microRNA-588通过调控USP22基因表达对神经母细胞瘤增殖和迁移的影响及机制研究

目的:探究miR-588通过调控泛素特异性蛋白酶22(USP22)表达对神经母细胞瘤(NB)增殖和迁移的影响及机制。方法:通过双荧光素酶报告验证miR-588与USP22的靶向关系。将SK-N-SH细胞分为NC组、miR-588组、miR-588^(+)USP22组和USP22组,通过转染miR-588 mimic和/或USP22质粒过表达其水平。通过qPCR和Western blot检测USP22 mRNA和蛋白水平验证靶向关系。检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力。通过ELISA检测免疫抑制相关指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平。结果:miR-588与USP22 mRNA 3’端的非翻译区域(3’-UTR)通过碱基互补配对的方式结合。miR-588组USP22 mRNA和蛋白显著低于NC组(P<0.05),miR-588^(+)USP22组USP22 mRNA和蛋白水平显著高于miR-588组而低于USP22组(P<0.05)。与NC组比较,miR-588组细胞增殖、迁移、侵袭能力显著升高(P<0.05)。USP22作用与miR-588相反(P<0.05),并且miR-588^(+)USP22组增殖、迁移、侵袭能力显著高于miR-588组而低于USP22组(P<0.05)。与NC组比较,miR-588组TNF-α[(8.97±0.90)pg/ml]和sIL-2R[(6.68±0.75)pg/ml]水平显著升高,USP22组TNF-α[(2.04±0.31)pg/ml]和sIL-2R[(1.48±0.19)pg/ml]水平显著降低(P<0.05),miR-588^(+)USP22组TNF-α[(4.16±0.49)pg/ml]和sIL-2R[(3.21±0.41)pg/ml]水平显著低于mi R-588组但高于USP22组(P<0.05)。结论:miR-588可靶向抑制USP22表达诱导TNF-α和sIL-2R分泌,从而缓解免疫抑制,进而抑制NB细胞增殖和转移。

周期蛋白依赖性激酶2对小鼠神经母细胞瘤免疫微环境的影响

目的探讨周期蛋白依赖性激酶(CDK2)对小鼠神经母细胞瘤免疫微环境的影响。方法评估CDK2抑制剂PF-07104091对皮下MYCN阴性神经母细胞瘤细胞SH-EP在C57BL/6N WT小鼠体内肿瘤生长的影响。评估CDK2稳定敲低MYCN的阴性神经母细胞瘤细胞在C57BL/6N WT小鼠体内的成瘤能力。评估CDK2抑制剂或者敲低CDK2对MYCN阴性神经母细胞瘤细胞增殖水平和凋亡水平的影响。探索CDK2抑制剂或者敲低CDK2是否影响MYCN阴性神经母细胞瘤免疫微环境。结果PF-07104091显著抑制MYCN阴性神经母细胞瘤生长并增加小鼠总生存率。CDK2敲低能够显著抑制肿瘤生长并增加小鼠总生存率。CDK2抑制剂或者敲低CDK2并不影响MYCN阴性神经母细胞瘤细胞的增殖水平和凋亡水平。CDK2抑制剂或者敲低CDK2的MYCN阴性神经母细胞瘤中观察到的CD3+T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和DC细胞的比例显著升高。CDK2抑制剂处理或者敲低CDK2后,MYCN阴性神经母细胞瘤中IFN-γ的水平上升,并且IFN-γ通路中的关键基因IFNB1、STAT1、TLR3、DDX58、CCL17、TAP1、TX2表达上调。腹腔注射或不注射CDK2抑制剂PF-07104091并不影响IFNGR1^(-/-)小鼠的生长速度和生存率。敲低与未敲低CDK2的MYCN阴性神经母细胞瘤在IFNGR1^(-/-)小鼠身上生长肿瘤的速度相似并且生存率相似。结论CDK2通过IFN-γ通路影响肿瘤免疫微环境中CD3+T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和DC细胞的比例。

