病毒性脑炎患儿血清高迁移率族蛋白-1与神经损伤和炎症反应的相关性研究

目的 探讨病毒性脑炎患儿血清高迁移率族蛋白-1(HMGB1)与神经损伤和炎症反应的相关性。方法 选取2019年10月—2021年10月襄阳市中心医院收治的94例病毒性脑炎患儿作为研究组。根据研究组神经损伤程度细分为轻度组37例,中度组31例,重度组26例。另取同期该院健康体检儿童86例作为对照组。测定所有研究对象血清HMGB1、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用Pearson相关性分析病毒性脑炎患儿血清HMGB1水平与NSE、MBP、IL-1β、TNF-α水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析病毒性脑炎患儿血清HMGB1水平对重度神经损伤的诊断效能。结果 研究组血清HMGB1、NSE、MBP、IL-1β、TNF-α水平高于对照组(P <0.05)。重度组血清HMGB1、NSE、MBP、IL-1β、TNF-α水平高于中度组和轻度组(P <0.05),中度组高于轻度组(P <0.05)。Pearson相关性分析结果显示,病毒性脑炎患儿血清HMGB1水平与NSE、MBP、IL-1β、TNF-α水平呈正相关(r=0.445、0.391、0.354和0.386,均P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,病毒性脑炎患儿血清HMGB1水平评估重度神经损伤的最佳截断点为20.28 ng/mL,敏感性为88.46%(95%CI:0.698,0.976),特异性为94.12%(95%CI:0.856,0.984),AUC为0.948(95%CI:0.882,0.983)。结论 病毒性脑炎患儿血清HMGB1水平与神经损伤和炎症反应密切相关,血清HMGB1水平可作为评估患儿神经损伤的敏感指标。

miR-660-3p靶向NFAM1对RSV诱导支气管上皮细胞凋亡及炎症因子分泌的影响

目的探讨微小RNA-660-3p(miR-660-3p)靶向具有ITAM基序1的NFAT活化蛋白(NFAM1)对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导支气管上皮细胞凋亡和炎症因子分泌的影响。方法体外传代培养人支气管上皮细胞16HBE。取对数生长期16HBE细胞,随机分为对照组、RSV组、miR-660-3p+RSV组、miR-NC+RSV组、pcDNA-NC+RSV组、pcDNA-NFAM1+RSV组、miR-660-3p+pcDNA-NC+RSV组、miR-660-3p+pcDNA-NFAM1+RSV组,miR-NC+RSV组转染NC mimics,miR-660-3p+RSV组转染miR-660-3p mimics,pcDNA-NFAM1+RSV组转染pcDNA-NFAM1,pcDNA-NC+RSV组转染pcDNA-NC,miR-660-3p+pcDNA-NC+RSV组共转染pcDNA-NC和miR-660-3p mimics,miR-660-3p+pcDNA-NFAM1+RSV组共转染pcDNA-NFAM1和miR-660-3p mimics,对照组和RSV组不予转染;除对照组外,其余各组均予RSV感染,MOI设定为0.0001。收集各组细胞,采用RT-qPCR法检测miR-660-3p、NFAM1 mRNA表达,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测Cleaved-Caspase-3、NFAM1蛋白表达;收集各组培养上清液,采用ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1β。通过starBase数据库预测NFAM1与miR-660-3p的靶向结合位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-660-3p与NFAM1的靶向调控关系。结果与对照组比较,RSV组miR-660-3p表达降低,NFAM1 mRNA与蛋白及Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高,细胞凋亡率及培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。与miR-NC+RSV组比较,miR-660-3p+RSV组miR-660-3p表达升高,Cleaved-Caspase-3蛋白表达以及细胞凋亡率和培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低(P均<0.05)。与pcDNA-NC+RSV组比较,pcDNA-NFAM1+RSV组NFAM1 mRNA、Cleaved-Caspase-3蛋白表达以及细胞凋亡率和培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。经starBase数据库预测,NFAM1的3′非翻译区存在与miR-660-3p的结合位点。双荧光素酶报告基因实验结果显示,相较于共转染NC mimics与NFAM1-WT的16HBE细胞,共转染miR-660-3p mimics与NFAM1-WT的16HBE细胞荧光素酶活性下降(P<0.05);相较于共转染NC mimics与NFAM1-MUT的16HBE细胞,共转染miR-660-3p mimics与NFAM1-MUT的16HBE细胞荧光素酶活性变化不明显(P>0.05)。与miR-660-3p+pcDNA-NC+RSV组比较,miR-660-3p+pcDNA-NFAM1+RSV组Cleaved-Caspase-3蛋白表达以及细胞凋亡率和培养上清液TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P均<0.05)。结论miR-660-3p可通过靶向负调控NFAM1抑制RSV诱导支气管上皮细胞凋亡及炎症因子分泌。

儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后淋巴细胞增殖性疾病(PTLD)的诊治及预后

目的探讨儿童异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后淋巴细胞增殖性疾病(allo-HSCT post-transplantation lymphoproliferative disease,PTLD)的诊治及预后。方法收集接受alloHSCT的患儿200例,其中5例患儿发生PTLD。分析allo-HSCT后EB病毒重激活的危险因素,并结合5例患者的临床资料分析allo-HSCT后PTLD患者的治疗及预后。结果对EB病毒重激活的6种危险因素进行单因素分析发现,性别、血型与EB病毒重激活的发生无相关性(P>0.05),原发病种、HLA匹配度、干细胞来源、GAHD与EB病毒重激活的发生率相关(P<0.05)。多因素分析发现,HLA完全相符的患儿EB病毒重激活的发生率较低(P<0.05),发生GAHD的患者发生EB病毒重激活的概率明显增加(P<0.05)。5例PTLD患者的EBV-DNA载量较高,均在104以上;PTLD患者的平均发病时间为65.6 d。5例患者随访过程中,1例因多脏器功能衰竭而死亡。结论 PTLD的发生与EB病毒的重激活密切相关,可通过降低危险因素的发生率、预防阶段使用利妥昔单抗清除供者和宿主的记忆B细胞等方法,降低EB病毒的重激活,从而减少PTLD的发生。

普米克令舒与地塞米松治疗儿童急性喉炎的疗效对比

目的比较普米克令舒与地塞米松治疗儿童急性喉炎疗效的差异。方法根据治疗方法将急性喉炎儿童分为普米克令舒治疗组(PUL组)和地塞米松治疗组(DEX组),比较2组儿童疗效及症状体征消失时间的差异。结果 PUL组儿童治疗有效率显著高于DEX组(P<0.05)。2组儿童治疗3d和治疗后评分均较治疗前显著降低(P<0.05),PUL组儿童治疗3 d和治疗后呼吸困难、声嘶、犬吠样咳嗽和喉鸣评分均显著低于DEX组(P<0.05)。PUL组儿童呼吸困难、声嘶、犬吠样咳嗽和喉鸣消失时间显著低于DEX组3 d(P<0.05)。结论普米克令舒可显著改善急性喉炎儿童患者症状体征,疗效显著高于地塞米松,而无明显不良反应。

正元胶囊辅助培门冬酶联合化疗治疗儿童急性淋巴细胞白血病的临床分析

目的探讨正元胶囊辅助培门冬酶联合化疗治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的疗效及对患儿血清中白细胞介素(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响。方法将90例儿童ALL随机分为对照组和观察组,均45例。对照组采取培门冬酶注射液组成的VDPAP方案。观察组在对照组基础上于缓解期内服正元胶囊,4粒/次,3次/天,连续治疗8周。比较2组近期疗效、治疗6个月和1年后的无事件生存率以及不良反应发生率。检测2组儿童ALL血清中IL-6和TNF-α的水平。结果观察组患儿的近期总缓解率为84.44%,显著高于对照组的64.44%(P<0.05)。对照组6个月和1年无事件生存率分别为95.56%和86.67%,观察组为97.78%和93.33%,2组无事件生存率比较均无统计学差异(P>0.05)。观察组患儿的肝功能损害、骨髓抑制、低白蛋白血症、口腔溃疡、胃肠道反应及凝血功能异常的发生率均少于对照组,但2组间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组治疗后患儿血清中IL-6和TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01)。结论正元胶囊辅助培门冬酶联合化疗治疗儿童ALL的疗效明显,且安全性好,可能与其提高儿童ALL血清中IL-6和TNF-α水平有关。

