壮药白花蛇舌草不同部位总DNA提取方法的比较研究

目的:比较改良试剂盒法和改良CTAB法对白花蛇舌草不同部位总DNA提取的效果。方法:以白花蛇舌草的新鲜叶片、茎、花、果及干燥全草为实验材料,采用改良试剂盒法和改良CTAB法两种DNA提取方法提取上述材料的总DNA,将提取到的DNA经凝胶电泳和超微量分光光度计检测,比较两种方法对白花蛇舌草不同部位总DNA的提取效果。结果:提取浓度方面,使用改良试剂盒法提取叶、茎、花的总DNA浓度能达到0.3μg/mL以上,使用改良CTAB法提取叶、茎的总DNA浓度能达到0.3μg/mL以上;提取纯度方面,改良试剂盒法对花DNA的提取纯度最高(A260/A280=1.80),其余部分次之,改良CTAB法对叶DNA的提取纯度最高(A260/A280=1.79),其余部分次之。结论:当提取白花蛇舌草新鲜叶片和茎的DNA时,改良试剂盒法和改良CTAB法均能较好的效果;当提取白花蛇舌草的新鲜花、果和干燥全草的DNA时,改良试剂盒法能满足实验要求。

十一方药酒药理作用与临床应用研究进展

十一方药酒是由广西中医药大学第一附属医院自主研发、具有地方特色、享誉省内外、疗效卓越的院内制剂。其处方由自然铜、红花、大黄、乳香、没药、续断、土鳖虫等多味药材组成,具有活血化瘀、接骨续筋、去腐生肌、消肿止痛等功效。临床及实验研究表明,十一方药酒对治疗骨折、膝骨关节炎、急慢性软组织损伤、糖尿病足、腰扭伤、褥疮等病症的治疗具有良好效果,还具有止痛、抑菌、抗炎、预防血管疾病等作用。近些年随着十一方药酒使用范围的不断扩大,研究人员对十一方药酒的药理作用、临床应用作了大量研究,十一方药酒对于各种疾病的治疗机制被阐释、越来越多的临床应用被挖掘出来。因此本文将对十一方药酒近些年的药理作用及临床应用研究进展作一综述,对前人研究成果进行总结归纳并希望为后续研究提供思路和资料参考。

中药皂苷抗肿瘤作用的研究进展

中药皂苷类广泛分布于植物界中,其药理活性多且强。肿瘤是继心脑血管疾病之后的人类第二大杀手,关于中药抗肿瘤药物的研究还处于初步研究阶段,还未有成熟的理论。中药皂苷作为天然抗肿瘤药物,应用在临床上有显著的疗效,较化学药相比,其副作用小、遗传毒性低、作用靶点和作用的途径多种多样,是目前药物研究的热点,具有良好的研究开发前景。本文通过检索皂苷类的文献资料,总结分析中药皂苷在抗肿瘤活性方面的研究进展,为研究和利用中药皂苷类成分提供理论依据。

酶联免疫吸附测定法用于中药质量控制的研究进展

在中药质量控制过程中,有效成分和有毒有害成分的检测是2个重要环节,传统检测方法如高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法等虽然能准确对上述物质进行定量,但往往存在操作复杂、成本过高、不能随时检测、难溶及大分子物质检测困难等缺点。酶联免疫吸附测定法(ELISA)是将抗原或抗体吸附在固相载体表面,利用抗原抗体的特异性反应实现目标检测物的定性或定量分析。该方法具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强、实验设备要求简单、应用范围广、成本低等众多优点。近年来,ELISA技术在中药质量控制领域运用越来越广泛,特别是在以黄曲霉毒素为代表的真菌毒素含量的检测和中药有效成分定性定量检测方面,ELISA以其独特的优势发挥着越来越重要的作用,为大批量中药的快速质量检测提供了新方法、新思路。该文对近年来ELISA用于中药质量控制的研究进展进行系统梳理,并对其技术发展和应用前景进行展望,以期为进一步应用该方法保障中药质量安全可控提供借鉴和研究思路。

蜈蚣配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

目的:为进一步保障蜈蚣药材及其制品的质量与临床疗效,建立蜈蚣配方颗粒特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法。方法:根据蜈蚣细胞色素C氧化酶亚基3(COX-3)基因序列筛选适用于蜈蚣配方颗粒的稳定引物区间,并在区间内筛选获得蜈蚣及其混伪品的单核苷酸多态性(SNP)位点,设计特异性鉴别引物。分别收集蜈蚣及其混伪品,考察退火温度、循环次数、不同Taq酶、DNA模板量、不同PCR仪、不同引物量等因素对PCR鉴别方法的影响,建立并优化PCR反应体系,并对此方法的专属性及适用性进行考察验证。结果:PCR鉴别反应体系为2×M5 PCR Mix 12.5μL,蜈蚣配方颗粒鉴别引物(10μmol·L^(-1))各0.4μL,DNA模板2.5μL,无菌双蒸水9.2μL。PCR反应参数为94℃预变性3 min,循环反应30次(94℃变性20 s,62℃退火20 s,72℃延伸45 s),72℃延伸5 min。利用上述PCR反应体系和反应参数对蜈蚣药材及其制品进行扩增,电泳检测结果表明所有正品均可在约135 bp处显示出一条明亮条带,而混伪品无条带。结论:建立的特异性PCR鉴别方法可准确对蜈蚣药材、饮片、标准汤剂冻干粉、配方颗粒中间体、配方颗粒成品进行准确鉴别,为进一步保障蜈蚣药材及其制品的质量具有重要意义。