某医院颜面部瘢痕整形患者焦虑抑郁现状及影响因素研究

目的 探讨颜面部瘢痕整形患者的焦虑抑郁现状及其影响因素。方法 采用单纯随机抽样方法选取中南大学湘雅三医院整形外科的颜面部瘢痕整形患者221例,采用问卷调查法收集患者的一般资料及瘢痕情况,并应用焦虑自评量表、抑郁自评量表和社会支持量表评定患者的焦虑抑郁状况。结果 221例颜面部瘢痕整形患者的焦虑量表评分为（51.17±12.81）,抑郁量表评分为（55.49±10.08）,均高于国内常模,差异有统计学意义（P〈0.01）。焦虑阳性患者为114例（51.6%）,抑郁阳性患者为156例（70.6%）。多因素非条件Logistic回归分析结果显示,有配偶（^OR=2.549,95%CI：1.364~4.762）、重度疼痛（^OR=1.675,95%CI：1.156~2.427）是焦虑的危险因素;家庭人均月收入高（^OR=0.605,95%CI：0.466~0.786）、瘢痕有挛缩牵扯（^OR=0.376,95%CI：0.195~0.727）是焦虑的保护因素。有配偶（^OR=5.748,95%CI：2.736~12.075）是抑郁的危险因素;户口在城市（^OR=0.361,95%CI：0.184~0.707）、家庭人均月收入高（^OR=0.720,95%CI：0.544~0.953）、客观支持评分高（^OR=0.826,95%CI：0.732~0.933）是抑郁的保护因素。结论 颜面部瘢痕整形患者焦虑、抑郁患病率均高于一般人群,婚姻状况、疼痛程度、家庭人均月收入、瘢痕是否有挛缩牵扯是患者焦虑的影响因素,婚姻状况、户口所在地、家庭人均月收入、客观支持评分是患者抑郁的影响因素。

不同组织类型的小儿神经母细胞瘤自噬活性与免疫细胞水平的一致性及其临床意义

目的:观察不同组织类型的小儿神经母细胞瘤的自噬活性与免疫细胞水平的一致性并探讨其临床意义。方法:收集我院2008年8月~2018年8月期间收治的86例小儿神经母细胞瘤Ⅳ期患者,根据组织分型分成组织结构良好型(FH组,n=44)和组织结构不良型(UH组,n=42),收集患者的一般临床资料,对比两组患者治疗前后血清CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK细胞及B淋巴细胞水平;Western blot检测神经母细胞瘤内自噬分子LC3、Beclin-1和p62蛋白表达水平;Kappa分析观察血清免疫细胞水平与神经母细胞瘤内自噬分子LC3、Beclin-1和p62蛋白水平的一致性。结果:患儿的身体状态评价结果显示:FH组KPS<70分6例,KPS=70分11例,KPS>70分27例;UH组KPS<70分8例,KPS=70分14例,KPS>70分20例;两组患儿身体状态评分情况未见显著差异(χ^2=1.643,P=0.440)。两组样本中CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、NK细胞及B淋巴细胞水平显示UH组显著低于FH组(P<0.05)。Western blot结果显示,UH组LC3、Beclin-1和p62蛋白表达水平显著低于FH组,差异具有统计学意义(P<0.05)。一致性分析结果显示,FH组中自噬分子表达水平与免疫细胞水平具有显著一致性(Kappa=0.431,P=0.002);UH中自噬分子表达水平与免疫细胞水平不具有显著一致性(Kappa=-0.081,P=0.598)。结论:与UH组相比,FH组自噬活性与免疫细胞水平具有一致性,其免疫水平与肿瘤细胞自噬水平更具有相关性。

29例先天性肌性斜颈术后复发病例的诊治

目的：对29例先天性肌性斜颈手术后复发病例的治疗进行总结。方法回顾性分析1998年1月至2013年1月收治的29例先天性肌性斜颈手术后复发病例的临床和随访资料。29例均行胸锁乳突肌双极松解术，术后予枕颌牵引1个月，佩戴胸颈联合支具3-6个月。结果29例均获得长期随访（11个月至10年），患者头颈偏斜症状消失，颈活动正常，效果优良。结论胸锁乳突肌双极松解术，联合术后枕颌吊带牵引、佩戴胸颈联合支具，是治疗先天性肌性斜颈术后复发病例的有效方法。