他克莫司替代治疗环孢素A不耐受的非重型再生障碍性贫血的临床观察

目的探讨他克莫司（FK506）替代治疗环孢素A（Cs A）不耐受的非重型再生障碍性贫血（AA）的疗效。方法选择Cs A治疗无效或不耐受的非重型AA患者39例。按血药浓度75∶1的比例将Cs A替换为FK506,维持血药浓度在4~6μg·L-1。治疗后,根据疗效将患者分为A组（Cs A无效换用FK506有效）、B组（Cs A有效换用FK506仍有效）、C组（Cs A无效换用FK506仍无效）三组。结果替换治疗后三组患者Cs A和FK506血药浓度差异无统计学意义（P〉0.05）。替换FK506后,共有24例患者获得血液改善,有效率为61.54%。治疗后白细胞计数、血小板计数和血红蛋白浓度均显著改善（P〈0.05）,但是A、B组差异无统计学意义（P〉0.05）。替换FK506治疗后,肾功能损害、神经系统损害和齿龈增生得到明显改善（P〈0.05）。结论 FK506替代治疗Cs A不耐受的非重型AA可显著改善血液学指标及Cs A继发的肾功能损伤的不良反应。FK506可作为Cs A的一个替代方案用于AA的治疗。

地西他滨联合参麦注射液治疗儿童急性髓系白血病的临床研究

目的探讨地西他滨联合参麦注射液治疗儿童急性髓系白血病的疗效、安全性。方法将急性髓系白血病患儿80例随机分为对照组40例和治疗组40例。对照组给予地西他滨和减量FLAG联合方案。治疗组在对照组基础上予参麦注射液20 m L,1次/天,连续21 d。比较2组中医证候积分、不良反应情况、临床疗效及死亡率等。结果治疗后,治疗组患儿的发热、口干和乏力积分明显少于对照组(P<0.01)。治疗组患儿的不良反应发生率均少于对照组,其中中性粒细胞减少和肝损伤明显少于对照组(P<0.05)。治疗组的总有效率为77.5%,显著高于对照组为55.0%(P<0.05)。治疗组患儿的复发率和死亡率分别为22.5%和17.5%,均明显少于对照组的47.5%和40.0%(P<0.01)。结论地西他滨联合参麦注射液治疗儿童急性髓系白血病具有增效减毒的作用,且可降低死亡率,值得临床借鉴。

孕妇血清叶酸水平与胎儿神经管畸形及妊娠结局的相关性分析

目的探讨孕妇血清叶酸状况与胎儿神经管畸形及妊娠结局的关系。方法选取2008-01—2013-06就诊的孕龄26-40周的孕妇5284例,其中不良妊娠结局组孕妇792例,正常妊娠结局组孕妇4492例;筛选出神经管畸形患儿母亲96例作为神经管畸形组,对照组为同期内于我院检查的正常孕妇120例。对比神经管是否畸形及妊娠结局情况与孕妇血清的叶酸水平。结果年龄、孕次、孕周半胱氨酸比较差异无统计学意义（P〉0.05）;而神经管畸形组叶酸水平明显低于对照组;不良妊娠结局孕妇叶酸水平明显低于正常妊娠结局孕妇,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论较低的血清叶酸水平可能会增加神经管畸形和不良妊娠结局的风险。

