微信辅助医学教学研究现状浅析:以骨肿瘤教学为例

随着微信在高校学生与教师中的应用普及,其已经成为了连接师生的重要交流载体。在医学教育中,大量研究将微信引入医学教学来创新教育理念和教育模式,获得较好的教学效果。本文对中国知网(CNKI)截至2021年6月30日,篇关摘中含有“微信”、“医学”、“教学”等字样的文献进行梳理归纳,采用内容分析法进行系统分析与综合探索。对微信在医学教学中的研究现状进行分析,并对微信辅助医学教学的各个阶段和学科的研究进行总结,同时以微信在骨肿瘤教学中的应用与发展为例进行例证分析,为微信在医学教学中的应用提供科学依据和理论支撑。

基于“海绵城市”理念的已建居住区绿化改造研究

近年来,海绵城市建设试点工作在我国各省市已陆续开展,已建居住区海绵化改造是海绵城市建设不可或缺的部分,提高已建居住区海绵化改造水平是海绵城市建设的迫切需求。首先阐述海绵城市的内涵和发展,然后分析已建居住区海绵化改造的重要意义和原则,最后探究已建居住区海绵化改造的技术策略,以期为已建居住区进行海绵化改造提供参考。

我是怎样做《共产党员》推介的

我今年33岁，1986年高中毕业。1988年进入村委会工作。并兼做本村报刊杂志投递工作。

基于层次分析法和区域土地利用综合评价森林资源质量——以广西昭平县大脑山林场为例

基于森林宏观生态环境,采用层次分析法与GIS技术对广西大脑山林场森林资源质量进行了综合评价。结果表明:广西大脑山林场2000、2010和2020年度森林资源质量综合评估分值分别为69.47、72.83和81.74分,森林资源质量持续提升,由“一般质量”提升到“较高质量”;森林资源质量受森林组织结构(B2,0.541)影响最明显,因子层中的树种有害生物发生率(C9,0.752)、林地蓄积比(C12,0.673)和单位面积蓄积(C1,0.601)权重分值占比较多;区域耕地面积2020与2010年、2000年相比,分别下降了1.72%和15%。2000年林地使用面积,同比2010、2020年分别增长了32.48和33.4 km^(2)。优化林地防护策略,构建生态、经济和社会一体效益,以期为广西森林经济持续发展提供理论指导。

核因子-κB信号通路在股骨头坏死发病机制中的作用

目的观察核因子-κB(NF-κB)信号通路在股骨头坏死(ONFH)发病中的作用及其分子机制。方法髋关节置换术中对股骨头坏死患者的骨髓(实验组)和非股骨头坏死患者的骨髓(对照组)进行采样,利用密度梯度离心法分离提取实验组和对照组的骨髓间充质干细胞(BMSCs),并进行纯化和培养。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSCs成骨分化关键因子Runx2表达情况。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测实验组和对照组BMSCs中NF-κB信号通路p65蛋白磷酸化水平及Runx2的表达差异。采用噻唑蓝法(MTT)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性细胞凋亡检测法分别检测实验组和对照组BMSCs的增殖活性及凋亡情况。对实验组和对照组的BMSCs进行成骨诱导后,进行茜素红染色,检测BMSCs成骨分化水平的差异。通过雷公藤甲素(Triptolide)抑制经脂多糖(LPS)预处理的实验组BMSCs,观察磷酸化p65及Runx2的表达水平,同时,应用茜素红染色,验证抑制磷酸化p65对NF-κB信号通路对成骨分化的作用。采取单因素方差分析和t检验进行统计学意义分析。结果RT-PCR结果表明实验组Runx2基因表达指标低于对照组(0.48±0.15比1.0,t=6.890,P<0.01)。Western blot显示实验组的核因子-κB信号通路p65磷酸化水平显著升高,Runx2显著降低。磷酸化p65实验组指标高于对照组(0.68±0.10比0.34±0.12,t=6.532,P<0.01),Runx2实验组指标低于对照组(0.31±0.16比0.78±0.14,t=6.890,P<0.01)。MTT检测表明实验组BMSCs增殖能力指标低于对照组(0.6±0.1比1.0,t=12.153,P<0.01)。Caspase-3/7活性细胞凋亡检测显示,实验组BMSCs凋亡指标高于对照组(1.5±0.1比1.0,t=3.386,P<0.01)。茜素红染色显示,成骨诱导后实验组BMSCs吸光度值(650 nm)低于对照组(0.51±0.15比1.16±0.16,t=6.335,P<0.01)。雷公藤甲素抑制经LPS预处理的实验组BMSCs后,Runx2表达显著升高,抑制后指标高于抑制前(0.77±0.05比0.54±0.10,t=8.289,P<0.01)。茜素红染色结果显示雷公藤甲素抑制后BMSCs吸光度高于抑制前(1.07±0.12比0.56±0.15,t=5.977,P<0.01)。结论NF-κB信号通路在股骨头坏死发病机制中的发挥重要作用,通过抑制NF-κB信号通路p65磷酸化可缓解炎症对股骨头坏死患者BMSCs成骨分化的抑制作用。

