大麻受体激动剂WIN对白血病K562细胞增殖和诱导凋亡作用的研究

目的探讨大麻受体激动剂WIN-55,212-2(WIN)对白血病K562细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法将细胞分成对照组和不同剂量大麻受体激动剂WIN用药组。CCK-8测定WIN对K562细胞增殖的影响;DAPI染色观察细胞核形态变化;JC-1分析线粒体膜电位变化;分光光度法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性;流式细胞仪分析细胞凋亡率变化;Western印迹法分析Bax、Bcl-2及C-myc蛋白的表达。结果与对照组相比较,5、10、20μmol/L的WIN处理K562细胞24、48 h后,增殖抑制作用明显且具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。DAPI染色和线粒体膜电位检测结果显示,K562细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率升高。WIN处理24 h后,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性均增加(P<0.05)。Western印迹法显示,Bax蛋白表达增加,C-myc、Bcl-2蛋白表达下降。结论大麻受体激动剂WIN能抑制白血病K562细胞增殖,并诱导凋亡,其机制可能通过上调Bax蛋白表达,下调C-myc、Bcl-2蛋白表达,以及促使线粒体跨膜电位下降,激活Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白而实现。

大麻素WIN55,212-2对裸小鼠肝癌移植瘤及PPARγ表达的影响

目的:探讨大麻素WIN55,212-2(WIN)对裸小鼠肝癌移植瘤及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、c-myc表达的影响。方法:采用5 mg/kg的WIN对荷瘤裸小鼠进行瘤周皮下注射干预15 d,每3天测量1次瘤体体重和体积,计算肿瘤体积和抑瘤率。荧光定量PCR和Western blotting测定Hep G2移植瘤中PPARγ和c-myc的表达情况。结果:WIN对Hep G2细胞移植瘤具有抑制作用,抑瘤率为66.00%,荧光定量PCR结果显示WIN抑制Hep G2细胞移植瘤c-myc在mRNA水平的表达,促进Hep G2细胞移植瘤PPARγ在mRNA水平表达。Western blotting结果显示WIN抑制Hep G2细胞移植瘤c-myc在蛋白水平的表达,促进Hep G2细胞移植瘤PPARγ在蛋白水平表达。结论:WIN能够抑制Hep G2细胞移植瘤的生长和c-myc的表达,并上调PPARγ的表达。

WIN55,212 - 2 对肝癌细胞 BEL - 7402 增殖和凋亡的影响

目的探讨大麻素WIN55,212-2(WIN)对肝癌细胞BEL-7402增殖和凋亡的影响,并对其机制进行初步研究。方法将细胞分成对照组和WIN处理组,处理细胞后,利用MTT法分析WIN对BEL-7402细胞增殖的影响;DAPI染色分析各组细胞中细胞核的形态学改变;流式细胞术检测各实验组的细胞凋亡率;利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的变化;Western blot检测WIN处理细胞后Bcl-2蛋白的表达;分光光度法检测Caspase-3、-8和-9的活性。结果WIN抑制了BEL-7402细胞增殖并诱导其凋亡,两者都具有剂量依赖性;WIN处理细胞后,Caspase-3、-8和-9活性总体上呈时间依赖性升高,而且Bcl-2蛋白表达下降。结论 WIN能抑制BEL-7402细胞增殖和诱导其凋亡,WIN诱导的BEL-7402细胞凋亡可能与线粒体途径和死亡受体途径都有关。这些结果为应用WIN来治疗肝癌奠定了一个基础。