miR-339对气道平滑肌细胞增殖及ERK1/2通路的影响

目的对miR-339进行过表达后,探究其对气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路的影响。方法体外培养ASMCs细胞,设置对照组、模型组(5μg·L^(-1)TGF-β_(1))、miR-NC组(miR-NC+5μg·L^(-1)TGF-β_(1))、miR-339 mimics组(miR-339 mimics+5μg·L^(-1)TGF-β_(1))、miR-339 mimics+PD98059组(miR-339 mimics+10μmol·L^(-1)ERK1/2抑制剂PD98059+5μg·L^(-1)TGF-β_(1))。采用qRT-PCR检测各组miR-339的表达;MTT法检测ASMCs细胞活力;流式细胞术检测ASMCs细胞凋亡情况;Western blot检测ASMCs细胞内增殖、凋亡及通路相关蛋白表达情况。结果与对照组相比,模型组ASMCs细胞存活率、c-Myc、CyclinD1、PCNA、Bcl-2、p-ERK1/2/ERK1/2表达水平显著增加(P<0.05),细胞凋亡率、Caspase-3、Bax表达水平显著降低(P<0.05);miR-339 mimics组与模型组比较、miR-339 mimics+PD98059组与miR-339 mimics组比较,ASMCs细胞存活率、c-Myc、CyclinD1、PCNA、Bcl-2、p-ERK1/2/ERK1/2表达水平均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Caspase-3、Bax表达水平均显著增加(P<0.05)。结论miR-339过表达对ASMCs细胞增殖的抑制,可能与抑制ERK1/2信号通路有关。

芪丹益肺通窍颗粒对变应性鼻炎大鼠免疫功能的影响及机制

目的探究芪丹益肺通窍颗粒对变应性鼻炎(AR)大鼠免疫功能的影响及对白细胞介素-33(IL-33)/生长刺激表达基因2(ST2)通路的调控作用。方法取SD大鼠分为正常对照组、模型组(卵白蛋白致敏)、中药组(芪丹益肺通窍颗粒,28 g/kg)、pcDNA-IL-33组(尾静脉注射含IL-33过表达重组蛋白载体)、pcDNA-NC组(尾静脉注射pcDNA-IL-33阴性对照载体)、中药+pcDNA-IL-33组,每组20只;建立AR模型。观察大鼠鼻部症状,通过行为症状评分表,对大鼠鼻部AR症状进行评分;采用ELISA检测试剂盒检测血清免疫球蛋白(IgE)、白细胞介素-8(IL-8)、趋化因子CC基序配体2(CCL2)水平;HE染色观察鼻黏膜组织病理变化;免疫组化法检测鼻黏膜组织IL-33、ST2阳性表达水平;流式细胞术检测辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2);采用ELISA检测试剂盒检测鼻腔灌洗液中免疫因子如肿瘤坏死因子-β(TNF-β)、白细胞介素(IL-2、IL-6、IL-9)水平;Western blot法检测Th1转录因子(T-bet)、Th2转录因子(Gata3)、IL-33、髓样分化蛋白88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达。结果模型组大鼠鼻部AR症状评分升高,鼻黏膜上皮脱落及炎性浸润等病理损伤加重,嗜酸性粒细胞数目及血清IgE、CCL2、IL-8水平升高、Th1/Th2比例降低,IL-33/ST2通路及其相关蛋白表达升高(P<0.05)。芪丹益肺通窍颗粒可改善大鼠鼻部AR症状评分及鼻黏膜组织损伤、上调Th1/Th2比例、抑制IgE及炎症因子水平(P<0.05)。中药+pcDNA-IL-33组可逆转中药组的上述作用。结论芪丹益肺通窍颗粒可能通过抑制IL-33/ST2通路激活,改善大鼠Th1/Th2免疫功能失衡,缓解大鼠AR症状。

柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎小鼠肺功能及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响

目的探究柴葛芩连汤对解脲脲原体肺炎模型小鼠肺功能以及CARDS TX/NLRP3信号通路的影响。方法60只小鼠分为对照组,肺炎组,柴葛芩连汤低、高剂量组和阿奇霉素组。鼻腔滴注解脲脲原体菌液进行造模,柴葛芩连汤低、高剂量组灌胃5.4、16.2 g/kg柴葛芩连汤;阿奇霉素组灌胃90 mg/kg阿奇霉素溶液2个周期(1周期为7 d,前3 d连续灌胃阿奇霉素溶液,后4 d灌胃等量蒸馏水);对照组和肺炎组灌胃等量蒸馏水,连续14 d。采用动物肺功能分析仪检测肺功能,ELISA法检测肺泡灌洗液中炎症因子水平,HE染色观察肺组织病理变化,RT-qPCR和Western blot法检测肺组织肺炎支原体外毒素(CARDS TX)、炎症小体(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,肺炎组小鼠PEF、FEV0.1、FEF-50降低(P<0.05),IL-6、TNF-α水平及CARDS TX、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),肺泡结构模糊,有炎性细胞浸润;与肺炎组比较,柴葛芩连汤各剂量组和阿奇霉素组小鼠PEF、FEV0.1与FEF-50升高(P<0.05),IL-6、TNF-α水平及CARDS TX、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),肺组织病理变化有不同程度缓解。结论柴葛芩连汤可以改善解脲脲原体肺炎小鼠受损的肺功能,该作用可能与抑制CARDS TX/NLRP3信号通路有关。

