离子色谱法测定饮用天然山泉水中9种阴离子

建立能同时直接进样测定饮用天然山泉水中9种阴离子（F^-、ClO2^-、BrO3^-、Cl^-、NO2^-、ClO3^-、Br^-、NO3^-、SO4^2-）的离子色谱法。选择美国戴安公司DIONEX ICS-900型离子色谱仪，以IonPac AS9-HC阴离子色谱柱为分析柱，IonPac AG9-HC阴离子保护柱，淋洗液为碳酸盐系统9.0 mmol/L Na2CO3，流速为1.0 mL/min，进样体积为500μL，电导检测器温度为30℃，以氮气作为保护气，抑制器抑制模式为自循环再生模式，抑制器电流为100 mA。该方法的标准曲线平均相关系数为r=0.9996，平均回收率为91.1%-105.6%，RSD为0.38%-1.97%；对4个饮用天然山泉水样品进行检测，样品中9种阴离子的含量都在线性范围内。该法操作简单、快速、准确，灵敏度高、重现性好，适用于饮用天然山泉水中9种阴离子的直接测定。

罗仙子提取物对小鼠脾淋巴细胞的体外增殖及CD4^+/CD8^+比例的影响

目的研究罗仙子提取物(housefly maggots extracts,HME)对正常小鼠脾淋巴细胞的体外增殖,以及对小鼠淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比例的影响。方法不同浓度的罗仙子提取物对刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)体外处理的小鼠脾T淋巴细胞作用,初步确定其发挥作用的最佳浓度。采用MTT法检测罗仙子提取物在不同的时间点对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力,运用流式细胞仪检测细胞周期的分布以及CD4+/CD8+比例。结果罗仙子提取物浓度为40μg/mL,作用48h后,能明显促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖,并且能降低G0/G1期细胞的百分比以及升高S期和G2/M期细胞的百分比,并以48 h效果最明显。能使CD4+、CD4+/CD8+比例降低。结论罗仙子可能通过免疫调节作用影响动脉粥样硬化。

传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎作用影响的比较

目的:比较传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎活性的影响。方法:以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7为实验对象,比较传统炮制及现代加工制品的抑菌及抗炎作用。结果:现代加工制品的抑菌抗炎作用优于传统炮制品。结论:现代加工工艺能够有效的保护罗仙子中抑菌及抗炎物质的活性。

抗菌肽体内抗炎作用的研究进展

抗菌肽是生物体内组成性或诱导性表达的一类小分子多肽,是机体防御系统的重要组成部分。抗菌肽不仅具有广谱杀菌能力,还具有抗真菌、抗病毒、抗寄生虫等生物活性。抗菌肽体外的抗炎作用已经研究较多,但其在体内的抗炎作用才逐渐引起学者的关注。抗菌肽对炎症的调节是多方面的,主要通过抑制生物性致炎因子的生长、调节炎症相关信号通路及其转录因子的表达、调节免疫活性以及中和LPS等,从而发挥抗炎作用。本文就抗菌肽在体内抗炎作用的研究进展作一综述。

实时荧光PCR法测定婴幼儿谷类辅助食品中麸质过敏原成分

目的建立实时荧光PCR法检测婴幼儿谷类辅助食品中麸质过敏原成分的含量。方法样品加入淀粉酶液化后,采用试剂盒方法提取样品DNA,考察大麦Hordein基因、小麦Gliadin基因、黑麦Secl基因和燕麦Avenin基因检测方法的特异性、灵敏度和检出限,幵应用于检测实际样品。结果确定了实时荧光PCR反应体系条件,各个基因的检测方法具有特异性强且灵敏度高,检出限为0.1%。结论该方法操作简便,准确率高,适用于婴幼儿谷类辅助食品中麸质成分的检测。

实时荧光PCR法测定婴幼儿辅助食品中过敏原鱼类成分

目的建立实时荧光PCR检法测定婴幼儿辅助食品中过敏原鱼类成分。方法通过改进的前处理方法,采用实时荧光PCR法,对45个样品进行检测,分别进行特异性、检出限以及适用性试验。结果用于特异性试验的18个样品中,只有鱼类出现特异性扩增;通过7个不同质量配比的鱼肉样品得出检出限低于0.01%;对市售20批样品进行检测,检测结果与样品标识相符。结论该方法快速、灵敏、准确,适用于婴幼儿辅助食品中过敏原鱼成分的检测。

