体外膜肺氧合治疗呼吸循环衰竭患者的输血特征及影响因素分析

目的分析体外膜肺氧合治疗呼吸循环衰竭患者的输血情况及影响因素,筛选输血危险因素,为评估该类患者的输血风险积累经验。方法回顾性分析2016年1月—2019年12月收治在本院急诊ICU行体外膜肺氧合(ECMO)治疗的呼吸循环衰竭患者134例(主要诊断为急性心肌梗死、心跳呼吸骤停、重症肺炎及暴发性心肌炎等)在ECMO期间的输血情况(上机当日、下机当日及全程总量),统计患者信息包括年龄、性别、体重、收缩压、术前诊断、ECMO模式、凝血功能、ECMO前是否进行心肺复苏(CPR)、ECMO转机时间及最终结局等,以Pearson相关性分析ECMO期间输血的相关因素,以多元线性逐步回归方程分析ECMO全程输注红细胞、血小板、血浆及冷沉淀的影响因素。结果134例患者ECMO期间输血126例,输血率94%。ECMO全程平均输注红细胞(6.7±0.7)U,血浆(465.5±84.2)mL,冷沉淀(1.6±0.5)U,血小板(1.4±0.2)治疗量。多元线性逐步回归方程提示女性、V-A模式、转机时间及下机当日INR是ECMO全程输注红细胞的影响因素。结论ECMO治疗的此类患者病情危重,输血率高;女性、V-A模式、长时间转机及下机当日高INR是ECMO治疗过程中输红细胞的危险因素。

RASSF1A在无损性孕妇外周血浆中胎儿ABO基因分型中的运用

目的:探讨甲基化表观遗传标志RASSF1A在O型孕妇外周血浆中胎儿ABO基因分型中的运用,以无损性预测产前胎儿ABO血型。方法:首先提取O型孕妇外周血浆游离DNA,扩增SRY及甲基化RASSF1A作为胎儿DNA存在的标志;检测血浆游离DNA中B及非O预测胎儿ABO血型;并将基因分型结果与胎儿分娩后血清学结果进行比对,以评价该方法的准确性。结果:20例标本中,11例检测出SRY,检测结果与胎儿出生后性别相符;其余9例标本酶切后均扩增出RASSF1A,证实胎儿游离DNA存在。对血浆游离DNA进行ABO基因检测,20例标本中8例标本同时扩增出非O和B,提示为B血型;5例标本只扩增出非O,未扩增出B,提示为A型;7例标本均未扩增出非O及B,提示为O型。上述预测结果与胎儿出生后ABO血清学血型一致。结论:初步建立了基于RASSF1A的O型孕妇血浆中游离DNA中胎儿ABO基因的检测程序,可用于临床无损性产前胎儿ABO血型的预测。

主动脉夹层手术患者围术期输血情况分析

目的分析主动脉夹层患者围术期成分输血情况及影响因素,探讨自体输血在主动脉夹层中的应用价值,为指导临床科学合理有效输血提供依据。方法回顾性研究本院2015—2017年156例主动脉夹层患者围术期成分输血及自体输血情况,采用Pearson相关性分析主动脉夹层患者术中异体红细胞输注量与血浆输注量的相关因素,采用多元线性回归方程分析主动脉夹层患者术中红细胞输注量的影响因素。结果 156例主动脉夹层患者围术期异体红细胞输注率99. 4%(155/156),成分输血率100%,自体输血率55. 8%(87/156)。Pearson相关性分析显示,156例主动脉夹层患者术中输注红细胞量与术前血红蛋白值、术前活化部分凝血活酶时间(APTT)、术中出血量及术中体外循环时间呈显著性相关(P<0. 05),与术前凝血酶原时间(PT)、血小板计数、纤维蛋白原(FIB)无显著相关性(P>0. 05)。术中输注血浆量与术中输注红细胞量显著相关(P<0. 01),与术前APTT无显著相关性(P>0. 05)。多元线性回归分析显示:女性、术中出血量≥1 500 m L及体外循环时间≥120 min是主动脉夹层患者术中红细胞输注量的影响因素(P<0. 05)。自体输血者(n=87)与非自体输血者(n=69)相比,术中血浆、血小板输注量,术后24 h引流量及住院天数均减少(P<0. 05)。结论主动脉夹层患者围术期输血率高,女性、术中出血量≥1500 m L及体外循环时间≥120 min是主动脉夹层患者术中红细胞输注量的主要影响因素,自体输血患者术中输血减少、预后较好。

