听源性惊厥易感大鼠点燃后海马结构内的突触素表达

为探讨听源性惊厥点燃对突触可塑性的影响，采用免疫细胞化学方法结合体视学分析，研究了Ｗｉｓｔａｒ种系的听源性惊厥易感大鼠（Ｐ７７ＰＭＣ）惊厥和点燃后海马结构内突触素ｐ３８表达的差异。结果显示：（１）Ｐ７７ＰＭＣ大鼠１次惊厥后，海马结构内ｐ３８免疫反应产物呈明显的板层样分布；（２）Ｐ７７ＰＭＣ大鼠点燃后，ｐ３８免疫反应产物的定位分布与１次惊厥后相比较，没有明显改变，但是，ｐ３８免疫反应产物的密度普遍增加，特别是在海马ＣＡ３区苔藓纤维层和齿状回分子层内带，ｐ３８免疫反应产物的光密度值显著增加（Ｐ＜０．０５）。结果表明，听源性惊厥点燃能够诱导海马结构内ｐ３８表达增加。本文讨论了ｐ３８表达增加的可能机制及其生物学意义。

大鼠海马结构在学习记忆活动时的细胞形态学可塑性研究

用 Timm染色方法显示了空间辨别性学习记忆模型组、游水组和对照组大鼠海马结构内含重金属的神经成份的分布差异 ,来反映非处理因素相同的情况下 ,由空间辨别性学习记忆训练为处理因素所产生的实验效应。探讨正常的生理活动是否可以引致有关的神经结构发生形态学可塑性变化。结果 :( 1)模型组大鼠海马结构的 Timm染色结 ,15只大鼠中有 ,13只 ( 86.67% )在海马 CA3区多形层出现片带状的银颗粒沉积 ,即出芽反应。该银颗粒的量与训练的时间存在相关性 ,即训练 7d的比 14d的的少 ,而训练 2 1d的也比 14d的少。 ( 2 )游水组大鼠海马结构的染色结果 ,9只大鼠中 7只与对照组的染色结果一致 ,2只出现了一级出芽反应 ;( 3)对照组大鼠海马结构的染色结果 ,9只大鼠在海马 CA3区多形层内均未见有银颗粒沉积。据此 ,作者认为在海马 CA3区多形层内含重金属的神经成份是由空间辨别性学习记忆活动引起的形态学可塑性变化

听源性惊厥易感大鼠惊厥和点燃后前脑结构内的c-fos表达

为探讨听源性惊厥点燃和前脑结构的关系，用免疫细胞化学方法结合体视学分析，研究了Ｗｉｓｔａｒ种系的听源性惊厥易感大鼠（Ｐ７７ＰＭＣ）惊厥和点燃后，前脑结构内ｃ－ｆｏｓ表达的差异。结果显示，（１）正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠接受一次强音刺激后，海马、齿状回、杏仁核、内嗅皮质、嗅周皮质和额－顶皮质内未见Ｆｏｓ阳性神经元；（２）Ｐ７７ＰＭＣ大鼠一次惊厥后，除海马、齿状回外，上述被检各区内可见广泛的Ｆｏｓ阳性神经元，其分布具有区域差异；（３）Ｐ７７ＰＭＣ大鼠点燃后，海马、齿状回内有大量Ｆｏｓ阳性神经元，其他的被检各区内，Ｆｏｓ阳性神经元数量更多，阳性神经元的光密度更大，与一次惊厥后相比较，具有显著差异（Ｐ＜０．０１）。在点燃大鼠海马结构中，齿状回内的Ｆｏｓ免疫反应最强，海马ＣＡ１、ＣＡ２区次之，ＣＡ３区较弱。结果表明，听源性惊厥点燃可以导致海马结构参与到惊厥活动之中。

大鼠海马结构内一氧化氮合酶阳性神经元在学习记忆时的形态学观察

用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ）组织化学方法，检测空间辩别性学习记忆模型大鼠和对照大鼠的海马结构内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的活性，阳性细胞的分布、形态和数量等形态学指标．结果：（１）模型大鼠海马结构内ＮＯＳ阳性神经元的酶反应产物比对照大鼠的明显减少；（２）模型大鼠和对照大鼠海马结构内ＮＯＳ阳性神经元的分布未见组间差异，但均显示出明显的区间差异，即从ＣＡ４区向ＣＡ１区逐渐增多；（３）模型大鼠和对照大鼠海马结构内的ＮＯＳ阳性神经元的数量显示出明显的组间差异，即模型组比对照组的明显减少；（４）模型大鼠和对照大鼠海马结构内的ＮＯＳ阳性神经元形态主要有锥体形、颗粒形和纺锤形三种，但未见组间差异．据此，可认为大鼠海马结构内ＮＯＳ阳性神经元在空间辨别性学习记忆活动时发生了形态学可塑性．

