转染胃动蛋白2基因抑制人胃癌细胞系MKN28增殖、迁移和侵袭

目的检测胃癌、癌旁组织和胃癌远端胃黏膜组织中胃动蛋白2(GKN2)的表达;分析GKN2转染人胃癌MKN28细胞系后对增殖、迁移和侵袭的影响。方法免疫组织化学技术检测胃癌、癌旁组织和胃癌远端胃黏膜中GKN2蛋白的表达;将GKN2基因真核表达载体(Xhol_GKN3SP-h GKN2-TEV-SBP_Xhol)转入人胃癌MKN28细胞,经G418筛选后获得稳转细胞株,Western blot确定GKN2在MKN28细胞中表达;MTT法测定MKN28细胞增殖;Transwell迁移实验和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。结果 GKN2在胃癌组织中的表达少于胃癌远端胃黏膜和癌旁胃组织(P<0.05)。GKN2转染人胃癌MKN28细胞后吸光度值(A值)显著低于未转染组和空载体组(P<0.05)。与未转染组及空载体组相比,GKN2过表达致使迁移细胞数(P<0.05)和侵袭细胞数均明显下调(P<0.05)。结论 GKN2表达减低与胃癌的发生有关;GKN2过表达显然可阻抑人胃癌MKN28细胞的增殖、迁移和侵袭。

对《企业破产法》第三十二条个别清偿撤销权的思考——以虹桥公司管理人请求撤销银行个别清偿为视角

由于《企业破产法》第三十二条规定的不明确,个别清偿是否需要考察当事人的主观状态,实践中各地司法尺度和裁判标准并不一致,相同情形有时判决结果迥异。文章通过剖析个别清偿撤销权制度的立法思路,分析存在的问题,认为善意抗辩权是该制度的应有之义,应通过司法解释或者判例的方式予以明确。同时借鉴国外立法,在临界期设定以及关联交易规制等方面提出了修改完善建议,以期构建真正公平的、有效率的破产法律制度。

DADS对人胃癌干样细胞增殖能力及Shh与Gli1表达的影响

目的观察大蒜有效成分二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对胃癌干样细胞(gastric cancer stem like cells,GCSLCs)增殖能力及干细胞相关分子Shh和Gli1表达的影响,初步探讨其抑制胃癌干样细胞增殖的作用机制。方法采用MTT实验、软琼脂集落形成等方法检测DADS对GCSLCs增殖的影响;采用RT-PCR、Western blot实验观察DADS对GCSLCs中Shh、Gli1在m RNA和蛋白表达水平的作用。结果 MTT实验发现,30mg/L DADS处理48h后GCSLCs组OD值(0.530±0.319)和MGC 803组OD值(0.352±0.027)显著低于未处理GCSLCs组(0.826±0.032)和未处理MGC 803组(0.565±0.023),P<0.05;软琼脂集落形成实验表明,30mg/L DADS处理后GCSLCs组形成的集落小于未处理组,且集落形成数目(15±1.5)也比未处理组(35.5±2.5)少(P<0.05),30mg/LDADS处理MGC 803组形成的集落小于未处理组,且集落形成数目(6.5±0.5)明显少于未处理组(14.5±0.5),P<0.05;RT-PCR实验结果显示,与未处理组比较,30mg/L DADS处理GCSLCs和MGC 803细胞48h后,Shh和Gli1 m RNA的表达水平均显著下调(P<0.05);Western blot结果同样发现,30mg/L DADS处理48h可明显抑制GCSLCs和MGC 803细胞中Shh和Gli1蛋白的表达(P<0.05)。结论 DADS可抑制GCSLCs细胞增殖能力,其作用机制可能与下调Shh和Gli1的表达有关。