Rh血型主要抗原配合性输注的可行性研究及效果分析

目的:比较分析南京地区部分患者及献血员恒河猴(Rhesus,Rh)血型系统主要抗原表现型分布比例及基因频率,探求Rh血型系统主要抗原配合性输注的可行性方案,并评估其效果,为精准安全输血奠定基础。方法:微柱凝胶法检测2020年1月—2021年5月南京医科大学第一附属医院在院患者(93910例)及江苏省血液中心发往本院的献血员(32872例)共计126782例红细胞Rh血型系统D、C、c、E、e抗原,计算Rh抗原表型分布及基因频率,以卡方检验统计检测率的差异,以Hardy-Weinberg平衡定律评估Rh血型分布是否符合规律。输血信息管理系统分别记录并储存患者及献血员Rh血型结果,在交叉配血前选择Rh同型或相容献血员血袋进行配合试验。结果:93910例患者RhD抗原阳性率为99.5%(93453/93910)。126782例Rh血型共检出15种表型,主要表型分布:DCCee比例为42.274%(53596/126782)、DCcEe比例为35.705%(45267/126782)、DCcee比例为9.010%(11423/126782)、DccEE比例为7.562%(9587/126782)、DccEe比例为3.813%(4834/126782),检出较罕见表型DCCEE共7例。本研究检出Rh表型分布符合Hardy-Weinberg定律。D抗原频率为99.57%,C抗原频率为88.03%,c抗原频率为57.06%,E抗原频率为48.00%,e抗原频率为92.18%;D基因频率为93.48%,C基因频率为65.48%,c基因频率为34.52%,E基因频率为27.90%,e基因频率为72.09%。单倍体DCe频率最高,为0.6369;其次为DcE,频率为0.2724。患者与献血员主要Rh表型及基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。经过27889例次Rh配合性输注,同时期Rh血型系统抗体占全部抗体的阳性率由48.53%(198/408)下降至30.25%(108/357)(P<0.05)。结论:患者与献血员Rh表现型及基因频率无差异,患者ABO同型基础上常规进行Rh配合性输注具备可行性;Rh配合性输注可以明显降低不规则抗体阳性发生率,提高输血效果。

ABO^(*) B.01等位基因c.796A>C突变所致ABO疑难血型的鉴定与分析2例

目的 总结2例罕见ABO^(*) B.01等位基因c.796A>C突变所致的ABO亚型特点,为此类血型的准确鉴定积累经验基础。方法 血清学方法检测ABO血型正反定型,序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测ABO血型基因分型,对ABO血型基因外显子1~7进行直接测序。结果 病例一、二的ABO血型血清学结果符合CisAB表型特点;其基因分型结果分别为B/O2,B/B;2例ABO基因外显子1~7测序结果:病例一为106GT,188GA,189CT,220CT,261Gdel, 297GG,526GC,646TA,657TC,681GA,703AG,771CT,796CC,803CG,829GA,930AG;病例二为261GG,297GG,526GG,657TT,703AA,796CA,803CC,930AA。2例ABO变异基因均为ABO^(*) B.01等位基因发生c.796A>C突变,ISBT未命名此等位基因。结论 2例ABO变异基因均为ABO^(*) B.01等位基因发生c.796A>C突变,使266位甲硫氨酸替换为亮氨酸,产生CisAB表型。由于另一等位基因不同,2例血清学表现不同,分子生物学方法可准确鉴定。