源于梨状窝瘘的小儿化脓性甲状腺炎

小儿化脓性甲状腺炎（acute suppurative thyroiditis，AST）是一种临床少见的颈部感染性疾病，其致病菌多为链球菌、金黄色葡萄球菌以及厌氧菌。梨状窝瘘（congenital pyriform sinus fistula，CPSF）是一种少见的颈部鳃源性先天畸形，源于胚胎前期第三、第四咽囊结构残留，在解剖学上其瘘管穿过或者终止于甲状腺侧叶上级，形成的内瘘常常引起甲状腺的化脓性感染。

ATF3在散发性单纯性尿道下裂患者包皮组织中的表达及意义

目的检测散发性单纯性尿道下裂患者包皮组织中激活转录因子3(Activating transcription factor 3,ATF3)的表达情况,探索ATF3与散发性单纯性尿道下裂之间的关系。方法方便选择2014年1月—2017年1月该院收治的散发性单纯性尿道下裂患者在尿道成形术中切除的包皮组织(共35例,其中轻度10例,中度15例,重度10例)作为尿道下裂组样品,单纯包皮过长(含包茎)患者在包皮环切术中去除的多余的包皮组织(共20例)作为对照组样品。通过RT-PCR方法检测实验组和对照组ATF3 m RNA的表达情况。采用SPSS 12.0统计学软件进行数据录入,构建数据库。结果通过RT-PCR方法测得散发性单纯性尿道下裂患者包皮组织中ATF3 m RNA的相对表达量为:(0.54±0.06),对照组的包皮组织中ATF3 m RNA的相对表达量为:(0.44±0.07),从结果中可以得出在散发性单纯性尿道下裂患者的包皮组织中ATF3的表达情况比正常的尿道组织中明显增加,两组结果比较,差异有统计学意义(t=5.89,P=0.00)。比较不同严重程度中尿道下裂患者ATF3 m RNA相对表达量,不同严重程度相对表达量差异无统计学意义(F=0.13,P=0.88)。结论散发性单纯性尿道下裂患者中ATF3的表达水平明显高于正常对照组,这提示ATF3与散发性单纯性尿道下裂存在着密切的关系。为将来研究ATF3在尿道下裂中产生的相关信号转导通路提供相关实验基础,及研究尿道下裂的发病机制提供理论依据。

组合模型对肺结核发病趋势的预测研究

目的建立肺结核发病率(1/10万)自回归积分移动平均(ARIMA)-灰色模型(GM)组合模型,并将其应用于肺结核发病率的预测,为及早发现疾病发展趋势和及时采取控制对策提供科学依据。方法收集迁安市2004年1月—2012年12月肺结核月发病率资料,应用SPSS 13.0软件对肺结核逐月发病率进行ARIMA建模拟合;然后用GM(1,1)模型对其带阈值的残差序列进行修正并构造出组合模型,利用此模型对迁安市2013年肺结核逐月发病率进行预测。结果 ARIMA(0,1,1)(0,1,1)12模型较好地拟合了肺结核的发病情况,模型的所有参数都通过统计学检验;用一阈值为4的GM(1,1)模型对其残差序列进行修正,预测模型通过了精度检验(C=0.573,P=0.805),模型拟合精度为基本合格,ARIMA-GM组合模型的平均绝对误差(MAE)、平均绝对百分比误差(MAPE)都比单个模型小,利用组合模型对2013年肺结核发病率预测。结论 ARIMA-GM组合模型能较好地拟合迁安市肺结核发病情况,且该方法比ARIMA季节乘积模型预测具有更高的精度。预测结果能够对肺结核的早期预测预警模型的建立提供借鉴,从而有针对性地采取相应的控制措施。

阴囊根部微创切口行疝囊高位结扎术2200例体会

腹股沟斜疝是小儿外科最常见的疾病,疝囊高位结扎术是治疗腹股沟斜疝的标准手术方式,但对手术切口的位置及大小的选择仍有差别[1-4]。2000年1月—2010年10月福建医科大学附属第一医院采用阴囊根部微创切口对2200例腹股沟斜疝患儿行疝囊高位结扎术,取得良好的手术效果。

类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)与胆固醇代谢

类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)在胆固醇的代谢中发挥重要的作用。近期研究表明StAR同样表达于肝脏组织中,通过调节胆汁酸的合成,增加胆固醇的排泄。这为脂肪肝等脂类代谢异常类疾病的防治提供了一条新的途径。

