髋臼一次磨锉成形在初次全髋关节置换中的应用

目的回顾性分析应用髋臼一次磨锉成形在初次全髋关节置换中的临床效果。方法2018年1月至2023年1月,江苏省泰州市中医院收治70例单侧髋关节行初次THA的患者。其中,35例采用髋臼一次磨锉成形,为一次磨锉成形组;另35例采用传统方法从最小号髋臼锉开始磨锉,直至软骨下骨出现均匀渗血,为传统磨锉方法组。两组髋臼磨锉结束后再将相应型号的髋臼假体按预定角度打入,股骨侧处理方法一致。记录两组的手术时间、术中出血量,术后髋臼假体前倾角、外展角及Harris髋关节功能评分。结果一次磨锉成形组的手术时间和术中出血量明显少于传统磨锉方法组,差异有统计学意义(P<0.05);两组的平均髋臼前倾角和外展角均在安全范围内,差异无统计学意义(P>0.05);术后2周Harris髋关节功能评分一次磨锉成形组优于传统磨锉方法组,但差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者术后3个月门诊复诊均无异常情况。结论髋臼一次磨锉成形可以减少髋臼磨锉失误,缩短手术时间,减少术中出血量,加速患者康复。

术前许氏伤药外敷在闭合型旋后-外旋Ⅲ~Ⅳ型踝关节骨折患者中的应用研究

目的 探讨术前早期许氏伤药外敷在闭合型旋后-外旋Ⅲ~Ⅳ型踝关节骨折患者中的应用效果。方法 选取2021年10月—2023年4月月泰州市中医院收治的80例踝关节骨折患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和研究组各40例。术前对照组予复方甘露醇联合酮咯酸氨丁三醇治疗,研究组在对照组基础上予许氏伤药外敷治疗。比较2组治疗前与治疗3 d、7 d后患侧踝关节周径及疼痛程度(VAS评分)、炎症因子水平[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]及肿痛消退时间、术前等待时间、术后并发症发生情况。结果 治疗后,2组踝关节周径、VAS评分及血清TNF-α、hs-CRP水平均逐渐降低(P均<0.05),且研究组治疗3 d、7 d后踝关节周径、VAS评分及血清TNF-α、hs-CRP水平均明显低于同期对照组(P均<0.05);研究组肿痛消退时间、术前等待时间均明显短于对照组(P均<0.05);对照组总并发症发生率为15.0%(6/40),研究组为2.5%(1/40),研究组明显低于对照组(P<0.05)。结论 术前早期采用许氏伤药外敷治疗闭合型旋后-外旋Ⅲ~Ⅳ型踝关节骨折患者,能有效减轻患者炎症反应,快速缓解患者踝关节肿胀及疼痛程度,缩短术前等待时间,减少术后并发症。

侧卧位后外侧入路治疗踝部旋后-外旋型Ⅲ、Ⅳ度骨折的临床应用价值

目的:探讨侧卧位后外侧入路治疗踝部旋后-外旋型Ⅲ、Ⅳ度骨折的临床价值。方法:回顾性分析2021年10月—2023年4月在泰州市中医院骨伤科接受切开复位内固定术的80例踝关节骨折患者的资料,其中40例选择仰卧位后内侧入路的患者设为对照组,40例选择侧卧位后外侧入路手术设为研究组。对两组的手术情况及术后情况进行对比,并对比两组手术前后的踝关节情况。结果:两组术中失血量对比,差异无统计学意义(P>0.05);在手术用时、住院时间、骨折愈合时间方面对比,研究组均比对照组更短,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组术后并发症总发生率比对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。术后第1~3天,与对照组相比,研究组疼痛评分、C反应蛋白、白细胞介素-6均更低,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后8周,研究组的踝关节活动度、足踝功能评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在旋后-外旋型Ⅲ、Ⅳ度踝关节骨折患者切开复位内固定术中,选择侧卧位后外侧入路可在不增加术中失血量的情况下,获得比后内侧入路更好的临床疗效,其对于患者足踝功能、踝关节活动受限等情况均可有效改善,还可减轻术后患者的疼痛感受和炎症反应,降低术后发生并发症的风险,使患者得以顺利出院,对骨折的愈合起到促进作用。

基于HMGB1/NF-κB通路探讨温经通络汤对IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞炎症的影响

