1例罕见α-地中海贫血产前诊断与家系分子遗传学分析

目的 对1例疑似携带罕见地中海贫血(简称地贫)的产前诊断胎儿进一步测序分析,对先证者进行家系分子遗传学分析。方法 运用血常规和血红蛋白电泳进行地贫筛查,采用gap-PCR法和PCR-RDB法检测24种地贫突变,对疑似罕见地贫进行基因测序分析。结果 先证者为--~(SEA)地贫与α2基因IVS-Ⅱ-119地贫双重杂合子,其IVS-Ⅱ-119地贫基因遗传自母方,--~(SEA)地贫基因遗传自父方。结论 --~(SEA)/α~(IVS-Ⅱ-119)α HbH地贫患儿的诊断,为罕见地贫的遗传咨询和产前诊断提供科学理论依据。

基于胎儿游离DNA的地中海贫血无创产前诊断的研究进展

重型地中海贫血(地贫)目前尚无有效治疗措施,通过产前诊断阻止重型患儿出生是国内外公认的首选预防措施。目前,地贫的产前诊断仍依赖于有创的方法,即绒毛活检、羊水穿刺和脐静脉血穿刺,存在一定的宫内感染和流产风险,安全、无创、快速和准确的地贫产前诊断方法对高发区意义重大。孕妇外周血胎儿游离DNA(cffDNA)的发现,下一代测序(NGS)的快速发展与应用,使无创产前DNA检测(NIPT)成为现实。目前,利用cffDNA检测胎儿13、18和21号染色体非整倍体的NIPT技术已经成熟应用于临床,但地贫的NIPT仍处于研究探索阶段。文章主要基于cffDNA和NGS的地贫NIPT研究进展进行综述。

mir⁃3168靶向抑制TP53促进AGS与AGS/DDP胃癌细胞恶性转化与顺铂耐药

目的:探讨mir‑3168对AGS与AGS/DDP胃癌细胞恶性转化与顺铂耐药影响,并验证其靶基因。方法:qPCR检测胃癌顺铂敏感细胞AGS与胃癌顺铂耐药细胞AGS/DDP细胞中mir‑3168表达,合成mir‑3168 mimic、inhibitor与阴性对照,分别转染AGS与AGS/DDP胃癌细胞,qPCR检测mir‑3168与TP53 mRNA表达,梯度浓度顺铂处理与非处理下采用CCK8检测细胞活力,流式检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,Western blot检测TP53蛋白表达,数据库预测mir‑3168与TP53结合位点,根据结合位点采用双荧光素酶实验验证mir‑3168与TP53结合。结果:相对胃癌顺铂敏感细胞AGS,mir‑3168在胃癌顺铂耐药细胞AGS/DDP细胞中的表达水平明显提高;mir‑3168 mimic促进AGS与AGS/DDP胃癌细胞顺铂抵抗、增殖与侵袭,抑制AGS与AGS/DDP胃癌细胞凋亡;mir‑3168 inhibitor抑制AGS与AGS/DDP胃癌细胞顺铂抵抗、增殖与侵袭,促进AGS与AGS/DDP胃癌细胞凋亡;mir‑3168 mimic抑制TP53 mRNA与蛋白表达,mir‑3168 inhibitor促进TP53 mRNA与蛋白表达;Targetscan数据库预测mir‑3168与TP53存在结合点,双荧光素酶实验提示mir‑3168与TP53结合,且通过预测的结合位点结合。结论:mir‑3168可能通过靶向抑制TP53促进AGS与AGS/DDP胃癌细胞恶性转化与顺铂耐药。

1例罕见的血液学表型与基因型分型不一致的HbE/β-地贫患者

血红蛋白E合并β-珠蛋白生成障碍性贫血(简称HbE/β-地贫)是一种复合杂合子病,由β-珠蛋白生成障碍性贫血和异常血红蛋白病合并发生,其病理生理特征是成人血红蛋白中β-珠蛋白链生成减少,导致α/β-珠蛋白链失衡、活性氧的产生和红细胞过早死亡和(或)无效红细胞生成[1-3]。HbE/β-地贫在我国及其他国家患病的人数逐渐增多,具有较高的发病率和病死率。本研究发现了1例临床表现为轻型HbE/β-地贫但基因型提示为重型HbE/β-地贫患者,因症状不明显而未予重视,最终丧失生命。因此临床医生在筛查珠蛋白生成障碍性贫血时要注重表型轻度的珠蛋白生成障碍性贫血的危险性。