肝移植患者凝血功能和血栓弹力图指标动态变化

目的研究肝移植患者血栓弹力图(TEG)和凝血功能指标的变化及其对输血的指导意义。方法2018年3月~2020年3月在我院治疗的52例肝移植患者,比较无肝前期、无肝期和新肝期输血和未输血患者TEG指标,如反应时间(R)、血块形成时间(K)、角度(α)、最大振幅(MA)和凝血功能指标,如凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(Fib)的变化。结果在52例患者中,无肝前期输血率为17.3%,无肝期输血率为86.5%,新肝期输血率为75.0%(P<0.05);无肝前期输血患者APTT为(74.4±7.2)s,显著长于未输血患者[(66.9±8.1)s,P<0.05],新肝期输血患者PT和TT分别为(30.4±5.4)s和(30.2±3.6)s,显著长于未输血患者[分别为(26.1±4.6)s和(27.0±4.2)s,P<0.05],无肝期输血与未输血患者APTT、PT、TT和Fib水平无显著性差异(P>0.05);无肝前期输血患者K值为(7.6±1.8)min,显著长于未输血者[(6.0±2.0)min,P<0.05],无肝期输血患者R、K和α分别为(26.4±5.5)min、(15.3±2.8)min和(15.8±4.4)°,未输血者分别为(21.8±4.3)min、(12.0±3.9)min和(19.5±3.9)°,两组间差异均有统计学意义(P<0.05);新肝期输血患者α和MA分别为(20.3±4.1)°和(34.4±5.8)mm,未输血者分别为(23.8±3.5)°和(39.0±4.5)mm,两组间差异有统计学意义(P<0.05);无肝前期20例大量输血患者APTT为(77.3±6.8)s,显著长于32例未大量输血患者的[(70.4±7.9)s,P<0.05],无肝前期大量输血患者K值为(8.0±1.7)min,显著长于未大量输血患者[(7.1±1.4)min,P<0.05],无肝期大量输血患者R值为(29.3±5.2)min,显著长于未大量输血患者[(23.6±4.7)min,P<0.05],无肝期大量输血患者K值为(16.8±3.1)min,显著长于未大量输血患者[(13.7±2.8)min,P<0.05],无肝期α为(15.2±3.6)°,显著小于未大量输血患者[(18.4±4.4)°,P<0.05],新肝期大量输血患者TT水平为(31.5±3.0)s,显著长于未大量输血患者[(28.2±3.3)s,P<0.05],新肝期大量输血患者MA水平为(32.8±5.5)mm,显著短于未大量输血患者[(38.7±4.3)mm,P<0.05],新肝期大量输血患者α为(19.8±3.7)°,显著小于未大量输血患者[(22.4±3.1)°,P<0.05]。结论对于肝移植患者及时动态地监测TEG和凝血功能指标有助于判断凝血功能变化,指导合理地输血,各指标的意义还需要认真地研究。

DEL型血诱导Rh(D)阴性患者产生抗-D并致配血不合

分析1例Rh(D)阴性患者输注DEL型血后产生高效价抗-D致交叉配血不合的原因,为Rh(D)阴性患者安全输血提供策略建议。采用盐水试管法和微柱凝胶抗人球蛋白法进行不规则抗体筛查和性质鉴定,采用微柱凝胶抗人球蛋白法对不规则抗体进行特异性鉴定和效价测定;将配血不合红细胞与患者血清在37℃温吸收后在56℃热放散,对所得放散液采用微柱凝胶抗人球蛋白法进行抗体特异性鉴定,同时采用吸收放散法对献血员红细胞进行DEL型检测。患者血清中不规则抗体筛查结果为阳性,抗体性质为IgG型,抗体特异性为抗-D,效价为2 048,配血不合红细胞吸收放散液抗体特异性鉴定为抗-D,经吸收放散检测该献血员为DEL型(回顾调查该患者在17 d前输注的一袋红细胞也为DEL型)。Rh(D)阴性患者接受DEL型血输注,具有产生抗-D的潜在风险,所产生的抗-D可再次结合DEL型红细胞致配血不合。对于有输血史、妊娠史、有生育要求的女性以及输血依赖等群体输注应持谨慎态度。对已经产生抗-D患者,在非紧急情况不应输注,避免溶血性输血不良反应的发生,提高输血的安全性和有效性。

南京双塘社区成年女性2010～2011年血酯分析

目的分析南京市秦淮区双塘社区成年女性2010～2011年的血脂变化情况。方法使用全自动生化分析仪对2010～2011年双塘社区成年女性血清进行检测、分析。结果两年间血脂检测总体异常人数变化不大,统计学分析χ2=0.25,P>0.05,差异无统计学意义,血脂异常比率均大于20%,超过全国水平。结论通过对双塘社区成年女性两年血脂检测、分析,双塘社区成年女性居民的血脂异常情况有待重视与改善。