格隆溴铵对高氧诱导幼鼠急性肺损伤的影响及其机制研究

目的探究格隆溴铵对高氧诱导幼鼠急性肺损伤(ALI)的影响及作用机制。方法从30只SD幼鼠中随机选取10只为对照组,其余幼鼠成功复制高氧诱导的ALI模型,随机分为ALI组、格隆溴铵组,每组10只。格隆溴铵组雾化吸入0.8 mg/(kg·d)格隆溴铵,ALI组、对照组吸入等体积生理盐水,连续给药7 d后,测量幼鼠肺组织湿/干重比值(W/D)、肺指数,检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及血清活性氧基团(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,比较肺组织病理学变化及Toll样受体4/髓分化因子88(TLR4/MyD88)通路蛋白的表达。结果与对照组比较,ALI组W/D及肺指数升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD水平升高(P<0.05),ROS水平降低(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白相对表达量上调(P<0.05);与ALI组比较,格隆溴铵组W/D及肺指数降低(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD水平降低(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白相对表达量下调(P<0.05)。结论格隆溴铵能改善血清炎症指标及氧化应激指标,降低高氧诱导的ALI,其作用机制可能与TLR4/MyD88通路有关。

人参皂苷通过NF-κB/NLRP3途径改善狼疮性肾炎小鼠肾损伤

目的探究人参皂苷对狼疮性肾炎(LN)小鼠肾损伤及核因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路的影响。方法将60只红斑狼仓小鼠随机均分为模型组、人参皂苷低、中、高剂量组、醋酸泼尼松组,另取12只C57BL/6小鼠为对照组。检测各组小鼠一般情况、肾功能指标;HE染色检测肾组织病理形态改变;免疫荧光染色检测肾组织IgG免疫复合物沉积;酶联免疫吸附法检测血清抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)抗体含量及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)含量;Western blotting检测肾组织NF-κB/NLRP3通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠精神萎靡、反应迟钝、活动减少、食欲减退、毛色暗淡,体质量明显减轻,肾组织发生明显病理损伤,24 h尿蛋白、血清肌酐(Cr)、ANA、抗dsDNA抗体、IL-1β及IFN-γ含量、肾组织IgG免疫荧光强度及NF-κB、NLRP3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,人参皂苷低、中、高剂量组及醋酸泼尼松组小鼠以上观察指标均得到明显改善,且人参皂苷各组指标随剂量递增而改善更明显(P<0.05)。结论人参皂苷可下调NF-κB/NLRP3通路蛋白表达,抑制LN小鼠肾组织炎症反应,减轻IgG免疫复合物沉积,改善其肾功能。