溴结构域蛋白4化学性降解剂ARV-825的抗骨肉瘤作用及其机制

目的观察靶向降解溴结构域蛋白4(BRD4)的抗骨肉瘤作用,并探讨其相关分子机制。方法采用小分子干扰RNA(siRNA)沉默BRD4在在骨肉瘤细胞中的表达,应用小分子降解剂ARV-825诱导BRD4在骨肉瘤细胞中化学性降解,分为对照组和处理组,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测骨肉瘤细胞凋亡信号的变化。采用流式细胞仪技术、细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖检测技术和细胞克隆实验研究小分子ARV-825的抗骨肉瘤作用。采用单因素方差分析和t检验比较各组间差异。结果应用siRNA抑制BRD4,Western blot实验显示骨肉瘤细胞凋亡关键酶半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9激活,DNA修饰酶多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)裂解增加[MNNG/HOS,siBRD4(a):0.665±0.139、1.024±0.378、0.445±0.130;siBRD4(b):0.844±0.190、1.183±0.368、0.843±0.005],Saos-2细胞系中结果与MNNG/HOS一致;流式细胞仪检测显示细胞凋亡增加,两种细胞系中两种siRNA对应凋亡率分别为(32.670±0.943)%、(43.330±1.247)%、(45.000±1.054)%、(51.330±1.491)%,差异有统计学意义(t=27.930、29.670、35.730、29.520,P<0.01)。Western blot检测结果显示,ARV-825能在两种细胞系中够呈时间和浓度依赖性诱导BRD4蛋白降解,差异均有统计学意义(0.01~0.30 μmol/L,F=223.100、219.200,P<0.01;0.5~72.0 h,F=122.500、86.870,P<0.01);CCK-8法显示低浓度ARV-825能有效抑制骨肉瘤细胞增殖[两种细胞50%的抑制率(IC50)分别为0.015、0.020 μmol/L,P<0.01];克隆形成实验显示ARV-825在0.1 μmol/L的低浓度能够完全抑制骨肉瘤细胞的克隆形成(F=56.250、128.500,P<0.01)。结论 BRD4具有重要的抑制骨肉瘤细胞凋亡信号传导作用。通过抑制BRD4的表达能够疏通凋亡信号通路,达到抗骨肉瘤作用。提示小分子化学性BRD4降解剂对于提高骨肉瘤的治疗效果具有良好的前景。

环腺苷酸反应元件结合蛋白3样蛋白1在骨肉瘤组织的表达及其临床意义

目的分析环腺苷酸反应元件结合蛋白3样蛋白1(CREB3L1)在骨肉瘤中的表达,探究CREB3L1在骨肉瘤中的作用及临床意义。方法收集2019年9月至2021年12月于郑州大学第一附属医院骨科住院并接受手术治疗的骨肉瘤患者组织5例,采用转录组测序分析差异表达基因;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CREB3L1在另外12对匹配的骨肉瘤和癌旁组织中的表达;IHC验证CREB3L1表达;采用Kaplan-Meier方法分析公共数据中骨肉瘤队列中CREB3L1和患者预后的关系。组间比较采用t检验。结果对临床采集的5对匹配骨肉瘤和正常骨组织进行转录组测序分析。比较分析共发现1809个差异表达基因(|FC|>1.5,P<0.01),其中有1111个基因在骨肉瘤组织中表达升高,697个基因在骨肉瘤组织中表达下调;基因富集分析结果显示,差异表达的基因主要涉及细胞外基质组织、胶原蛋白分解代谢、细胞黏附等信号通路。参与胶原蛋白生物合成、修饰和降解,细胞外基质胶原纤维形成等多个通路的基因在骨肉瘤中显著富集,其中CREB3L1等在骨肉瘤中表达升高明显。RT-qPCR分析匹配的骨肉瘤及对应正常骨组织中CREB3L1的mRNA表达表明(n=12),大部分标本中(9/12)CREB3L1在骨肉瘤中的表达明显高于对应的正常骨组织(4.408±3.230比1.000±0.000,t=2.256,P<0.05);IHC表明,CREB3L1在骨肉瘤细胞核与细胞质的表达高于正常骨组织(细胞质:2.750±1.290比1.750±0.683,t=2.739,P<0.05;细胞核:2.125±0.806比1.250±0.775,t=3.130,P<0.01);Kaplan-Meier生存分析表明,CREB3L1的表达与骨肉瘤患者的总体生存率、无转移生存率负相关(P<0.01,P<0.001);通过比较有和无肺转移患者病例中CREB3L1细胞核IHC评分,CREB3L1在有肺部转移肿瘤细胞核内表达量高于非转移者(2.500±0.527比1.700±0.949,t=2.331,P<0.05)。结论CREB3L1在骨肉瘤中表达升高且与患者较差的生存预后密切相关。