一例产生抗-D的弱D100型个体的基因突变分析

目的:对临床送检的一例产生抗-D的RhD变异型个体进行RHD基因分析,预测与分析突变对RhD蛋白的影响,评估该变异D类型的临床意义。方法:采用聚合酶链反应(PCR)直接测序法对RHD基因10个外显子及侧翼序列进行序列分析。采用PCR-序列特异性引物对患者RHD基因进行合子型分析。使用PyMOL软件分析突变引起的RhD蛋白三维结构的变化。利用蛋白质变异效应分析、分类非容忍变异和多态性表型分型算法三种在线软件预测突变导致的氨基酸替换对RhD蛋白功能的影响。结果:该变异D个体为RHD(+)/RHD(-)杂合子型。测序结果显示在第5外显子有c.787G>A突变,该突变导致263位甘氨酸被精氨酸替代。PyMOL分析结果显示,与野生型相比,精氨酸与相邻氨基酸之间的氢键变短、氢键数增加。3种蛋白功能损伤预测软件中,有2种提示p.G263R对RhD蛋白是"有害突变"。结论:该D变异型为弱D100型。c.787G>A突变导致的氨基酸替换可能影响RhD蛋白的正确组装折叠,导致RhD抗原特征的改变。这提示该D变异型被正常D抗原免疫后具有产生抗-D的潜力。

竹网在超软基工程淤泥表层处理中的应用

为解决在大体积高含水率淤泥表面进行砂垫层施工的技术难题,针对不同的条件,提出3种竹网加铺土工布垫层的施工方案。结果表明,该方案具有结构稳定、价格低廉、施工方便快捷的优点。

变异型D产生抗-D合并抗-C及抗-Jkb抗体1例

报道1例患有溶血性贫血、系统性红斑狼疮的患者,因配型困难由临床送检血样至实验室检测。患者初筛血型为O型RhD阴性,使用3种不同的单克隆抗-D试剂,分别在盐水介质和抗人球介质对患者RhD表型进行确认。在盐水介质中,患者血样与所有IgM型抗-D不凝集,在抗人球介质中与所有IgM+IgG型抗-D试剂均凝集,为RhD变异型。使用谱细胞对患者血清进行抗体鉴定,发现患者血清中含有抗-D、抗-C和抗-Jkb抗体。患者小因子表型为ccEe, Kidd系统抗原表型为Jk(a+b-)。选择与患者抗原匹配的供者红细胞4 U分2次予以输注,患者血红蛋白有效提升。Rh系统的抗原免疫原性高,Rh系统的抗体可引起严重的新生儿溶血病和溶血性输血反应,因此Rh系统表型和抗体的准确鉴定对于输血安全具有重要的临床意义。对于需要反复输血的患者,若能提供Rh抗原匹配的供者红细胞可大大降低患者被同种免疫的概率。

Bel亚型血型鉴定分析及输血策略探讨

目的:掌握Bel亚型的血清学格局特点和分子生物学检测方法,并探讨其对应的输血策略。方法:采用传统血清学、PCR-SSP、基因测序共同对标本进行ABO血型鉴定。结果:样本一的ABO基因分型为ABO*BEL.03/ABO*O.01.01;样本二的ABO基因分型为ABO*BEL.917/ABO*O.01.02。结论:将传统的血清学检测技术与分子生物学检测技术相结合,可以使ABO血型鉴定更加准确可靠,更好保障输血安全。

孕产妇血型抗体效价测定在产前诊断中的意义

目的:通过对孕产妇血清中血型抗体效价的测定,旨在了解异常IgG抗-A(B)或抗-D水平在孕妇中的分布情况,探讨孕妇血清中IgG类血型抗体效价与新生儿溶血病(HDN)之间的关系,为预防及治疗HDN提供重要的实验依据。方法:采用凝聚胺法分别对1316例O型血孕妇和64例Rh(D)阴性血孕妇血清中IgG抗-A(B)和抗-D水平做出测定。对新生儿运用微柱凝胶法做HDN溶血3项检测。结果:①在所检测的1316例O型血孕妇中,IgG抗-A测定有802例,效价≥64为129例,异常检出率占总抗-A的16.1%;IgG抗-B测定有744例,效价≥64为135例,异常检出率占总抗-B的18.1%。其中89例IgG抗A(B)≥64O型血孕妇所生新生儿中,有22例患HDN,阳性率占24.7%;②64例Rh(D)阴性血受检孕妇中,5例检测出IgG抗-D抗体,抗体检出率占7.8%,新生儿中有3例患Rh-HDN。结论:①HDN的发病率随着母体内的IgG类血型抗体水平增高而增大;②对于Rh(D)阴性的孕妇,IgG抗-D效价与孕次成正相关。