目的 观察温经通络汤对IL-1β诱导关节软骨细胞炎症的影响并探讨其作用机制。方法 从小鼠膝关节软骨中提取原代软骨细胞,并用甲苯胺蓝染色法鉴定;IL-1β诱导软骨细胞炎症模型,采用慢病毒RNAi-HMGB1转染软骨细胞,干扰HMGB1的表达;后用不同浓度的温经通络汤含药血清干预细胞;Western blot分析各组细胞中HMGB1、NF-κB信号通路蛋白的表达水平;qPCR检测HMGB1、NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平;ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、PGE-2和TNF-α的表达水平。结果 与正常培养的细胞相比,IL-1β诱导软骨细胞炎症模型中HMGB1的表达水平显著上升(P<0.01),且p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白的相对表达量与NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平均有所提高(P<0.01);与模型组比较,RNAi-HMGB1慢病毒转染可显著下调HMGB1的表达水平(P<0.01),并抑制p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白的相对表达量(P<0.01)与NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平(P<0.05);与模型组相比,不同浓度的温经通络汤含药血清均表现出对HMGB1和NF-κB信号通路的抑制效应,表现为HMGB1与p-IκBα/IκBα和p-P65/P65的蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论 温经通络汤能够改善IL-1β诱导软骨细胞炎症,其作用机制可能与抑制HMGB1介导NF-κB信号通路的活化相关。

温经通络汤对小鼠膝骨关节炎软骨形态改变和VEGF、MMP-13、HIF-1α表达情况的影响

目的:观察温经通络汤对小鼠膝骨关节炎模型核血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶-13(MMP-13),缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响,探讨其对膝骨关节炎的作用机制。方法:采用前交叉韧带离断(ACLT)法建立小鼠膝骨关节炎模型,将30只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、温经通络汤高剂量组(C组)、温经通络汤低剂量组(D组)、阳性药组(E组)。造模成功后A组与B组分别予以10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,C组与D组分别予以10 mL/(kg·d)温经通络汤灌胃,E组予以10 mL/(kg·d)美洛昔康水溶液灌胃,持续2周。采用组织形态学观察及Mankin's评分评估各组小鼠膝关节表面软骨的损伤程度。采用免疫组化法观察各组膝关节表面软骨中VEGF、MMP-13和HIF-1α的表达水平,采用酶联免疫吸附检测各组膝关节软骨组织中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶的表达水平。结果:组织形态学观察及Mankin's评分显示与假手术组相比,其余各组的评分均明显升高(P<0.05),与模型组相比,高剂量组、低剂量组、阳性药组的评分明显下降(P<0.05)。免疫组化结果表明,高剂量组、低剂量组和阳性药组中小鼠膝关节软骨的VEGF、MMP-13、HIF-1α表达相较于模型组均明显下降(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与假手术组相比,其余各组的小鼠血清中VEGF、MMP-13及HIF-1α表达均有明显升高(P<0.05),其中模型组小鼠血清中VEGF、MMP-13及HIF-1α的表达最高,高剂量组、低剂量组和阳性药组与模型组相比均有所下降(P<0.05)。结论:温经通络汤可能通过调控HIF-1α抑制VEGF及MMP-13的表达发挥缓解及治疗膝骨关节炎的作用。

强直性脊柱炎合并脊柱骨折患者的诊断治疗进展

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种以中轴关节和肌腱、韧带、骨附着点的慢性炎症为主的自身免疫性疾病。在AS的发展过程中常伴有脊柱的缓慢进行性自主融合,并与脆性骨质量结合起来,从而导致患者容易发生脊柱骨折和脊髓损伤(SCI)。就其骨折类型而言,颈胸腰3个节段锥体在内的应力性骨折最为典型,这种类型的骨折和损伤大多涉及到颅脑交界处、下颈椎以及胸腰椎。虽然此种类型的骨折在治疗上存在很大风险,但大量临床数据表明长节段的固定和融合手术是治疗该种损伤的有效方法。本文就强直性脊柱炎合并脊柱骨折患者的治疗方法及其进展做一综述。