LncRNACASC7、miR-21在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的表达及意义

目的 检测长链非编码RNA(LncRNA)癌易感性候选基因7(CASC7)、微小RNA-21(miR-21)在支气管哮喘急性发作期患儿外周血中的表达水平并分析其临床意义。方法 选取2020年6月至2021年10月在襄阳市中心医院就诊的支气管哮喘急性发作期患儿115例(急性发作期组)以及支气管哮喘缓解期患儿97例(缓解期组),根据病情程度将急性发作期组患儿分为轻度组45例,中度组39例,重度组31例。另收集同期体检健康儿童100例(健康人对照组)。采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测各组外周血LncRNA CASC7、miR-21的表达水平;检测第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 1 second, FEV1)、用力肺活量(forced vital capacity, FVC)、最大呼吸峰流速(peak expiratory flow, PEF)等肺功能指标;采用免疫比浊法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)的表达,ELISA法检测TNF-α、IL-6的表达水平;Pearson法分析LncRNA CASC7、miR-21的表达与hs-CRP、TNF-α、IL-6及FEV1、FVC、PEF的相关性,并进一步分析LncRNA CASC7与miR-21的相关性;ROC曲线分析LncRNA CASC7、miR-21对支气管哮喘急性发作期患儿的鉴别诊断价值。结果 RT-qPCR检测结果显示,健康人对照组、急性发作期组、缓解期组患儿外周血LncRNA CASC7的表达水平(1.09±0.18 vs 0.93±0.12 vs 0.65±0.10)依次降低(F=289.447,P<0.05),miR-21的表达水平(1.05±0.14 vs 1.72±0.35 vs 2.64±0.55)依次升高(F=440.557,P<0.05);轻度组、中度组、重度组哮喘患儿外周血LncRNA CASC7的表达水平(0.78±0.09 vs 0.67±0.09 vs 0.44±0.08)依次降低(F=140.168,P<0.05),而miR-21的表达水平(2.34±0.32 vs 2.63±0.53 vs 2.98±0.42)依次升高(F=20.625,P<0.05);Pearson相关性分析显示,支气管哮喘急性发作期患儿外周血LncRNA CASC7与hs-CRP、TNF-α、IL-6的水平呈负相关(r分别为-0.423、-0.375、-0.398,P均<0.05),而与FEV1、FVC、PEF测定值呈正相关(r分别为0.321、0.453、0.441,P均<0.05);miR-21与hs-CRP、TNF-α、IL-6水平呈正相关(r分别为0.479、0.501、0.373,P均<0.05),而与FEV_(1)、FVC、PEF测定值呈负相关(r分别为-0.334、-0.496、-0.505,P均<0.05);LncRNA CASC7与miR-21的表达呈负相关(r=-0.568,P<0.05);LncRNA CASC7鉴别诊断支气管哮喘急性发作期与缓解期的ROC曲线下面积(AUC^(ROC))为0.863(95%CI:0.809~0.906),当cut-off值为0.76时,其敏感性为78.26%,特异性82.47%;miR-21鉴别诊断二者的AUC^(ROC)为0.922(95%CI:0.877~0.954),当cut-off值为2.14时,其敏感性为82.61%,特异性为83.51%;二者联合检测鉴别诊断二者的AUC^(ROC)为0.955(95%CI:0.918~0.979),敏感性为89.57%,特异性为88.66%。结论 支气管哮喘急性发作期患儿外周血中LncRNA CASC7水平下调,miR-21水平上调,且与病情严重程度有关;二者联合可作为支气管哮喘急性发作期的潜在辅助诊断指标。

PDTC调节线粒体功能障碍与Klotho蛋白表达对大鼠脓毒症合并急性肾损伤的影响

目的:探究吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对脓毒症合并急性肾损伤(AKI)大鼠线粒体功能与Klotho表达的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、PDTC组,每组20只,模型组和PDTC组大鼠通过盲肠结扎穿刺(CLP)制备脓毒症AKI模型,造模后1 h,PDTC组大鼠腹腔注射50 mg/kg PDTC,模型组与对照组注射同等剂量生理盐水,每日1次,持续1周。ELISA法检测大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白(24 h UP)水平,硫代巴比妥酸法检测肾组织丙二醛(MDA)水平,微板法检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,光谱光度测量工具检测肾组织总抗氧化能力(T-AOC)水平,苏木精—伊红(HE)染色和Masson染色观察肾组织病理形态学改变与胶原沉积现象,TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡,免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾组织Klotho蛋白和mRAN表达水平,免疫荧光染色检测肾组织细胞色素C氧化酶Ⅳ(COXⅣ)和自噬标记轻链3(LC3)的共定位与表达以来评估线粒体水平,western blotting法检测肾皮质匀浆细胞色素-C(Cyto-C)、抗增殖蛋白(Prohibitin)蛋白表达。结果:相较于模型组,PDTC组血清SCr、BUN含量及24 UP水平均显著下降(均P<0.05),肾组织SOD、T-AOC含量显著增加,MDA含量显著减少(P<0.05),肾组织病理改变得到明显改善,胶原沉积减少,TUNEL阳性细胞率显著降低(P<0.05),Klotho蛋白与mRNA表达水平均显著上调(P<0.05),同时,LC3水平下降,肾皮质线粒体Cyto-C、Prohibitin蛋白表达显著升高(P<0.05),肾皮质胞浆Cyto-C、Prohibitin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:PDTC可通过调节线粒体功能和Klotho表达来改善大鼠脓毒症合并AKI,并有效减轻肾组织的氧化损伤。

