TONSL在食管癌中的表达及其影响食管鳞癌细胞增殖的机制

目的:探讨tonsoku样DNA修复蛋白(TONSL)在食管癌组织中的表达及其对食管鳞癌细胞增殖的影响及机制。方法:利用cBioPortal、GEPIA和PRIDE等数据库分析在食管癌组织中,TONSL基因组拷贝数及其转录和翻译水平的变化。通过免疫组织化学实验检测TONSL蛋白在食管鳞癌和正常食管组织中的表达。利用siRNA干扰构建TONSL瞬时敲降食管鳞癌细胞模型,并采用集落形成实验和EdU实验检测TONSL敲降对食管鳞癌细胞增殖能力的影响。Western blot检测TONSL敲降后食管鳞癌细胞中DNA损伤修复相关标志蛋白ATM丝氨酸/苏氨酸激酶(ATM)和检查点激酶2(CHK2)及其磷酸化激活水平的变化。结果:与正常食管组织比较,食管癌基因组、转录组和蛋白质组的数据库分析结果显示,TONSL在食管癌组织中拷贝数增加表达,其mRNA和蛋白质表达水平在食管癌组织中均上调(P<0.05),且TONSL高表达与食管癌患者不良预后相关(P<0.05);免疫组织化学验证结果也表明TONSL蛋白在食管鳞癌组织中表达上调(P<0.001)。集落形成实验和EdU实验结果显示,与对照组相比,TONSL敲降后食管鳞癌细胞增殖能力减弱(P<0.05),并且在敲降TONSL后,食管鳞癌细胞DNA损伤修复相关蛋白ATM和CHK2的磷酸化水平均上调(均为P<0.05)。结论:TONSL在食管鳞癌中表达上调,并通过参与食管鳞癌细胞DNA损伤修复促进食管鳞癌细胞增殖。

HER2表达与食管癌患者生存期的关系

目的：HER2（human EGF receptor type 2）在食管癌中的过表达是否与食管癌患者生存期缩短相关,存在着两种不同的观点。为此,我们在大样本回顾性调查基础上,做进一步的研究,为弄清两者是否相关提供有用的数据资料。方法：在收集1988~1997年间的341例食管癌病例进行回顾性调查的基础上,通过联合应用组织芯片和免疫组织化学等实验方法检测食管癌组织中HER2的表达,分析HER2表达与食管癌患者生存期之间的相关性。结果：与正常食管上皮组织相比,HER2在多数食管癌组织中过表达;HER2过表达与食管癌组织细胞的分化程度相关（P〈0.05）;但与食管癌患者生存期缩短相关性不明显（P〉0.05）。结论：按FDA判定标准,食管癌组织细胞中HER2蛋白的过表达不是判定食管癌患者生存期缩短的有效指标。

两种食管鳞癌细胞系增殖和侵袭能力的比较研究

目的:研究两种来源不同的食管鳞癌细胞系EC109和KYSE510分裂增殖能力和侵袭能力的差异。方法:利用MTT实验和侵袭实验,在体外分别检测EC109和KYSE510细胞的分裂增殖能力和侵袭能力;采用裸鼠皮下接种实验和爪垫皮下接种淋巴结转移模型,比较两种细胞在体内的成瘤能力、局部侵袭能力和区域淋巴结转移能力的差异;免疫印迹检测上皮-间充质细胞转换标志蛋白E-cadherin、γ-cadherin和Vimentin在两种细胞中的表达水平。结果:体外实验表明,EC109细胞的分裂增殖和侵袭能力均明显较KYSE510细胞的强(P<0.05);皮下接种和爪垫皮下接种淋巴结转移实验显示EC109细胞的成瘤能力、局部侵袭能力和淋巴结转移能力均较KYSE510细胞的高;免疫印迹检测发现,E-cadherin和γ-cadherin在EC109细胞中的表达水平较KYSE510细胞中的表达低,而Vimentin在EC109细胞中的表达则较KYSE510细胞中的表达高,提示EC109细胞发生上皮-间充质细胞转换的程度较KYSE510的高。结论:EC109细胞的增殖和侵袭能力均较KYSE510细胞的强,上皮-间充质细胞转换可能是导致这种差异的原因之一。