黄桂成运用络病理论治疗骨质疏松症经验

黄桂成教授善用络病理论治疗骨质疏松症（OP）,并在此基础上发展完善了具有临床指导意义的络病理念。他认为OP病位在骨,与络脉输布经脉气血的功能失常密切相关,病机包括肝肾不足、络虚不行,脾精亏耗、络脉虚损,痰瘀阻滞、络脉不通。因此,在OP的治疗中,黄老师强调扶正与通络兼顾,尤其善用蜈蚣、全蝎、天南星等搜风通络药物透骨搜络、祛瘀散结。

马勇教授“血水终始,通利为治”学术思想探讨

瘀血内阻之机,活血化瘀之法为骨伤科所共识,然追溯《内经》《金匮要略》等,＂血不利则为水＂之理甚为经典,故而存在共识与经典不符的问题。马勇教授研究骨伤疾患数十年,认为前者有违中医整体观念,血既瘀滞,气、津、液亦常紊乱,故从临床和理论角度而言,后者更符合骨伤疾患的病机特点。马勇教授指出,在骨伤疾患中气血瘀阻、营卫不和、气血亏虚三个阶段常有血水互病这一关键病机,故临床上不可局限于活血化瘀之法,而应以灵变处之。

游泳运动对膝骨关节炎小鼠软骨退变和NF-κB激活的影响

目的:通过观测游泳运动对膝骨关节炎(KOA)小鼠软骨基质降解及NF-质降信号通路介导的炎症反应的影响,探讨游泳运动延缓KOA小鼠软骨退变的分子机制。方法:3月龄C57BL/6小鼠40只,随机分为空白组(Blank)、ACLT模型组(ACLT)、ACLT模型+游泳组(ACLT+Swim)、假手术组(Sham)和假手术+游泳组(Sham+Swim)。采用前交叉韧带横断术(ACLT)制作KOA模型,手术2周后,游泳组小鼠进行6周的无负重游泳运动(40 min/d,5 d/周)。游泳结束后,取各组小鼠膝关节软骨,HE染色观察软骨病理学改变,免疫组织化学染色检测软骨中炎症介质表达、RT-PCR法检测软骨基质相关指标mRNA表达、Western blot技术检测软骨基质及NF-κB通路相关分子蛋白表达,ELISA方法检测血清中炎症指标表达水平。结果:1)与空白组相比:ACLT组软骨损伤明显,Mankin’s评分显著升高(P<0.01);软骨Col II含量显著下降,而MMP-13表达增高(P<0.01);软骨中炎症介质COX-2、iNOS表达增高,血清炎症因子TNF-α、IL-6表达亦增高(P<0.01);NF-κB通路中磷酸化p65、IκBα蛋白水平显著升高(P<0.01)。2)与ACLT组相比:ACLT+Swim组Mankin′s评分明显下降(P<0.01)Col IImRNA(P<0.05)及蛋白水平(P<0.01)均提升,MMP-13mRNA及蛋白水平均显著下降(P<0.01),软骨中炎症介质COX-2、iNOS及血清炎症因子TNF-α、IL-6均显著降低(P<0.01),p65、IκBα磷酸化水平亦明显下降(P<0.01)。结论:中等强度游泳运动可能通过调控NF-κB信号通路介导的炎症反应,抑制软骨基质降解从而延缓软骨退变,干预KOA小鼠病理进程。

许氏伤药外敷治疗踝关节骨折29例

目的观察许氏伤药外敷治疗踝关节骨折的疗效。方法选取2019年1月至2020年9月在江苏省泰州市中医院骨伤科进行手术治疗的踝关节骨折患者60例,采用随机数字表法分为两组。对照组30例(脱落2例),观察组30例(脱落1例),患者术后均给予常规治疗,对照组在常规治疗基础上给予外用药模拟剂治疗,观察组在常规治疗基础上给予许氏伤药外敷治疗。统计两组优良率,检测两组血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的变化,记录踝关节背伸角度和跖屈角度在不同时间点的变化,应用视觉模拟评分(visual analogue score,VAS)和关节肿胀评分评价疼痛程度和肿胀程度。结果治疗后,观察组的疗效为优的患者15例,良的患者11例,整体优良率为89.66%,高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗2周后,两组患者CRP、ESR均较治疗前降低(P<0.05),观察组CRP、ESR低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后2周、12周时两组患者关节肿胀评分、VAS评分下降(P<0.05),观察组治疗后2周、12周后关节肿胀评分、VAS评分低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后2周、12周时两组患者踝关节背伸角度和跖屈角度均增大(P<0.05),观察组治疗后2周、12周后踝关节主动活动度高于对照组(P<0.05)。两组并发症发生率比较,无统计学差异。结论许氏伤药外敷用于踝关节骨折术后可减轻关节肿胀和疼痛,降低CRP、ESR等炎性因子的表达,改善踝关节主动活动度,提高疗效。