miR-219a-5p在癫痫患儿血清中的表达及临床意义

目的 探讨癫痫患儿血清中微小RNA-219a-5p(miR-219a-5p)及钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK2G)表达水平、相关性及临床意义。方法 选取2017年6月至2019年6月本院收治的46例癫痫患儿(研究组)和同期50例健康儿童(对照组)为研究对象。采用荧光定量PCR技术检测其血清miR-219a-5p、CaMK2G水平;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-219a-5p、CaMK2G对癫痫患儿的诊断价值;Pearson相关法分析癫痫患儿血清miR-219a-5p、CaMK2G表达水平的相关性。结果 与对照组相比,研究组患儿血清miR-219a-5p表达水平明显较高,CaMK2G表达水平明显较低(t值分别是5.314、3.855,P<0.05);ROC分析结果显示,血清miR-219a-5p、CaMK2G诊断癫痫患儿的曲线下面积(AUC)分别为0.807(95%CI:0.714~0.881)、0.752(95%CI:0.653~0.834),其灵敏度分别是69.57%、78.26%,特异度分别是80.00%、62.00%;血清miR-219a-5p与CaMK2G联合预测癫痫患儿的AUC为0.860(95%CI:0.774~0.922),灵敏度和特异度分别为97.83%和60.00%;Pearson相关分析显示,癫痫患儿血清miR-219a-5p、CaMK2G水平呈负相关关系(r=-0.424,P<0.05)。结论 癫痫患儿血清miR-219a-5p表达上调,CaMK2G表达下调,miR-219a-5p可能靶向负调控CaMK2G表达,参与癫痫的发生发展。

LncRNA PVT1通过调节miR-214/STAT6轴减轻哮喘模型小鼠气道炎性反应

目的探究抑制lncRNA PVT1表达对支气管哮喘小鼠气道炎性反应的作用,以及对miR-214/STAT6轴的影响。方法将小鼠随机分成对照组、模型组[用卵清蛋白(OVA)诱导哮喘]、lncRNA PVT1抑制组和lncRNA PVT1 NC组(尾静脉注射lncRNA PVT1抑制物或其阴性对照),每组12只。血细胞计数仪计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数;ELISA试剂盒检测BALF上清液中白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-13(IL-13)浓度;试剂盒检测血清中IgE水平;HE染色观察肺组织炎性细胞浸润情况并进行评分;RT-qPCR检测肺组织中miR-214和STAT6 mRNA水平;Western blot检测肺组织中STAT6和p-STAT6蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测分析lncRNA PVT1与miR-214靶向关系。结果与对照组相比,模型组小鼠BALF中炎性细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数、IL-4、IL-5、IL-13水平、血清中IgE水平及肺组织中炎性细胞浸润程度评分、STAT6 mRNA和蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.05),而肺组织中miR-214水平显著降低(P<0.05)。与模型组和lncRNA PVT1 NC组相比,lncRNA PVT1抑制组BALF中炎性细胞总数、巨噬细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数、IL-4、IL-5、IL-13水平、血清中IgE水平及肺组织中炎性细胞浸润程度评分、STAT6 mRNA和蛋白磷酸化水平均显著降低(P<0.05),而肺组织中miR-214水平显著升高(P<0.05)。miR-214与lncRNA PVT1具有明显的靶向关系(P<0.05)。结论抑制lncRNA PVT1可能通过靶向提高miR-214表达水平,抑制STAT6磷酸化途径,减轻哮喘小鼠的气道炎性反应。