KDR siRNA对乳癌细胞凋亡和NES1与RUNX3基因甲基化影响

目的探讨体外水平利用化学修饰的小干扰RNA(siRNA)敲减含激酶插入区受体(KDR)基因治疗乳癌的可行性和特异性。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000TM作为转染试剂,将针对人KDR基因的siRNA转染人乳癌细胞株MCF-7敲减KDR基因的表达。通过Hoechst 33258染色观察MCF-7细胞的凋亡情况;采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测NES1基因和RUNX3基因甲基化状态和mRNA的转录水平。结果靶向KDR的siRNA转染MCF-7细胞后可诱导细胞凋亡,NES1基因和RUNX3基因甲基化程度降低,出现非甲基化条带,同时mRNA表达上调。结论KDR siRNA在体外能逆转MCF-7细胞的NES1基因和RUNX3基因甲基化,并诱导细胞凋亡。

联合检测Fascin与EGFR对食管鳞癌患者预后判断的价值

目的:研究联合检测食管鳞癌组织中Fascin与EGFR蛋白表达对食管鳞癌患者预后判断的价值。方法:取食管鳞癌蜡块组织标本制作组织芯片。采用免疫组织化学的方法,检测Fascin与EGFR蛋白的表达情况,采用SPSS 13.0软件分析其与临床病理指标及患者生存期的关系。结果:免疫组织化学检测结果表明,Fascin与EGFR蛋白在食管鳞癌组织中的高表达率分别为35.4%和56.1%,二者均高表达率为29.5%。临床指标相关性分析结果表明,癌细胞局部淋巴结转移者和未转移者的食管鳞癌组织EGFR蛋白阳性表达率分别为68.7%和49.6%,EGFR蛋白的表达与局部淋巴结转移显著相关(P=0.014)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,Fascin或EGFR蛋白高表达的食管鳞癌患者5年生存率较低,而Fascin和EGFR蛋白二者均高表达的食管鳞癌患者5年生存率更低;相关性分析结果表明,在食管鳞癌组织中,Fascin与EGFR蛋白表达之间存在着显著的正相关关系(r=0.208,P=0.004)。多因素Cox回归分析结果表明,作为独立因子预警食管鳞癌患者预后不良,Fascin与EGFR联合检测的风险度为1.987,与Fascin的风险度1.852相比,未见明显升高。ROC曲线分析结果表明,与单独检测比较,联合检测Fascin和EGFR蛋白对判断食管鳞癌患者5年生存率的特异性明显升高。结论:食管鳞癌组织中Fascin与EGFR蛋白均高表达可能预示食管癌患者预后不良。

潮汕沿海地区食管癌样本库的建立及其应用

食管癌（esophageal cancer，EC）是全球常见八大恶性肿瘤之一，位居恶性肿瘤死亡率第六位[1-2]。依据组织病理类型分类，食管癌主要包括食管鳞癌和食管腺癌。食管鳞癌主要集中在亚洲的中东部和非洲等地区，而食管腺癌则在欧美等国家地区多发[3]。我国是世界上最主要的食管鳞癌高发国，食管鳞癌病例占全部食管癌病例的90%以上，并呈现明显的地理性分布差异，主要分布在河北、河南和山西三省交界的太行山地区，闽粤交界的潮汕沿海地区，鄂皖交界的大别山地区，四川北部地区，新疆哈萨克族居民居住地区和苏北地区等[4-5]。肿瘤流行病学调查结果表明，潮汕地区是我国唯一的沿海食管癌高发区，与我国其他内陆型食管癌高发区相比，其地理位置与气候条件，以及当地居民饮食生活习俗等均明显不同。1995–2004年的流行病学调查结果显示，该地区食管癌的标化发病率为74.47/105[6-7]。在潮汕当地，食管鳞癌的发病率一直高居各类恶性肿瘤之首。在此背景之下，毋庸置疑，建立潮汕沿海地区食管癌样本库是十分重要的工作，对揭示食管癌，尤其是食管鳞癌的病因，阐明这种特殊恶性肿瘤发病的分子机制，寻找其早期癌变特异性分子标志物，以利于早期发现、早期诊断和早期治疗，以及监测治疗后患者病情发展转归、预警预后等均有着十分重要的意义。