移动实验室新型冠状病毒核酸应急检测的规范探索

特定区域的新型冠状病毒(简称新冠病毒)核酸筛查是新型冠状病毒感染防控的重要手段。笔者在国家标准化指导性技术文件和地方技术性规范的基础上,通过广西壮族自治区百色市、防城港市、钦州市等多地移动实验室新冠病毒核酸应急大筛查实践过程中积累的经验,从移动实验室使用和管理的关键核心问题提出了相应的解决思路和方案,为移动实验室在新冠病毒核酸应急大筛查中的快速搭建及检测提供参考。

桂西地区869例慢性乙型肝炎病毒基因分型与耐药突变分析

目的乙型肝炎病毒(HBV)基因型及耐药突变情况与疾病进展和药物疗效密切相关,有效开展其测定具有重要意义。文中旨在检测桂西地区869例HBV的基因型及耐药突变基因,为临床抗HBV治疗提供依据。方法收集2016年1月至2018年3月右江民族医学院附属医院感染性疾病科门诊及住院的来自桂西地区且HBV DNA>1.0×103IU/mL的869例慢性乙型肝炎病毒携带(CHB)患者。采用PCR和反向点杂交法技术检测其HBV基因分型与耐药突变情况。结果共检出7种基因分型,分别为B基因型304例(34.98%),C基因型268例(30.84%),D基因型147例(16.92%)及B+C基因型、B+D基因型、C+D基因型、B+C+D基因型。63例患者发生耐药突变,耐药突变率为7.25%,其中C基因型31例(49.21%),B基因型19例(30.16%);突变模式有rt204I、rt181V、rt236T、rt180M+rt204V+rt204I等14种,其中rt180M+rt204V突变频率最高(17.46%)。B、C基因型的总体突变率(19%、31%)差异有统计学意义(P<0.05)。结论桂西地区CHB患者HBV基因型多样,主要以B、C基因型为主,且耐药突变率较高,突变模式复杂,这一结果为桂西地区临床抗HBV治疗提供了依据。

抗乙肝病毒基因治疗研究新进展

乙肝病毒（Hepatitis B Virus,HBV）感染呈世界性分布,是一种以引起宿主肝细胞炎性和损坏病变为主要特征的传染性疾病。全球约有2.4亿慢性乙肝病毒携带者（chronic hepatitis B,CHB）,每年由HBV感染引起肝硬化、肝癌等严重病变而致患者死亡近70万人,已成为目前全球性健康问题。

HBV C编码链抗HBV潜在药物靶标的设计、筛选及鉴定

目的针对HBV C编码链设计合成反基因锁核酸(locked nucleic acid,LNA)片段,以HepG2.2.15细胞为研究对象,筛选并鉴定出能特异性阻断HBV复制和表达的有效治疗靶点药物。方法利用RNAstructure 5.0软件针对HBV C区编码链1914~1928 nt、1969~1983 nt、2002~2016 nt、2053~2067 nt、2069~2073 nt、2162~2176 nt和2404~2418 nt位点设计合成7条反基因LNA片段(分别以SQ1~SQ7表示),以阳离子脂质体lipofectamine 3000(lipo3000)介导转染HepG2.2.15细胞,隔3天对应给药,连续给药3次,分别于给药后第3、6、9天收集培养上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBeAg水平;实时荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)测定HBV-DNA浓度。结果针对HBV C区编码链2162~2176 nt(SQ6)和2404~2418 nt(SQ7)位点的反基因LNA片段对HBV-DNA复制和HBeAg表达的抑制效果最明显,用药后第3、6、9天,SQ6对HBeAg的平均抑制率分别为43.91%、59.95%和59.07%,HBV-DNA则分别为42.91%、50.09%和51.14%;SQ7对HBeAg的平均抑制率分别为44.18%、60.81%和60.02%,HBV-DNA则分别为47.28%、54.16%和52.22%。结论针对HBV C区编码链2162~2176 nt和2404~2418 nt位点的反基因LNA片段体外能有效抑制HBV的复制和表达,为抗HBV治疗提供一定的理论依据和实验依据。

多重耐药菌医院感染监测及耐药性分析

目的研究多重耐药菌(MDRO)株的分布及耐药情况。方法对2008年1月至2010年12月监测到的全院多重耐药菌感染病例进行分析,针对易感因素制定多重耐药菌感染管理制度和预防控制措施并监督实施,同时追踪分析其易感因素。结果临床送检16 071例标本中,培养阳性6 007例,其中检出MDRO株1 365株,检出率8.49%;主要多重耐药菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和溶血葡萄球菌5种细菌。肠杆菌科细菌中,以大肠埃希菌为主,对亚胺培南的耐药率为2.0%,而对氨苄西林的耐药率达96.5%,其次为肺炎克雷伯菌,对氨苄西林的耐药率达98.2%。结论 MDRO是目前医院感染的常见病原菌,细菌的耐药现象较严重,应尽量根据细菌药敏试验结果指导临床用药。

慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群的表达及意义

慢性乙型肝炎(CHB)可发展为肝硬化,肝衰竭以及肝细胞癌等。机体在感染乙型肝炎病毒(HBV)后,通过诱发机体的免疫反应间接损伤肝细胞,病毒的控制和清除有赖于机体的免疫系统,因此疾病发生、发展与宿主的细胞免疫功能状态密切相关〔1〕。桂西地区是乙型肝炎的高发地区,对其进行相应的研究具有重要的意义。为此,本文检测该地区105例CHB患者T细胞亚群的表达规律,

体外循环心脏瓣膜置换术对风湿性心脏病患者T淋巴细胞主要免疫表型的影响

目的观察风湿性心脏病(RHD)患者在体外循环(ECC)心脏瓣膜置换术前、后细胞免疫功能的变化。方法用流式细胞仪检测28例ECC瓣膜置换术RHD患者(RHD组,其中单瓣组15例,双瓣组13例)和20例非体外循环冠状动脉搭桥术患者(对照组)术前、术毕及术后第1、3、5、8天外周血CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+T细胞、NK细胞(CD3-/CD16+56+)、CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞的水平。结果 RHD组患者与术前比较,术后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞计数明显降低(P<0.05),CD8+、CD3+CD4-CD8-计数明显升高(P<0.05)。双瓣组的上述指标波动明显大于单瓣组。与对照组比较,术后RHD组患者的CD3+、CD4+和CD4+/CD8+T细胞计数明显下降(P<0.05),而CD8+和CD3+CD4-CD8-计数明显升高(P<0.05)。对照组NK细胞在术前、术后无明显变化(P>0.05)。结论 ECC瓣膜置换术可使RHD患者的细胞免疫功能受到明显的抑制。

大肠癌患者血清IL-8水平检测及其临床意义

目的探讨大肠癌患者血清白细胞介素-8(IL-8)水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测80例大肠癌患者术前、术后血清IL-8水平,并以50例健康者作为对照组。结果大肠癌患者术前、术后血清IL-8水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);术前大肠癌患者血清IL-8水平高于术后,差异有统计学意义(P<0.05);随着Duke′s分期的深入,大肠癌患者血清IL-8水平也逐步升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清IL-8水平与大肠癌的发生、发展及预后有关联,与Duke′s分期显著相关,可作为大肠癌术后随访观察及判断预后的指标之一。

日立7060与7600-020生化分析仪检测酶类项目的一致性分析

目的探讨日立7060与日立7600-020全自动生化分析仪检测结果的一致性。方法日立7060生化分析仪和日立7600-020生化分析仪,校准品、朗道人基质常规质控血清组成检测系统,分别用这两台全自动生化分析仪测定40例患者的8项酶类生化指标,计算实验方法和比较方法之间的系统误差,判断两台生化仪测定结果的可比性。结果两台日立生化分析仪的检测结果相关系数均大于0.975,相对偏差SE%<1/2CLIA′88,检测结果差异无统计学意义。结论日立7060与7600-020全自动生化分析的检测结果具有良好的可比性。

血清长链非编码RNA CRNDE在鼻咽癌中的表达及临床应用价值

目的探讨血清长链非编码RNA(long non coding RNA,LncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(colon rectal neoplasia differentially expressed,CRNDE)在鼻咽癌患者血清及组织中的表达水平及其临床应用价值。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测鼻咽癌患者(n=78)和健康人群(n=78)血清和组织中CRNDE的表达水平,并分析CRNDE与鼻咽癌患者临床病理参数的相关性;采用CCK8增殖试验检测鼻咽癌细胞系CNE-2Z(WT)和CNE-2Z(Cas9-CRNDE)的细胞增殖能力的差异。ROC曲线分析CRNDE在早期鼻咽癌患者筛查中的临床应用价值。结果鼻咽癌患者血清CRNDE的表达水平明显高于健康人群(5.27±0.89 vs 1.01±0.12,P<0.001);且CRNDE表达与T分期、N分期、TNM分期、淋巴结转移、侵犯颈动脉鞘、侵犯颅底相关(P均<0.05);鼻咽癌患者癌组织中CRNDE的表达水平亦明显高于癌旁组织(4.56±0.38 vs 1.82±0.21,P<0.05);经CRNDE敲除后,与阴性对照组细胞相比,鼻咽癌系细胞的增殖速率明显降低(2.42±0.13 vs 5.81±0.48,P<0.05);血清CRNDE筛查鼻咽癌的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.835(95%CI:0.598~0.984),当cut-off值为11.25时,敏感性和特异性分别为93.1%、81.7%。结论鼻咽癌患者血清和组织中CRNDE的表达明显升高,有助于鼻咽癌早期筛查及病情评估。

