MyDNMT1基因克隆及虾夷扇贝胚胎发育时期全基因组甲基化的变化（英文）

该研究通过基因克隆的方法获得了虾夷扇贝DNMT1基因(MyDNMT1)的cDNA,全长5 039 bp,其中包括开放阅读框4 761bp,编码1 586个氨基酸,其5’端非编码区为79 bp,3’端非编码区为199 bp。基因相对表达量分析结果显示,MyDNMT1表达起初呈下降趋势,发育至担轮幼虫时期骤然升高,之后再次降低。发育不同时期整体甲基化水平测定结果显示,全基因组甲基化水平最初呈上升趋势,至囊胚期达到最高,随后降低至担轮幼虫时期后再次升高,发育至早期面盘幼虫时期整体甲基化水平再次下降。结合基因相对表达量分析,全基因组甲基化水平动态变化可能是MyDNMT1基因表达与其酶反应之间存在延迟的表现,且推测发育至担轮幼虫后,全基因组甲基化水平的变化与发育过程中出现细胞分化有关。

中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析

为研究细胞色素CYP2基因在中华绒螯蟹蜕皮及生长发育中的作用,本试验通过逆转录聚合酶链式RT-PCR反应以及cDNA末端快速扩增RACE技术获得了中华绒螯蟹CYP2基因cDNA全长。用实时荧光定量PCR技术,分析该基因在中华绒螯蟹蜕皮过程中各组织的相对表达量。试验结果显示,中华绒螯蟹CYP2的cDNA全长1772bp,编码491个氨基酸序列,包括一个84bp的5′端非编码区,一个212bp的3′端非编码区、一个1475bp的开放阅读框,经BLAST比对,该核苷酸序列与岸蟹、三疣梭子蟹的相似性分别为66%、64%。实时荧光定量PCR结果显示,中华绒螯蟹蜕皮前,CYP2基因在鳃中的表达量相对最高;在肝胰脏、肌肉中表达量略低于鳃;在Y器官、眼柄、胸神经节、脑神经节、肠中少量表达;在心和胃中表达量最低。中华绒螯蟹在不同的蜕皮时期中,通过荧光定量试验得出,肝胰脏中CYP2基因表达量在蜕皮前期和蜕皮期最高;眼柄中CYP2基因表达量从蜕皮期到蜕皮后期有上升趋势;鳃中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高;Y器官、脑神经节和肠中CYP2基因表达量在蜕皮期最高;肌肉中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高;胸神经节和胃中CYP2基因表达量在蜕皮后期最高;Y器官中CYP2基因在蜕皮前期表达量高于蜕皮后期和蜕皮期。以上试验结果表明,CYP2对中华绒螯蟹蜕皮生长中的调控可能起到重要作用。

温度变化对刺参(Apostichopus japonicus)补体AjC3 mRNA和MicroR137活性的影响

本研究分析了温度对刺参AjC3 mRNA活性、MicroR-137表达的影响及MicroR-137和AjC3mRNA活性的相关性。研究结果表明不同温度下AjC3 mRNA和MicroR-137的表达量不同;低温对刺参的免疫反应有抑制作用;AjC3 mRNA在脂多糖刺激下呈现先升高后下降的趋势,而MicroR-137则是呈现先降低后升高的趋势。实验表明,温度影响AjC3 mRNA的表达,对MicroR-137的表达影响不明显;MicroR-137和AjC3 mRNA之间存在负相关性,可能调控AjC3 mRNA的表达。