桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞增殖的影响

目的观察桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞增殖的影响,为其在食品添加及药品开发中的应用提供依据。方法胰酶消化法收集正常妊娠6～8周人绒毛膜细胞,随机分为桉叶油组和对照组,其中桉叶油组分别加入桉叶油使终质量浓度分别为0.75、0.15、0.015、0.001 5 mg/mL;对照组加入70%乙醇10μL/mL。采用台盼蓝染色,细胞计数法绘制细胞生长曲线;桉叶油处理后12、24、36 h以MTT法测定细胞增殖抑制率,12、24 h时同时以流式细胞仪测定细胞周期和凋亡情况。结果①随培养时间延长,两组人绒毛膜细胞数量均逐渐减少,其中0.75mg/mL桉叶油组人绒毛膜细胞生长明显受抑,与对照组相比有显著差异;其余桉叶油各组绒毛膜细胞生长情况与对照组相比无显著差异。②0.75 mg/mL桉叶油组人绒毛膜细胞增殖抑制率显著高于对照组(P<0.05),其余桉叶油各组人绒毛膜细胞增殖抑制率与对照组相比无显著差异。③桉叶油作用12 h后,0.75 mg/mL桉叶油组G0～G1期细胞减少、S期细胞增多、G2～M期细胞减少、凋亡率明显增高,与对照组相比,P<0.05;与对照组相比,其余桉叶油各组G0～G1期、G2～M期细胞比例有显著差异(P<0.05),S期细胞比例及凋亡率无显著差异。桉叶油作用24 h后,与对照组相比,0.75 mg/mL桉叶油组G0～G1期细胞比例减少、S期细胞比例减少、G2～M期细胞比例增多、凋亡率升高(P<0.05);其余桉叶油各组S期细胞比例均显著升高(P<0.05),G2～M期细胞比例及凋亡率均无明显变化。结论质量浓度≤0.15 mg/mL的桉叶油对人绒毛膜细胞无明显生长抑制、细胞毒性及诱导凋亡的作用,但可影响细胞周期,且此影响可能随作用时间不同而异;此为桉叶油在食品添加及药物开发中的应用提供了实验依据。

桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞生长及分泌功能的影响

目的：探讨桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞生长及分泌功能的影响。方法胰酶消化法收集正常妊娠6∽8周人绒毛膜细胞，分别用0.75、0.15、0.015、0.0015g·L-1的桉叶油作用12h、24h、48h，倒置显微镜观察细胞形态变化，活细胞计数测定细胞的生长曲线，MTT法检测桉叶油对细胞的抑制率，化学发光法检测细胞培养上清液中的雌激素、孕激素和绒毛膜促性腺激素的浓度。结果与对照组比较,质量浓度≥0.75g·L-1的桉叶油对绒毛膜细胞生长有明显的抑制作用（P〈0.05）；质量浓度≤0.15g/L的桉叶油对绒毛膜细胞生长的抑制率与对照组比较无明显差异（P＞0.05）。桉叶油作用绒毛膜细胞24h 时，0.75g/L桉叶油组细胞上清液中雌二醇、孕激素浓度均较对照组显著降低（P〈0.05），其余各组细胞上清液中雌二醇、孕激素浓度均与对照组比较无差异。桉叶油作用绒毛膜细胞24h时，桉叶油各组细胞上清液中绒毛膜促性腺激素浓度较对照组显著增高（P〈0.05）。结论质量浓度≥0.75g/L桉叶油对人绒毛膜细胞生长有抑制作用，质量浓度≤0.15g/L桉叶油对人绒毛膜细胞生长无抑制作用。桉叶油对体外培养的绒毛膜细胞分泌雌二醇、孕激素无明显影响，但可刺激绒毛膜细胞分泌HCG。

带鱼肠道中芽孢杆菌的分离鉴定及其发酵液抗菌性质研究

从带鱼肠道中分离筛选到1株具有广谱抗菌活性的菌株JFL15,其发酵液对嗜水气单胞菌、美人鱼发光杆菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、大肠杆菌、迟钝爱德华氏菌、铜绿假单胞菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、查氏弧菌均有较强抑菌作用。通过形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列分析以及系统发育进化分析,菌株JFL15与暹罗芽孢杆菌的同源性最高,达98.05%,初步鉴定为暹罗芽孢杆菌。对暹罗芽孢杆菌JFL15的发酵液进行研究发现,暹罗芽孢杆菌JFL15的发酵液对酶、温度、酸碱度和紫外线均不敏感,且发酵产物储存较长时间后仍具有较强抑菌活性。

芽孢杆菌P6产抗菌脂肽条件优化及发酵液性质研究

目的:提高芽孢杆菌P6发酵产抗菌脂肽的水平,探究其应用潜力。方法:考察时间、温度、培养基起始pH、转速、接种量、装液量这6个因素对供试菌株产抑菌活性物质的影响,考察发酵液的温度、紫外照射、酸碱稳定性。结果:菌株P6生产抗菌脂肽的最佳发酵条件为:温度30℃,培养基初始pH天然,装液量100 mL/250mL,接种量1%,转速130 r/min,发酵时间60 h。发酵上清液能够耐100℃高温,pH耐受范围3～9,紫外照射3 h后活性仍保持50%以上。抑菌谱试验结果表明,发酵液对15种水产致病菌均有抑菌活力。结论:优化后抑菌圈直径比优化前提高了54%,且菌株P6产生的抗菌物质具有良好的稳定性和广谱性,有很大的应用潜力。

罗伊氏乳杆菌果聚糖蔗糖酶基因的克隆与表达

以罗伊氏乳杆菌基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆获得果聚糖蔗糖酶基因lev。生物信息学分析表明:该基因全长1 776 bp,编码一个含591个氨基酸残基的多肽。该多肽的预测分子质量为65.47 ku,等电点为4.74,二级结构主要有α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成。克隆所得的lev基因与Gen Bank注册的罗伊氏乳杆菌lev基因(注册号:EF534264.1)的核苷酸序列同源性为97.97%。本研究所得lev基因经构建表达载体在大肠杆菌BL21中表达,重组酶具有果聚糖蔗糖酶的活性。