研究闭合性踝关节骨折ORIF术后联合牛膝活血汤加减对炎性指标及踝关节肿痛的影响

目的:探讨闭合性踝关节骨折切开复位内固定手术(ORIF)术后联合牛膝活血汤加减对炎性指标及踝关节肿痛的临床研究。方法:选取2019年11月至2020年11月收治80例踝关节骨折患者为研究对象,经CT或X片确诊为闭合性骨折,按随机数字表法分为对照组40例(踝关节骨折ORIF治疗)、研究组40例(踝关节骨折ORIF+牛膝活血汤加减口服治疗)。比较两组治疗前后血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)炎性指标及踝关节肿痛的变化,评估临床疗效。结果:两组血沉、CRP水平及踝关节肿痛评分在术后1 d呈峰值,术后7 d、术后14 d呈下降趋势;研究组血沉、CRP水平及踝关节肿痛评分在术后7 d、术后14 d均低于同期对照组,组间差异比较有统计学意义(P<0.05)。对照组显效率62.5%,研究组显效率82.5%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:踝关节骨折ORIF术后联合牛膝活血汤加减口服治疗闭合性踝关节骨折,能有效降低患者血沉、CRP水平,缓解踝关节疼痛,提高临床疗效。

温经通络汤对膝骨关节炎模型小鼠膝关节软骨组织HMGB1/NF-κB信号通路的影响

目的探讨温经通络汤治疗膝骨关节炎的可能作用机制。方法将32只小鼠随机分为假手术组,模型组及温经通络汤低剂量组、高剂量组,每组8只。除假手术组外,其余各组采用前交叉韧带横断术(ACLT)法建立膝骨关节炎模型。术后4周,温经通络汤低剂量、高剂量组分别以温经通络汤20、80 g/(kg·d)灌胃,假手术组及模型组给予0.2 ml/10 g生理盐水灌胃,均每天1次,持续4周。采用HE染色及番红O-固绿(S-O)染色法观察各组小鼠软骨组织病理形态,并根据改良Mankin’s评分标准对病理变化进行评分;Western blot法检测各组小鼠关节软骨组织中基质金属蛋白酶13(MMP13)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、核因子κB(NF-κB)通路的蛋白表达情况;qPCR法检测COLⅡ、MMP13及NF-κB mRNA表达;免疫组化法观察软骨中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达;ELISA法检测血清炎症因子前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达。结果与假手术组比较,模型组关节软骨表面破坏明显,软骨层有明显缺损,改良Mankin’s评分提高,软骨组织中p-IκBα/IκBα值、p-p65/p65值、MMP13及HMGB1蛋白表达,MMP13、NF-κB1及NF-κB2 mRNA表达均显著提高,iNOS阳性细胞表达增加,血清炎症因子IL-6、PGE2和TNF-α表达明显升高,且COLⅡ蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,温经通络汤高、低剂量组软骨组织病理形态均改善,关节软骨表面破损减少,改良Mankin’s评分降低,软骨组织中p-IκBα/IκBα值、p-p65/p65值、MMP13及HMGB1蛋白表达,MMP13、NF-κB1 mRNA表达,血清炎症因子IL-6、PGE2和TNF-α表达水平均明显降低,iNOS阳性细胞表达减少,COLⅡ蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01);与温经通络汤低剂量组比较,温经通络汤高剂量组改良Mankin’s评分,p-IκBα/IκBα值和MMP13蛋白表达,MMP13、NF-κB1、NF-κB2 mRNA,血清炎症因子IL-6、PGE2和TNF-α表达降低,p-p65/p65值升高(P<0.01)。结论温经通络汤可显著改善膝骨关节炎模型小鼠软骨组织病理形态,延缓疾病进程,其作用机制可能与抑制HMGB1/NF-κB信号通路,减轻炎症反应有关。