NT—P—BSA致敏明胶颗粒凝集试验及其血清学活性与ELISA的比较

用NT—P—BSA致敏明胶颗粒的凝集试验和NT—O—BSA为包被抗原的ELISA检测了1334份血清,发现1309例的两种试验结果一致,其中120例均为阳性。1189例均为阴性,符合率达98.1％。在职业接触者、社会接触者和肺结核患者中两种试验均阳性的分别为1.7％、2.16％和0％,与正常人群的2％无明显差异。家庭内接触者的阳性率高达8.04％,是正常人的4倍,对这些阳性者正在随访。因NT—P—BSA致敏明胶颗粒的凝集试验阳性主要见于查菌阳性的BL—LL患者,而正常人群和肺结核患者的阳性率极低,提示这一试验检测抗PGI抗体的持异性很高,似可用于发现高危人群和早期传染性病例。

鼠麻风菌体外培养的初步报告

本文报导了应用小川辰次培养基的鼠麻风菌体外培养的方法和结果。成功地获得了初代分离培养和传代培养的夏威夷鼠麻风菌株。初代分离率为25.6％,传代培养20代以前的阳性率为80.2％,20代以后的阳性率为58.8％。X^2 0.05<3.841,P<0.05。用传代培养生长茂盛的菌落进行动物还原接种和再培养,能使小白鼠产生同样病变和获得典型的菌落生长。本方法可以作为麻风药物的初筛工具。具有操作简便、耗资小、实验周期较短等优点。

大连老虎滩海域潮汐调和分析

利用T_TIDE工具箱对老虎滩验潮站1 a及3 M逐时潮位资料进行调和分析。结果表明:1 a潮位能调和分析出较多的天文分潮和浅水分潮,按振幅大小排列,前6个主要分潮分别为M_(2)、S_(2)、K_(1)、SA、N_(2)和O_(1)。对3 M潮位数据进行调和分析时,为保证获取足够的分潮,需要利用主分潮和随从分潮的差比关系来推算随从分潮,并添加必要的浅水分潮。利用1 a逐时潮位资料计算得出的调和常数进行2019年天文潮预报,实测与预报对比得出的潮高残差整体服从正态分布,残差均值小于10^(-2)m,置信区间长度小于10^(-2)。将天文潮预报值与潮汐表数据进行比较,对比发现两者差异较小,进一步证实利用T_TIDE开展天文潮预报的可行性。

包头橡胶厂下风向居民区居民外周血淋巴细胞染色体畸变调查

为了解橡胶制品生产中排放废气物对居民染邑体略变的影响，采用ＷＨＯ推荐的微量血培养方法和Ｂｕｃｋｔｏｎ外周血淋巴细胞染色体畸变分类法，对居住于包头橡胶制品厂下风向居民区居民４０例和上风向居民区居民４８例进行了外周血淋巴细胞染色体畸变调查。调查结果显示：两组之间细胞染色单体畸变率、染色体畸变率及细胞总畸变率的差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；不论是调查组还是对照组，细胞染色单体畸变率、染邑体畸变率及细胞总畸变率男女性别之间差异均无统计学意义（Ｐ＜０．０５）；细胞染色体畸变百分比构成以染色体断裂畸变为主要类型，调查组和对照组分别为７２／和７３／。结果提示：下风向居民细胞染色体畸变率偏高可能与橡胶厂废气排放有关。

用修正法准确计算加标回收率

用修正法准确计算加标回收率许秀娥（石家庄市环境监理站石家庄市０５００２１）环境水质检测中，在样品测定的同时，于样品中加入标准物质测定加标回收率是目前实验室中常用且方便的确定准确度的方法。我国环境水质监测系统多年来一直延用如下加标回收率计算式：在进行加...