尿沉渣细菌定量计数与尿液细菌培养筛查泌尿系统感染的对比分析

目的探讨尿沉渣细菌定量计数能否作为泌尿系统感染的一项快速筛查指标。方法以UF-1000i型全自动尿沉渣定量分析仪和尿液细菌培养对350例尿液标本分别进行检测并比较。结果 350例尿液标本中,尿沉渣细菌计数阳性43例,阳性率为12.29%,阴性307例,阴性率为87.71%;尿液细菌培养,阳性41例,阳性率为11.71%,阴性309例,阴性率为88.29%。两组结果比较无显著性差异(P>0.05)。尿沉渣细菌定量计数对泌尿系统感染的阳性预测值为51.2%,阴性预测值为92.9%。结论尿沉渣细菌定量计数可作为泌尿系统感染的一项快速筛查指标,尤其对细菌培养阴性结果的预见性较高,但仍然不可替代定量细菌培养。

临床生物化学和生物化学检验在教学中实施设计性、开放性、综合性实验课的重要性

临床生物化学和生物化学检验是医学检验专业的一门理论性和实践性都很强的重要专业学科。临床生物化学实验课是生物化学教学过程中的重要环节，它在培养学生的综合能力和提高综合素质上具有不可替代的作用。但是，传统的临床生化实验课教学内容是以验证性、简单性、重复性实验为主，主要为课堂传承知识服务，

依那普利与丹参酮联合治疗肺心病急性加重期临床疗效观察

目的探讨依那普利与丹参酮联合治疗慢性肺源性心脏病(肺心病)急性加重期的临床疗效。方法选择200例肺心病急性加重期患者,随机分成四组,每组50例,对照组给予常规基础治疗,依那普利组、丹参酮组和依那普利-丹参酮联合组分别在常规治疗基础上加用依那普利、丹参酮和依那普利-丹参酮,经14 d治疗后比较各组患者治疗前后的疗效、凝血时间(CT)、血小板数(PLT)、血氧饱和度(SaO_2)、平均肺动脉压(MPAP)及血液流变学各项指标。结果治疗后,依那普利组、丹参酮组和依那普利-丹参酮联合组的总有效率分别为80.0%、82.0%和96.0%,显效率分别为50.0%、48.0%和62.0%,与对照组(总有效率30.0%,显效率10.0%)比较均有统计学意义(P<0.01)。各治疗组治疗后CT、SaO_2、MPAP及血液流变学指标等均较对照组明显改善(P<0.01),且联合用药较单一药物治疗效果显著(P<0.05)。结论依那普利与丹参酮联合应用可有效降低肺心病急性加重期患者的肺动脉高压,改善肺源性心脏病症状,是一组安全有效的辅助治疗药物,值得临床推广应用。

桂西地区9种急性呼吸道感染病原微生物IgM类抗体的检测

急性呼吸道感染（ARI）的病原体有细菌、病毒、支原体等,其中病毒是常见的病原体。了解呼吸系统感染的病原学构成和流行病学特征可为临床及时诊断、治疗和预防呼吸道感染提供依据。本研究调查桂西地区679例急性呼吸道感染患者血清9种呼吸道感染病原微生物IgM类抗体的存在情况,报道如下。

“临床检验仪器学”精品课程建设探索——以右江民族医学院为例

目的扎实推进"临床检验仪器学"精品课程建设,建立国内先进的"临床检验仪器学"理论教学体系与实验技术平台。方法通过教材建设、不断优化教学内容和改进教学方法、完善高水平的教学团队等措施,始终把培养学生的实践能力和综合素质能力作为课程建设的主线。结果使学生牢固掌握重要检验仪器分析方法的原理、技术、优缺点以及重要应用;通过教学激励学生学习的热情,培养学生辨证唯物主义观点。结论进一步提高了我校"临床检验仪器学"课程的教学质量。