山柰酚调控白细胞介素-1β诱导的软骨细胞的药理学研究

目的研究山柰酚对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡的影响以及对前交叉韧带横断术(ACLT)介导的膝骨关节炎(KOA)模型小鼠病理进程的调控作用。方法将软骨细胞分为空白组、模型组和低、中、高剂量实验组。空白组用完全培养基正常培养,模型组用含10 ng·mL^(-1)IL-1β的完全培养基处理,山柰酚低、中、高实验组在模型组的基础上分别予以10、20、50μmol·L-1山柰酚处理。以甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)免疫荧光染色对原代细胞进行鉴定;以细胞计数法-8(CCK-8)法检测山柰酚对软骨细胞增殖的影响;以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、剪切的胱天蛋白酶-9(cleaved caspase-9)的表达情况。将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、山柰酚组,模型组用ACLT法构建小鼠膝骨关节炎模型,4周后阳性药组予美洛昔康,山柰酚组予山柰酚进行灌胃治疗,假手术组及模型组予等体积0.9%NaCl灌胃,共4周。以苏木精-伊红(HE)及番红-O染色法观察各组小鼠膝关节软骨组织形态学变化;以原位末端标记(TUNEL)法检测膝关节软骨细胞凋亡率。结果甲苯胺蓝及CollagenⅡ免疫荧光鉴定结果表明所提取的细胞符合软骨细胞特征。空白组、模型组和低、中、高剂量实验组Bax蛋白表达水平分别为0.54±0.01、1.31±0.05、1.25±0.06、1.01±0.46、0.66±0.02;cleaved caspase-3蛋白表达水平分别为0.36±0.01、1.25±0.05、1.04±0.01、0.54±0.02、0.47±0.01;cleaved caspase-9蛋白表达水平分别为0.23±0.01、1.06±0.02、0.95±0.05、0.60±0.02、0.49±0.03;Bcl-2蛋白表达水平分别为0.34±0.02、0.20±0.01、0.29±0.02、0.37±0.00、0.35±0.02,山柰酚对Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达有明显的抑制作用,且可增加Bcl-2的表达(P<0.05)。病理检测结果显示,ACLT可成功构建KOA模型,山柰酚可显著改善其病理进程。结论山柰酚可显著抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,并可调控KOA小鼠软骨细胞凋亡,延缓其病理进程。

温经通络汤对膝骨关节炎模型小鼠VEGF/VEGFR2/ERK1/2信号通路的影响

目的:探讨温经通络汤改善膝骨关节炎关节(KOA)软骨缺损,延缓关节退变的可能作用机制。方法:采用前交叉韧带切除术(ACLT法)建立KOA模型,实验分为假手术组、模型组、温经通络汤组(高、低剂量)和阳性药组。造模4周后中药组分别予以高、低剂量(80,20 g·kg^(-1))的温经通络汤灌胃;阳性药组予以硫酸氨基葡萄糖胶囊(0.29 g·kg^(-1));假手术组与模型组均予等体积生理盐水灌胃。连续干预4周后苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学变化并进行Mankin’s评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测血管内皮生长因子A(VEGFA),血管内皮生长因子受体2(VEGFR2),细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)蛋白和mRNA的表达。结果:HE染色结果显示与假手术组比较,模型组小鼠Mankin’s评分显著升高(P<0.01);与模型组比较,药物组均能明显改善造模引起的关节软骨面缺损,Mankin’s评分均有显著降低(P<0.01),但各给药组间差异无有统计学意义。与假手术组比较,模型组VEGFA,VEGFR2,ERK1/2和ADAMTS4蛋白和mRNA的表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组可以显著抑制VEGFA和ERK1/2的蛋白表达(P<0.01),硫酸氨基葡萄糖胶囊组效果要优于温经通络汤低剂量组(P<0.05),但弱于温经通络汤高剂量组(P<0.01);硫酸氨基葡萄糖胶囊组可以抑制VEGFR2和ADAMTS4的蛋白表达,作用与温经通络汤低剂量组相当,作用均弱于温经通络汤高剂量组(P<0.05)。结论:温经通络汤可以改善KOA小鼠关节软骨损伤,其作用机制可能与VEGF/VEGFR2/ERK1/2信号通路有关。