贮存式自体输血在Rh(D)阴性孕妇分娩中的应用

目的:了解贮存式自体输血在Rh(D)阴性孕妇分娩中的实际应用情况。方法:产前1～3周采集并贮存孕妇自身血液,分娩时或分娩后回输给产妇。结果:产前45例贮存自体血的Rh(D)阴性孕妇中,有10例在分娩中或分娩后回输了自体血(未输异体血),未见不良输血反应发生,母婴状况良好,Apgar评分多为10分。另外有7例产妇除了回输自体血外,又输注了一定量的异体血。比较采血前后、回输前后、回输与未回输组以及回输自体血与回输自异体血四组血液指标变化情况,均显示差异无统计学意义(P>0.05)。结论:贮存式自体输血在Rh(D)阴性孕妇分娩中是行之有效的输血方式,既解决了血源紧张的问题,尤其是对稀有血型患者,减少异体血的输注,又提高了输血的安全性和合理性,对母婴不会造成危险,值得推广。

微柱凝胶法对南京地区孕妇人群不规则抗体的检测分析

目的:探讨本地区孕妇人群不规则抗体的阳性率及分布。方法:使用微柱凝胶法对南京地区3256例孕妇的血清进行不规则抗体的检测,对阳性者进行抗体特异性、免疫球蛋白类型、效价及37℃反应性的检测。结果:3256例孕妇中检测出特异性不规则抗体16例,阳性率为0.49%。微柱凝胶法对抗体特异性鉴定为抗-Lea1例,抗-M3例,抗-E5例,抗-D4例,抗-Ec2例,抗-c1例。结论:特异性不规则抗体在本地区的分布较多的为抗-E、抗-M和抗-D,检测孕妇血型不规则抗体对早期诊断非ABO-HDN、为孕妇准备相合的血源以避免紧急输血时的配血困难都具有十分重要的临床意义。

罕见B(A)02/O01致疑难血型鉴定

目的:准确掌握B(A)血型血清学反应格局,熟知其形成的分子机制,正确进行血型鉴定,保证临床输血的安全。方法:采用传统血型血清学方法对样本进行ABO血型鉴定,同时运用PCR-SSP方法对标本ABO基因进行分析。结果:血型血清学正定型为A弱B,反定型为B型,Rh分型为DEecc,直接抗人球蛋白试验及血型不规则抗体筛查均为阴性,基因分型结果为B(A)02/O01型。结论:对于ABO正反定型不符的样本,基因分型技术的应用有助于解决疑难血型的鉴定,但熟练掌握并正确运用血型血清学技术也是必不可少的。

低频(IgG+IgM)抗-Mur联合IgG抗-E致疑难配血

目的:准确对抗-Mur,抗-E进行抗体类型和特异性鉴定,为患者选择合适的供血者,保证临床输血的安全。方法:采用微柱凝胶法对患者红细胞进行Rh分型和直接抗人球蛋白试验测定,采用盐水试管法和微柱凝胶法检测患者血清与谱细胞的反应格局来确定抗体的类型及特异性,同时进行抗体效价的测定,运用荧光PCR法对患者MNS血型系统进行基因分型。结果:患者红细胞Rh分型为DCCee,直接抗人球蛋白试验为阴性,血清中存在(IgG+IgM)型抗-Mur和IgG型抗-E抗体,IgG型抗-Mur效价为4,IgM型抗-Mur效价为2,IgG型抗-E效价为32,MNS血型系统基因分型结果为M(-)N(+)S(-)s(+)Mur(-)。结论:抗-E和抗-Mur均可以引起严重免疫性输血反应及新生儿溶血病,在实际工作中,我们要学会综合运用在不同介质中,不同实验条件下,以及正确选用抗体筛查和抗体特异性鉴定细胞,帮助我们检出有临床意义的抗体,尤其避免低频抗体的漏检,从而保证输血的安全性。

血栓弹力图检测对指导临床合理输注血液成分作用的探讨

目的:探讨血栓弹力图(TEG)检测对临床患者合理使用血液成分的指导作用。方法:选择临床医生申请进行TEG检测的患者295例,其中有189例患者分别进行TEG检测和传统凝血项检测,选取TEG检测参数结果和凝血项指标进行相关分析,并对TEG检测结果所指导的临床用血成分与临床申请输注血液成分进行比较。结果:APTT、PT与R、K为正相关,r分别为0.379、0.326和0.255、0.239,P<0.01;Fg与K、Angle、MA呈显著相关,r分别为-0.289、0.391和0.584,P<0.01;PLT与K、Angle角、MA呈显著相关,r为-0.372、0.461和0.645,P<0.01。结论:TEG检测对临床患者合理使用血液成分具有指导意义。