促微管聚合蛋白家族的研究进展

促微管聚合蛋白(tubulin polymerization promoting proteins,TPPPs)家族是一类能与微管蛋白结合,从而促使微管聚集、维持微管系统稳定性和完整性的蛋白质,其在细胞有丝分裂纺锤体组装中发挥重要作用。目前已知该家族在人类基因组中有3个成员:TPPP/p25、TPPP2/p18和TPPP3/p20,其共同点是在C末端都包含一个保守的p25-α序列。TPPP1主要与神经系统疾病相关,如多发性硬化和多系统萎缩;TPPP3在许多肿瘤细胞中表达,与肿瘤的增殖密切相关;而TPPP2的研究相对较少。本文将主要阐述TPPP家族成员及其相关疾病的最新研究进展。

基层医疗改革中“双十”就诊创新模式初探

从"一般诊疗费"为切入点,解读攸县"双十"就诊模式的内涵、"双十"就诊模式的确定及实施过程,并分析了"双十"就诊模式在实施过程中体现出来的优势,即对于缓解"看病难,看病贵"、实现"人人病有所医"等的重要意义;同时探讨该模式现存的不足,最后对于完善并推广攸县"双十"就诊模式,提出建议。

中药对雏鸡感染鸡传染性法氏囊病病毒后血浆GC浓度的影响

中药对雏鸡感染鸡传染性法氏囊病病毒后血浆ＧＣ浓度的影响王世英张登荣许雅丽＊石玉祥石俭省（邯郸农业高等专科学校畜牧兽医系，河北０５７１５０）目前，国内学者对鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）的发病机理、疫苗研制和预防等方面做了大量工作［１～３］。但对其病毒感染...

构建携带人PAPS合成酶1(hpapss1)全长cDNA的重组腺病毒

目的构建携带人PAPS合成酶1(hpapss1)全长cDNA的重组腺病毒,并感染巨噬细胞使PAPSS1过表达,为研究其在胆固醇代谢中的作用提供工具。方法PCR扩增hpapss1全长cDNA,继而构建了真核表达载体pCDNA3.0-hpapss1,再将hpapss1片段亚克隆入腺病毒穿梭质粒pshuttle-CMV,得到转移质粒pshuttle-CMV-hpapss1,并将其转化含腺病毒基因组质粒pAdEasy-1的BJ5183感受态菌(AdEasier-1cells)。筛选并鉴定重组正确的腺病毒质粒pAdEasy-1-hpapss1,在阳离子脂质体介导下,转染腺病毒包装细胞(293细胞)进行包装和扩增。携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒感染THP-1来源的巨噬细胞48h后,用Western blot方法测定蛋白水平来确定PAPSS1的过表达。结果成功制备携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒,滴度为5.3×108pfu/mL,实现了hpapss1基因在巨噬细胞中的过表达。结论携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒的成功制备为进一步探讨PAPSS1及氧化固醇硫酸化在巨噬细胞胆固醇代谢平衡中的作用及机制建立了很好的模型和工具。

任务驱动法在初中英语阅读教学中的运用研究

文章立足初中英语阅读教学实践,以任务驱动法的运用为切入点,依次分析与探讨了初中英语阅读教学中践行与运用任务驱动法的可行性、有效策略,旨在更好地提升初中英语阅读教学效率,同时让初中生的英语阅读水平、阅读能力及阅读综合素质获得显著的进步与发展。

人包皮组织脱细胞基质的制备与生物相容性

目的制备人包皮组织脱细胞基质移植物(AMGs),探讨其浸提液对兔尿道黏膜细胞毒性。方法制备人包皮组织脱细胞基质后,通过Masson染色观察脱细胞后基质的表征,扫描电子显微镜观察其孔径大小。体外培养尿道黏膜细胞,采用免疫荧光鉴定其AE3表达。尿道黏膜细胞与AMGs基质浸提液体外共培养,MTT法检测AMGs浸提液对尿道黏膜细胞毒性。结果Masson染色显示细胞去除干净,只有胶原蛋白构成的支架,扫描电镜显示支架的孔径为20~50μm,分布均匀,形态良好。适当浓度的AMGs基质浸提液对尿道黏膜细胞无明显毒性。结论人包皮组织脱细胞基质为理想的AMGs支架材料,制备的AMGs材料细胞毒性小,有一定的实用价值。