膝骨关节炎小鼠软骨退变过程及温经通络汤对其治疗作用

目的:观察前交叉韧带切断(ACLT)模型小鼠不同阶段关节软骨的病理变化特征,明确温经通络汤对小鼠膝骨关节炎的治疗作用。方法:将小鼠随机分为空白组、假手术组(术后1、2、4、8、12周)、模型组(术后1、2、4、8、12周)和中药低、高剂量组。ACLT法建立模型,化学染色观察关节软骨病理形态并采用改良Mankin’s评分评价,免疫组化分析COLⅡ的表达;Western blot及qPCR检测COLⅡ、COLⅩ、INOS、COX-2蛋白及mRNA的表达。结果:模型组小鼠软骨破坏程度较空白组随时间延长不断加深,COLⅡ表达随病程发展不断下降(P<0.01,P<0.05),COLⅩ水平持续升高(P<0.01);中药干预后软骨退变程度较模型组均有好转,中药高剂量组COLⅡ表达显著升高(P<0.01,P<0.05),COLⅩ、INOS、COX-2上调均被抑制(P<0.01,P<0.05)。结论:在ACLT模型小鼠中,关节病变呈时间依赖性加深,温经通络汤可通过改善关节炎症、延缓软骨退变干预膝骨关节炎进程。

扶阳宣痹汤对大鼠椎间盘退变及基质金属蛋白酶表达的影响

目的:观察扶阳宣痹汤对退变椎间盘组织病理及相关因子MMP9和MMP13表达的影响,探讨改善椎间盘退变的作用机制。方法:选择大鼠尾椎间盘穿刺Co5/6/7建立椎间盘退变模型,随机分为空白组、模型组、腰痹通组(腰痹通0.34 g/(kg·d))、扶阳宣痹汤低剂量组(8.19 g/(kg·d))、中剂量组(16.38 g/(kg·d))、高剂量组(32.76 g/(kg·d)),制备大鼠椎间盘退变模型,模型制备成功后对各组大鼠进行灌胃给药,给药4周后行磁共振成像(MRI)复查各组大鼠尾椎间盘退变情况,处死大鼠提取尾椎间盘髓核组织,使用苏木精-伊红(HE)染色检测椎间盘退变程度,免疫组化检测椎间盘组织COL2A1和Aggrecan的表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测椎间盘组织MMP9和MMP13的蛋白表达,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)检测椎间盘组织COL2A1、Aggrecan、MMP9和MMP13的mRNA表达。结果:术后4周与模型组相比,扶阳宣痹汤低、中、高剂量组椎间盘T2加权信号强度高,高剂量组MRI的Piffimann椎间盘评分明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);HE染色的Masuda评分明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);对椎间盘COL2A1和Aggrecan的免疫组化染色更强,差异有统计学意义(P<0.01);显著下调MMP9和MMP13的mRNA表达及蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);同时上调COL2A1和Aggrecan的mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:扶阳宣痹汤可以通过抑制MMP9和MMP13表达促进COL2A1及Aggrecan的合成,改善椎间盘退行性病变,并存在一定剂量依赖性。本研究为扶阳宣痹汤改善椎间盘退变提供了实验依据。

温经通络汤含药血清通过PI3K/AKT信号通路对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响

目的 探索温经通络汤含药血清对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响及潜在分子机制。方法 取传代培养的第2代小鼠软骨细胞,随机分为空白对照组(C组)、10ng/L IL-1β诱导模型组(M组)、10ng/L IL-1β+不同浓度含药血清组(10%、15%、20%),分别处理细胞24h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白印迹分析BAX、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9、p-PI3K、PI3K、p-AKT及AKT蛋白的表达水平。结果 与对照组相比,10ng/L IL-1β可诱导软骨细胞的凋亡(P<0.05);与模型组比,10%、15%及20%温经通络汤含药血清组软骨细胞的凋亡率显著下降,其中20%温经通络汤含药血清组效果最为显著(P<0.05);与对照组相比,模型组BAX、Caspase-3、Caspase-9的表达明显增高(P<0.05),Bcl-2、p-PI3K、PI3K、p-AKT及AKT表达明显下降(P<0.05);不同浓度的温经通络汤含药血清可降低BAX、Caspase-3、Caspase-9表达,增加Bcl-2、p-PI3K、PI3K、p-AKT及AKT表达(P<0.05)。结论 温经通络汤可以通过激活PI3K/AKT信号通路而抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,从而起到预防骨性关节炎发生发展的作用。