以亚热带植物为主,并与引种的树种相结合,注意绿化效果和球场功能的协调统一,做到绿化布局合理,以绿化效果衬托球场草坪的美观。

邯郸市常绿阔叶树种资源的调查与应用

为探索各常绿树种经历突然降温后的生长状况和景观效果,为邯郸及周边城市园林绿化树种的选择与应用提供理论依据,对邯郸市常绿阔叶树种的种类、出现频度、生长状况、冻害程度、景观效果等进行了实地调查。结果表明,邯郸园林绿化中应用的常绿阔叶树种有近30种,主要涉及蔷薇科、卫矛科、木犀科、忍冬科、禾本科等15个科。针对邯郸市常绿阔叶树种的引种、栽培与利用等方面存在的问题提出相应的发展对策。

Ⅳ期年轻乳腺黏液腺癌患者MDT诊治报道一例

本文介绍1例Ⅳ期年轻乳腺黏液腺癌的多学科联合诊治过程。该病例初诊时为保乳术后肝转移,经多学科多次讨论患者先后接受化疗、射频消融、卵巢功能抑制联合内分泌治疗、手术去势和放疗等治疗手段,生存期达到43个月。该病例的诊治过程说明,依据肿瘤特征及不同阶段演变过程,在多学科专家组讨论及指导下合理进行治疗,可延长患者生存时间。

HER2阳性乳腺癌的靶向治疗及其耐药机制

人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)在约25%~30%的乳腺癌患者中过表达或扩增,同其他类型乳腺癌比较,HER2阳性乳腺癌具有较差的无瘤生存期和总生存期。目前大量抗HER2分子靶向治疗药物问世,如曲妥珠单抗,极大改善HER2阳性乳腺癌患者的治疗策略和预后,并在早期、新辅助和晚期转移性乳腺癌中发挥着重要作用。然而曲妥珠单抗的治疗中,约66%~88%的晚期患者在用药1年内产生耐药,耐药的存在严重制约其临床应用。HER2结合位点的异常(p95HER2、Δ16HER2和MUC4),磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)信号通路的异常活化、药物压力作用下代偿性生存信号的激活、HER家族成员间的相互作用、与雌激素受体的交互作用和免疫反应等均可能是曲妥珠单抗耐药的重要机制。为应对曲妥珠单抗耐药,其他抗HER2靶点的治疗药物,如帕妥珠单抗、小分子酪氨酸激酶抑制剂和曲妥珠单抗-美坦辛偶联物(Ado-trastuzumab emtansine,T-DM1)被研发出来,在治疗中起着重要作用。深入研究抗HER2治疗的耐药机制,了解潜在的耐药机制,有利于探索克服耐药的治疗策略。

50例慢性精神分裂症阴性症状患者的药物心理行为治疗

对1990年至1994年间,长期住院的50例慢性精神分裂症阴性症状患者,采取小剂量抗精神病药物及心理认知、行为矫正的康复治疗,取得良好的疗效,有效率达80％以上,使一部分病人出院复归社会,有利于社会及家庭。

慢性精神病康复期行为治疗的探讨

目的：分析精神病康复期行为治疗效果；方法：采用自制不良行为观察量表（依据ＢＯＳ行为观察量表制定），对１００例慢性精神病康复期不良行为进行观察，系统的行为治疗；结果：通过两组对照观察，疗效有显著差异；结论：由此充分说明对慢性精神病康复期不良行为的治疗，防止了慢性精神病的精神衰退，有利于疾病的康复痊愈，有利于精神病人的回归社会。

100例女性精神病人配偶的心理状态

近年来在精神科临床工作中,观察到女性精神病人配偶的心理状态及家庭环境直接影响精神病人的康复及回归社会。为了更有效地开展精神病人的康复治疗,本文对女性精神病人配偶的心理状态进行了调查分析。