改良TIP尿道成形术:恢复尿道解剖结构

目的分析尿道板背侧纵切卷管尿道成形术(TIP)基础上覆盖Buck筋膜联合尿道海绵体(BC)和背侧包皮筋膜组织(P)在无阴茎下弯或轻度阴茎下弯的小儿中远段型尿道下裂的治疗效果。方法回顾性分析104例中远段型尿道下裂患儿的病例资料。其中行BC-P-TIP手术72例(A组);行传统术式TIP+背侧包皮筋膜组织(P-TIP手术)32例(B组)。术后1,3,12月进行门诊随访。术后3月参照尿道下裂客观评分系统(HOSE)对患儿进行手术效果评估,对两组病例的一般资料、HOSE评分、并发症情况进行统计学分析。结果A,B组术后3月HOSE评分平均分分别为15.42及13.90,差别有统计学意义(P<0.01)。A,B组的尿瘘发生率为8.3%及25%,差别有统计学意义(P<0.05)。A,B组的尿道狭窄发生率为4.2%及0%,差别无统计学意义(P>0.05)。结论BC-P-TIP改良术式相对于P-TIP术式能有效减少尿瘘发生,术后外观满意、排尿功能良好,手术操作简单易学,取材方便,解剖损伤小,且接近正常尿道的解剖结构,值得进一步探讨及推广。

归脾汤治疗肝母细胞瘤22例疗效观察

目的观察归脾汤治疗肝母细胞瘤的疗效和不良反应。方法回顾性分析22例肝母细胞瘤患儿临床资料，在手术＋化疗中配合归脾汤加减治疗，随访患儿治疗后的生存状况及化疗毒性反应，并与欧洲资料进行对比。结果本组与欧洲资料比较，总体生存率分别为77.3%和76.8%，差异无统计学意义（P＞005）。3～4级化疗毒性反应的发生率为13.6%和57.0%（P＜005）。结论中西医结合治疗肝母细胞瘤虽不能明显提高生存率，但可提高患儿对化疗的耐受力，降低化疗毒性反应，改善生活质量，是一种可靠、有效的方法。

再议C-反应蛋白、WBC在小儿急腹症中的诊治意义

目的:评估C反应蛋白(C-rp)和血白细胞(WBC)在小儿急腹症中的诊治意义,并初步确定界值,以指导临床。方法:对102例急腹症(分为炎症组和梗阻组)和40例腹股沟斜疝患儿检测血C-rp和血WBC,并结合病理和临床,统计分析这些指标的临床意义。结果:炎症组C-rp、白细胞计数、中性粒细胞百分比、中性粒细胞计数均比对照组高(P<0.005);梗阻组中性粒细胞计数、中性粒细胞百分比均比对照组高(P<0.001);炎症组和梗阻组对比中,仅C-rp的差别有统计学意义;炎症组C-rpCI95%=28.97～91.43mg/L,梗阻组C-rpCI95%=2.16～14.84mg/L。结论:依据中性粒细胞百分比和中性粒细胞计数能鉴别小儿是否存在急腹症,C-rp可以作为小儿急腹症的炎症指标。

改良Snodgrass术治疗尿道下裂的临床研究

目的:探讨改良Snodgrass术治疗尿道下裂的临床疗效。方法:回顾性分析2008年1月至2016年10月收治尿道下裂病例212例,其中94例行改良Snodgrass术,即增加1根丝线用于缝合,便于术后拆除尿道板缝线;118例行传统Snodgrass术。改良法采用术后第10天拆除尿道板缝线。比较两种手术成功率、术后并发症情况。结果:改良Snodgrass术组和传统Snodgrass术组手术成功率分别91.49%、81.36%,其差异有统计学意义(P<0.05),切口感染、尿瘘、尿道狭窄等的发生率:改良Snodgrass术组分别为4.26%、6.38%、2.13%,传统Snodgrass术组分别为12.71%、16.10%、2.54%。切口感染和尿瘘的发生率差异有统计学意义(P<0.05),尿道狭窄的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:改良Snodgrass术可以提高手术成功率,降低术后切口感染和尿瘘的发生率,有临床推广价值。