新医改背景下某镇级公立医院医务人员思想状况调查研究

随着改革开放向纵深发展,医疗体制改革的不断深入,多元化文化的发展对传统的思想体系产生了冲击,医务人员的思想观念、价值取向、行为规范、思维方式和生活追求等发生了深刻的变化[1]。＂医药分开＂逐渐代替了长期以来的＂以药养医＂的局面,医务人员的思想状况也随之出现了新的变化。在公立医院改革中,县镇级医院作为改革的突破口发挥着县域医改的核心作用。

幼年特发性关节炎累及腕关节MRI表现及其分布特点研究

目的:分析幼年特发性关节炎(JIA)累及腕关节时的MRI图像特点,对所出现征象进行归纳总结。方法:回顾性研究临床已确诊JIA,并出现腕关节肿胀、疼痛症状患者42例的MRI图像,针对滑膜增生、关节积液、腱鞘炎、骨髓水肿、骨侵蚀五个征象进行分析。结果:37例出现滑膜增强伴不同程度增厚,33例出现腱鞘炎,34例出现关节积液;32例出现骨髓水肿,0例骨侵蚀;滑膜增厚以桡腕关节、远侧尺桡关节出现频率较高;腱鞘炎更易累及伸肌群;骨髓水肿以头状骨、钩状骨受累明显。结论:MRI及MRI增强扫描可以全面评价JIA腕关节受累情况,MRI增强扫描滑膜增强是诊断JIA累及腕关节的主要指标。

巧设情境,构建道德与法治高效课堂

情境教学法是一种以形象为主体的生动场景,在初中道德与法治教学中,采取情境教学法,可提高课程教学效果,充分唤醒学生对道德与法治知识的学习兴趣,真正取得寓教于乐的教学效果,促使学生透彻理解所教内容,取得较好的学习成绩.

颅脑损伤继发中枢性尿崩症20例治疗体会

颅脑损伤并发中枢性尿崩症在临床上并不少见,现将我院2003年1月～2008年9月收治的20例病例作一回顾性分析,现报告如下。1临床资料1.1一般资料本组20例,男17例,女3例;年龄15～62岁,平均31岁;其中车祸伤14例,坠落伤4例,打击伤2例。

长链非编码RNA-SLC52A3c在食管癌中的表达特征、功能与临床意义

目的探讨食管鳞癌中长链非编码RNA-SLC52A3c的表达特征、功能与临床意义。方法通过3′RACE确认SLC52A3c的全长序列;通过MTS、克隆形成、E-plate、划痕实验和Transwell等实验方法,检测SLC52A3c高表达对食管鳞癌细胞增殖能力与迁移能力的影响;通过实时定量PCR方法,分别检测食管鳞癌细胞系和永生化食管鳞状上皮细胞系,以及食管鳞癌及其配对的正常食管黏膜组织(183例)中SLC52A3c的表达水平。结果发现SLC52A3基因的一个新的非编码转录本,SLC52A3c;高表达SLC52A3c可显著抑制食管鳞癌细胞的增殖与迁移能力;与永生化食管鳞状上皮细胞相比,食管鳞癌细胞系SLC52A3c的表达水平明显降低;与正常食管黏膜组织相比,SLC52A3c在食管鳞癌组织中异常显著低表达,其表达水平与食管鳞癌患者无瘤生存时间显著正相关。结论SLC52A3c高表达可明显抑制食管鳞癌细胞的增殖与迁移能力;SLC52A3c在食管鳞癌细胞系和食管鳞癌组织中均明显低表达;SLC52A3c高表达是食管鳞癌患者的保护性因素,可作为预警食管鳞癌患者无瘤生存期的独立预后因子。

KDR靶向RNA干扰对MCF-7细胞凋亡的影响(英文)

目的:研究KDR靶向RNA干扰对MCF-7细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制。方法:采用阳离子脂质体Lipofecta-mine2000TM作为转染试剂将人KDR基因的siRNA转染人类乳腺细胞株MCF-7,诱RNAi,采用Hoechst33258染色和半定量RT-PCR检测Caspase-3、survivin的mRNA表达及细胞凋亡变化;比色法检测Caspase-3的活性;利用免疫组织化学方法检测survivin的表达,并用图像分析仪分析蛋白表达强度。结果:靶向KDR的siRNA转染MCF-7后,Caspase-3的mRNA表达上调,survivin基因mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论:KDRsiRNA通过减少乳腺癌细胞survivin的表达,增加Caspase-3表达来促进肿瘤细胞凋亡,发挥其抗肿瘤作用。

把握条件,正确运用规律

功能问题是高中物理的重点,也是难点,又是高考的热点。电磁感应问题在高考中的命题频率也较高,且综合能力较强,而电磁感应与能量知识相结合的综合题的分析与计算,有利于高考五种能力的考察,有利于高考选拔人才,是不容忽视的考点,更是令考生头疼的首要。