溪黄草水提物对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用及机制研究

目的:研究溪黄草水提物(RWE)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化(HF)的保护作用及其机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.12 mg/kg)和RWE低、中、高剂量组(4、8、16 g/kg,以生药量计),每组10只。除正常组大鼠腹腔注射橄榄油外,其余各组大鼠均腹腔注射40%CCl4橄榄油溶液以复制HF模型。自造模第1天起,各给药组大鼠均灌胃相应药物(10 mL/kg),正常组和模型组大鼠均灌胃等体积水,每天1次,连续6周。给药结束后,采用生化法或酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的含量以及肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的含量或活性;采用苏木精-伊红染色观察大鼠肝组织病理学变化;采用蛋白质印迹法检测大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C的含量以及肝组织中MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量均显著升高(P<0.01),肝组织中SOD、GSH-Px的活性均显著降低(P<0.01);肝组织纤维化明显;肝组织中α-SMA、TGF-β1蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,秋水仙碱组和RWE各剂量组大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C的含量以及肝组织中MDA、TNF-α、IL-6的含量,秋水仙碱组和RWE中、高剂量组大鼠肝组织中IL-1β的含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),秋水仙碱组和RWE各剂量组大鼠肝组织中SOD、GSH-Px的活性均显著增强(P<0.05或P<0.01);肝组织纤维化程度明显减轻;肝组织中α-SMA、TGF-β1蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.01)。结论:RWE对CCl4诱导的HF模型大鼠具有一定的保护作用,其作用机制可能与调节脂质代谢、减轻肝脂质过氧化损伤、抗氧化应激反应、抑制炎症因子释放及TGF-β1蛋白表达等有关。

龙胆苦苷对非酒精性脂肪肝TLR-4/NF-κB和AMPK/Nrf2通路的影响

探讨龙胆苦苷(GPS)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的保护作用及TLR-4/NF-κB和AMPK/Nrf2通路的影响。将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(200 mg/kg)和GPS高、中、低剂量组(120、60、30 mg/kg)。正常组给予标准饲料,其余各组给予高脂饲料饲养14周,建立大鼠NAFLD模型。生化法检测肝功能、氧化应激和脂质积累情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰岛素抵抗和炎症因子水平,蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测大鼠肝组织中TLR-4/NF-κB和AMPK/Nrf2通路蛋白表达情况;油红O染色观察肝脏组织病理学变化。结果表明,GPS可降低NAFLD大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)的活性或含量,增强血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和高密度脂蛋白(HDL-C)含量,改善胰岛素抵抗情况,降低肝脏中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NF-κBp-p65和TLR-4的表达水平,提高p-AMPK与Nrf2蛋白表达水平。由此可见,GPS改善NAFLD的作用机制可能与抑制氧化应激、炎症反应和调控TLR-4/NF-κB、AMPK/Nrf2信号通路有关。

七味净肝灵对酒精性肝损伤大鼠的保护作用研究

探讨七味净肝灵(QWJGL)对酒精性肝损伤大鼠的保护作用及作用机制。将60只大鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟宾组(0.18 g/kg)、QWJGL高、中、低剂量组(8、4、2 g/kg),每组10只。造模采用灌胃56%vol白酒(10 mL/kg),2 h后,各用药组灌胃给药,持续给药30天。末次给药16 h后,取血,收集肝脏、脾脏和胰腺,计算LI、SI和TI,生化法测定血清ALT、AST、MDA、SOD和GSH-Px含量,ELISA法检测肝脏中IL^(-1)β、IL-6和TNF-α含量,Western blot检测肝组织NF-κB和CD14表达,HE染色观察肝脏组织病理学变化。结果表明,QWJGL可降低酒精性肝损伤大鼠的LI(P<0.05),提高SI和TI(P<0.05),降低肝损伤大鼠血清中ALT和AST活性(P<0.05),并且可以降低MDA含量(P<0.05),增强SOD和GSH-Px活性(P<0.05),降低TNF-α、IL^(-1)β和IL-6水平(P<0.05),抑制肝组织NF-κB和CD14表达(P<0.05)。综上,QWJGL对酒精性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与抑制氧化应激、炎症反应和调控CD14、NF-κB蛋白表达有关。

叶下珠对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的保护作用及机制研究

目的:以四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠为模型,探讨叶下珠对CCl4诱导的肝纤维化大鼠的保护作用及机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱(0. 12 mg/kg)组和叶下珠(16 g/kg、8 g/kg、4 g/kg,生药量)组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射40%CCl4花生油溶液(1 ml/kg),每周2次,连续8周,建立大鼠肝纤维化模型。从第一次注射CCl4花生油溶液开始,各治疗组分别灌胃给予相应药物,正常组和模型组给予等体积的生理盐水,每天1次,连续8周,8周末摘除眼球取血,收集肝脏。生化法检测血清中谷氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST)活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)表达水平;生化法检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平; ELISA法检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)含量;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定肝组织中α-SMA、TGF-β1相对表达量;通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色,显微镜下观察比较肝组织病理学变化。结果:与模型组比较,叶下珠各剂量组能明显降低大鼠血清中ALT、AST、LN、HA、PCⅢ和Ⅳ-C含量;并显著降低肝组织中MDA、TNF-α、IL-6及IL-1β水平,升高GSH-Px和SOD活性;下调肝组织纤维化相关蛋白TGF-β1、α-SMA表达;病理切片显示肝组织炎症坏死程度和肝纤维化病变程度明显改善。结论:叶下珠对CCl4诱导的肝纤维化大鼠具有明显保护作用,其机制可能与抑制氧化应激、炎症反应,调控α-SMA、TGF-β1蛋白表达有关。

火炭母总黄酮对D-氨基半乳糖诱导的肝损伤小鼠的保护作用及其机制

目的:研究火炭母总黄酮对D-氨基半乳糖(D-Gal N)建立的急性肝损伤小鼠的保护作用及机制。方法:将60只昆明种小鼠随机分为正常对照组,模型组,水飞蓟素组(200 mg/kg)及火炭母总黄酮剂量组(400 mg/kg、200 mg/kg、100 mg/kg),每组10只,适应性喂养一周后,各给药组小鼠每天灌胃给药1次,连续7天,正常对照组及模型组小鼠灌胃生理盐水,末次给药1 h后,除正常对照组,其余组均腹腔注射D-Gal N(500 mg/kg)建立小鼠急性肝损伤模型。模型建立16 h后,收集血清及肝组织,生化法检测小鼠血清中AST、ALT、TBIL、T-SOD、MDA和GSH-Px的活性或含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肝组织中Th1型细胞因子TNF-α与IFN-γ以及Th2型细胞因子IL-10与白IL-4的表达水平;HE染色,显微镜下观察小鼠肝组织病理变化。结果:与正常对照组相比较,模型组小鼠血清中AST、ALT和TBIL水平显著升高,肝组织切片显示,模型组小鼠肝组织严重受损,肝细胞明显坏死,提示肝损伤模型建立成功。与模型组相比,火炭母总黄酮剂量组(400 mg/kg和200 mg/kg)小鼠血清或肝组织中AST、ALT、TBIL、MDA、TNF-α和IFN-γ水平不同程度显著下降,而T-SOD、GSH-Px、IL-10和IL-4水平显著升高;HE染色结果显示,火炭母总黄酮能够显著改善肝损伤病变程度。结论:火炭母总黄酮具有显著的护肝作用,其作用机制可能与抗氧化及调节肝组织Th1/Th2细胞平衡有关。