溴结构域蛋白4通过Noxa诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制

目的探讨溴结构域蛋白4(BRD4)通过Noxa诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制。方法采用小分子干扰RNA(siRNA)沉默骨肉瘤细胞中BRD4的表达,通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Noxa及凋亡相关分子表达;应用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞,通过Western blot和RT-qPCR方法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族蛋白成员Noxa及凋亡相关分子表达。siRNA沉默Noxa在骨肉瘤细胞中的表达后使用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞,通过Western blot和RT-qPCR方法检测Noxa的表达,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测骨肉瘤细胞的增殖,采用单因素方差分析比较各组间的差异。结果siRNA沉默BRD4在MNNG/HOS和Saos-2骨肉瘤细胞中的表达后,Western blot实验显示,沉默组BRD4蛋白表达含量低于对照组(MNNG/HOS:0.332±0.076、0.175±0.059比1.000±0.128,F=67.550,P<0.01;Saos-2:0.264±0.038、0.023±0.005比1.000±0.043,F=703.600,P<0.01);沉默组超大B细胞淋巴瘤/白血病(bcl-XL,bcl-2家族蛋白成员)蛋白表达含量低于对照组(MNNG/HOS:0.580±0.100、0.432±0.044比1.000±0.200,F=15.120,P<0.05;Saos-2:0.397±0.102、0.420±0.083比1.000±0.215,F=16.550,P<0.05),沉默组Noxa蛋白表达含量高于对照组(MNNG/HOS:5.508±1.173、4.969±1.335比1.000±0.274,F=16.870,P<0.05;7.085±1.371、13.750±1.567比1.000±0.264,F=83.110,P<0.001),差异均有统计学意义;应用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞,处理组Noxa蛋白及mRNA表达高于对照组(Western blot,MNNG/HOS:4.361±0.432、19.570±4.179、22.830±4.035、23.450±4.449比1.000±0.270,F=28.710,P<0.01;Saos-2:5.154±1.577、35.780±4.295、58.530±3.601、62.120±5.153比1.000±0.318,F=192.500,P<0.01;RT-qPCR:MNNG/HOS:2.957±0.803、7.656±1.539、7.258±1.523比1.000±0.026,F=24.01,P<0.01;Saos-2:4.081±0.463、9.594±2.667、7.412±2.300比1.000±0.025,F=13.520,P<0.01);处理组bcl-XL蛋白及mRNA表达水平低于对照组(Western blot,MNNG/HOS:0.864±0.191、0.677±0.155、0.512±0.166、0.365±0.077比1.000±0.189,F=7.646,P<0.05;Saos-2:0.958±0.270、0.799±0.223、0.686±0.234、0.422±0.121比1.000±0.299,F=2.883,P<0.05;RT-qPCR:MNNG/HOS:0.400±0.175、0.341±0.164、0.332±0.041比1.000±0.075,F=15.080,P<0.01;Saos-2:0.530±0.062、0.584±0.051、0.567±0.091比1.000±0.020,F=38.780,P<0.01)。使用siRNA沉默Noxa在Saoa-2骨肉瘤细胞中的表达,再使用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞,Noxa蛋白表达水平低于对照组(0.088±0.025、0.183±0.015比1.000±0.112,F=169.900,P<0.01),ARV-825处理组对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用低于对照组,ARV-825浓度为0.03 mol/L时效果明显(1.000±0.097、0.971±0.489比0.090±0.017,F=199.200,P<0.01),差异有统计学意义。结论BRD4通过抑制Noxa对骨肉瘤细胞发挥抗肿瘤作用。