凡纳滨对虾半胱氨酸双加氧酶基因的克隆表达

牛磺酸是一种带有氨基的磺酸，是人体所需营养成分之一。目前，牛磺酸广泛应用于乳制品、饮料、复合味精、豆制品、滋补品、营养液，还可用于水产、动物养殖饲料添加剂，洗涤剂中间体和化学剂等。它也是鱼虾类食品风味形成的呈味氨基酸。半胱氨酸双加氧酶是牛磺酸生物合成的两个限速酶之一，在牛磺酸的合成中起关键作用。本研究利用racePCR技术克隆到了凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的半胱氨酸双加氧酶（L．vannamei cysteine dioxygenase，LvCDO）基因的全长序列，对其编码的蛋白的特性进行了分析。同时构建原核表达载体对其进行表达，获得可溶表达的LvCDO，并利用GST琼脂糖凝胶对其进行纯化，获得较纯的重组GST—LvCDO。另外还发现在盐度为15‰的养殖水体中，LvCDO在凡纳滨对虾的血淋巴细胞和肝胰腺细胞中有较高的转录水平，表明其调节渗透压方面具有一定功能。

凡纳滨对虾半胱次磺酸脱羧酶基因的克隆表达

牛磺酸（Taurine）是一种具有多种生物活性的含硫非蛋白氨基酸，在神经系统发育、眼睛发育、渗透压调节等方面有重要功能，目前在饲料、饮料、医药等行业有重要应用。同时其也是鱼类等水产动物风味形成的呈味氨基酸。半胱次磺酸脱羧酶（cysteine sulfinate decarboxylase，CSD）是牛磺酸生物合成的限速酶，在牛磺酸的合成中有重要功能。本研究利用race PCR技术克隆到了凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的半胱次磺酸脱羧酶基因（L．vannamei CSD，LvCSD）的全长序列，对其编码的蛋白的特性进行了分析。同时构建原核表达载体对其进行表达，获得可溶表达的LvCSD，并利用镍柱对其进行纯化，获得较纯的重组LvCSD。另外还发现LvCSD在较盐度为15‰的养殖水体中的凡纳滨对虾的血淋巴细胞和肝胰腺细胞中转录水平较高。

实时荧光定量PCR技术检测腐乳中大豆转基因成分

优化实时荧光定量PCR反应体系条件,运用此技术检测从腐乳中提取的DNA来判定腐乳样品是否含有大豆转基因成分。该检测方法特异性强、灵敏度高,方法检出限为0.1%,而且操作简便,可以推广使用。

蛋白粉中转基因成分实时荧光定量PCR检测方法的建立

建立了应用实时荧光定量PCR技术检测蛋白粉中转基因成分的方法。通过提取DNA,优化时荧光定量PCR反应体系条件,建立了一种简便快速的检测蛋白粉中转基因成分的方法,具有良好特异性和灵敏度,检出限为0.05%。该方法检测条件稳定,样品前处理简单,是一种快速简便、可靠的方法,适合于推广使用。

氨基酸自动分析仪测定胶原蛋白保健品中羟脯氨酸的含量

研究了氨基酸自动分析仪测定胶原蛋白保健品中羟脯氨酸含量的方法,此方法灵敏度高,具有较好的准确度和重现性,在羟脯氨酸质量浓度为5 mg/L^30 mg/L范围内,羟脯氨酸的质量浓度与峰面积之间具有良好的线性关系,相关系数为0.999 5,加标回收率为96.7%~100.4%,RSD值为1.3%。

BPI_(23)-haFGF融合蛋白在毕赤酵母中表达条件的优化

目的:通过优化毕赤酵母的表达参数,为提高BPI23-haFGF融合蛋白在毕赤酵母中的表达量创造条件。方法:采用小型摇瓶培养系统,对重组毕赤酵母菌X-33/pPICZαA-BPI23-haFGF在含有蛋白酶抑制剂PMSF以及不同诱导时间、培养温度、甲醇浓度及培养液pH值条件下进行表达,将表达上清进行SDS-PAGE电泳,并用Quantity one Volume Rect Tool和Dentity tool进行分析。结果:在诱导培养基中加入0.5mmol/L PMSF后,BPI23-haFGF融合蛋白降解得到缓解,诱导表达96h表达量达到高峰;在培养温度28℃,甲醇浓度为1.0%,培养液pH 6.0时,BPI23-haFGF表达量最高,含量比优化前提高了91.6%。结论:该研究为BPI23-haFGF融合蛋白后期的大规模发酵及深入研究其生物学功能奠定了基础。

花生油挥发性风味物质SPME-GC/MS指纹图谱的研究

建立一种快速、高效检测花生油中挥发性风味物质的方法对花生油的质量控制具有重要意义。采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(SPME-GC/MS)技术对花生油中风味物质进行快速分析鉴定,并对采集大量SPME-GC/MS数据进行对比分析,比较30批不同花生油样品所得GC/MS色谱图生成标准指纹图谱(R)。该法可同时检测花生油中醛类、杂环类、烃类、酯类等56种挥发性成分。与标准指纹图谱比较,各批次相似度范围为0.918~0.990。该方法重复性和稳定性的RSD值均小于0.51%,说明该方法稳定可靠。将所建立的标准指纹图谱应用于10批次不同原料的食用油进行识别,相似度为0.114~0.775,均小于0.9。该方法建立的花生油指纹图谱质控模式能有效识别原料来源,可用于花生油的评价与甄别,可为花生油的质量控制提供相关检测依据。