等温扩增荧光技术快速检测沙门氏菌的研究

本文研究并建立等温扩增荧光技术快速检测沙门氏菌的方法。通过对沙门氏菌的SSAQ基因序列保守区设计引物,采用最佳引物组搭配其他配套试剂建立一种针对沙门氏菌的等温扩增荧光技术快速检测方法;采用直扩法提取DNA,通过等温扩增荧光技术与常规PCR法对不同浓度沙门氏菌进行扩增检测,检测最低检测限,对其灵敏度进行评价。结果表明,所建立的针对沙门氏菌等温扩增荧光检测的方法与常规PCR法相比,等温扩增荧光检测的方法灵敏度更高,且根据干扰实验结果可知该方法对沙门氏菌具有良好的特异性,所建立的针对沙门氏菌的等温扩增荧光技术检测方法具有操作快捷、简便、反应时间较短、良好的特异性和较高的灵敏度的特点,能够用于沙门氏菌的快速检测。

等温扩增荧光法快速鉴定羊肉掺假

本文建立了快速鉴定羊肉掺假的等温扩增荧光检测方法。针对羊的线粒体Cytb基因设计两套引物,在恒温下,以直扩法处理的样本为模板进行扩增,通过特异性、灵敏度实验对该方法体系进行验证和分析。结果表明,最佳反应温度为65℃,最低检测限为5.54×10^(-5) ng·μL^(-1)。本研究建立的等温扩增荧光法快速鉴定羊肉掺假结果准确可靠、反应快速,具有良好的特异性和灵敏度,可以同时满足实验室和现场检测要求,为快速鉴定羊肉种属提供了一种新的检测方法,为其他肉类种属快速鉴定提供理论依据。

鸭细小病毒实时荧光LAMP检测方法的建立与应用

鸭细小病毒(Duck parvovirus,MDPV)是细小病毒科依赖病毒属成员。为建立鸭细小病毒(MDPV)快速、便捷、准确、灵敏度高的实时荧光LAMP检测方法,针对鸭细小病毒基因组中相对保守的特异区域设计LAMP引物组,用灭活后的病毒血清样本直接扩增,筛选出一套最优引物组并做特异性和灵敏度实验。结果表明,该引物组特异性扩增鸭细小病毒,对相似的其他病毒和衣原体检测结果为阴性;将模板10倍比例稀释后检测结果限线性范围达6个数量级,检测下限为2 copies,证明该技术方法可应用于鸭细小病毒现场快速检测。