罗氟司特通过mTOR/ULK1/Atg13通路改善支气管哮喘小鼠气道炎症反应的研究

目的探讨罗氟司特对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬激活激酶1(ULK1)/自噬相关蛋白13(Atg13)通路的调控作用,以及对支气管哮喘(BA)小鼠气道炎症反应的影响。方法将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、罗氟司特组(1.0 mg/kg)、自噬抑制剂(3-甲基腺嘌呤,3MA)组(10.0 mg/kg)、自噬激活剂[mTOR抑制剂雷帕霉素,1.0 mg/kg]组,罗氟司特+雷帕霉素组(1.0 mg/kg+1.0 mg/kg),每组10只。用卵清蛋白致敏法诱导建立小鼠BA模型,各组小鼠均给药4周。末次给药结束后,应用动物肺功能仪检测小鼠肺功能;取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测炎症细胞数目;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BALF中γ-干扰素(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木精-伊红(HE)及过碘酸-雪夫(PAS)染色检测肺组织结构变化及气道杯状细胞化生情况;透射电镜下观察自噬泡形成情况;TUNEL法检测气道上皮细胞凋亡情况;蛋白质印迹法(Western blot)检测Atg13、磷酸化Atg13(p-Atg13)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、ULK1特定位点Ser757蛋白(ULK1 Ser757)及其磷酸化蛋白(p-ULKl Ser757)、自噬标记蛋白微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、自噬相关蛋白(Beclin1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、白细胞介素-33(IL-33)、黏液高分泌性标志蛋白(黏蛋白MUC5AC)表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠肺功能下降,肺组织炎症细胞聚集及杯状细胞化生症状严重,mTOR/ULK1/Atg13通路磷酸化蛋白表达降低,自噬相关蛋白表达水平、炎症因子水平及凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,罗氟司特组及3MA组小鼠气道上皮细胞自噬及凋亡减少,mTOR/ULK1/Atg13通路磷酸化蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。雷帕霉素可逆转罗氟司特的上述缓解作用(P<0.05)。结论罗氟司特可通过促进mTOR/ULK1/Atg13通路磷酸化活化,阻断自噬,抑制气道炎症及上皮细胞凋亡的发生,进而缓解BA病理症状。

急诊新生儿抗菌药物应用的临床分析

目的分析探讨妇幼保健院急诊新生儿抗菌药物应用的临床现状,并提出相关的控制措施,为新生儿临床合理用药提供指导依据。方法选择2013年8月-2015年7月于妇幼保健院急诊接受治疗1 130例新生儿为研究对象,回顾性分析并统计其抗菌药物的用药及不良反应发生率,数据采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果1 130例急诊新生儿667例使用了抗菌药物,使用率为59.0%,其中使用率最高的药物为头孢克洛,其次为头孢曲松、阿莫西林等;667例使用抗菌药物的新生儿中共有74例发生不良反应,不良反应发生率为11.1%,急诊科存在较多不合理应用抗菌药物的情况,需引起注意。结论对于妇幼保健院新生儿急诊科抗菌药物的用药需加强行政干预,提高临床控制,杜绝抗菌药物的滥用。

n-3多不饱和脂肪酸对2型糖尿病大鼠肝脏脂质沉积的影响

目的观察n-3多不饱和脂肪酸(n-3-PUFAs)对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和肝脏脂质沉积的影响,并探讨其可能的分子机制。方法用高脂高糖饲料喂养加链脲佐菌素(STZ)腹腔注射方法建立的2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分为模型组8只、n-3-PUFAs组和格列喹酮组各10只,另设正常对照组10只,持续灌胃12周。比较用药前、用药6周和12周末各组大鼠体重、血清空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平。断头处死大鼠后,比较各组大鼠腹腔内脂肪指数、肝脏指数、肝脏脂肪变程度和肝组织TG、TC含量;并用RT-PCR法检测肝组织固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA的表达;Western印迹法检测肝组织SREBP-1蛋白的表达。结果n-3-PUFAs组大鼠腹腔脂肪指数和体重均较模型组明显增加(P<0.01),血清TG降低(P<0.01),肝脏TG含量、肝指数及肝脏脂肪变程度记分升高(P<0.01),肝组织SREBP-1c、FAS和ACCmRNA表达升高(P<0.01),肝组织SREBP-1蛋白表达升高(P<0.01)。结论n-3-PUFAs能降低血清TG,但会导致腹腔脂肪增加及肝脏脂质沉积,与n-3-PUFAs不能抑制2型糖尿病状态下SREBP-1c及其下游脂肪合成相关酶FAS及ACC的表达有关。