一氧化氮合酶和一些神经递质（神经肽）在自发性高血压大鼠孤束核的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ组织化学和免疫细胞化学方法，观察和比较了一氧化氮合酶、酪氨酸羟化酶、５－羟色胺、Ｐ物质和亮氨酸脑啡肽在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠孤束核的分布。结果显示，孤束核内一氧化氮合酶阳性细胞在高血压组少于对照组，有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。孤束核Ｐ物质和亮氨酸脑啡肽免疫阳性物在高血压组多于对照组；酪氨酸羟化酶免疫阳性物高血压组少于对照组；５－羟色胺免疫阳性物在两组的分布无明显差异。提示一氧化氮在孤束核是一种降压性局部神经调质，与其在心血管系统的降压作用一致。中枢Ｐ物质含量的异常增加可能是高血压发病的原因之一。孤束核脑啡肽含量的异常增加与高血压的形成有关，痛觉和高血压之间可能存在一些共同的发生机制。酪氨酸羟化酶在高血压组降低提示孤束核内酪氨酸羟化酶对维持正常血压发挥重要作用．孤束核内５－羟色胺与血压调节无关。

大鼠海马结构在空间辨别性学习记忆时的突触形态学观察

目的:探讨学习记忆活动是否可以引起大鼠海马结构发生突触可塑变化。方法:电子显微镜下对模型大鼠和对照大鼠的海马结构内突触复合体的形态进行了对比观察。结果:(1)模型大鼠海马CA3区多形层内多为神经纤维,其中无髓纤维占多数,有髓纤维很少。在无髓纤维问见到形状不规则的轴突终末与周围的树突和树突棘分别形成轴一树突触和轴棘突触,后者多见。突触前膨大内充满圆形清亮、无核心的突触小泡和线粒体。突触后成分多为树突棘并在多处与突触前膜形成活性区,树突棘内见到棘器。(2)对照大鼠海马CA3区多形层内含有大量无髓纤维并见到较少的轴-树突触。该突触形状规则且活性带面积较小,突触后成分多为一个,突触小泡清亮、圆形无核心,偶见线粒体。(3)经Timm染色的两组大鼠海马CA3区多形层的超微结构特点是银颗粒仅沉积在苔藓纤维的髓鞘内和苔藓纤维的大终扣内,线粒体、树突干和树突棘内均无银颗粒。结论:正常生理活动和空间辨别性学习记忆活动均可引致大鼠海马CA3区多形层突触可塑性变化,但两者在形态上有所不同。

听源性惊厥易感大鼠惊厥和点燃后听觉核团内的c-fos表达

为探讨听源性惊厥点燃和听觉核团的关系，用免疫细胞化学方法结合体视学分析，研究了Ｗｉｓｔａｒ种系的听源性惊厥易感大鼠（Ｐ７７ＰＭＣ）惊厥和点燃后听觉核团内ｃ－ｆｏｓ表达的差异。结果显示：１．正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠接受１次铃声刺激后，蜗神经核、外侧丘系背核、下丘和内侧膝状体内没有Ｆｏｓ标记细胞；２．Ｐ７７ＰＭＣ大鼠１次听源性惊厥后，上述听觉核团内可见广泛的Ｆｏｓ标记细胞，其分布具有区域差异；３．Ｐ７７ＰＭＣ大鼠被点燃后，听觉核团内的Ｆｏｓ标记细胞更多，标记强度更大，特别是在外侧丘系背核和下丘，Ｆｏｓ标记细胞的密度和强度均显著高于１次惊厥后（Ｐ＜０．０１）。在内侧膝状体腹侧核，点燃后Ｆｏｓ标记细胞密度显著增加（Ｐ＜０．０５）。在内侧膝状体背侧核和蜗神经背核，Ｆｏｓ标记细胞无显著变化（Ｐ＞０．０５）。本研究结果表明，听源性惊厥诱导的ｃ－ｆｏｓ表达反映了听觉核团内神经元的异常活动，这种异常的神经元活动可能是听源性惊厥点燃的基础。

听源性惊厥易感性大鼠上丘神经元构筑的研究

用石蜡切片Nissl染色方法，光镜下计数、结合计算机图象分析系统观察、测量惊厥鼠与正常鼠土丘神经元的一些指标．结果显示：（1）在吻例段和中段上丘第Ⅱ层和吻侧段上丘第Ⅲ层的神经元胞体平均直径惊厥鼠显著小于正常鼠，说明惊厥鼠上丘上述部位神经元较小；（2）在吻侧段上丘第Ⅵ层，中段上丘第Ⅰ、Ⅱ层和屋倒段上丘第Ⅴ层，神经元剖面椭圆率惊厥鼠显著地小于正常鼠，说明惊厥鼠土丘上述部位神经元胞体较细长；（3）除第Ⅲ层外，土丘各板层神经元剖面面数密度惊厥鼠都大于正常鼠．本研究结果表明，惊厥鼠的土丘有神经元的形态学变化。这种变化与惊厥鼠惊厥易感性的形成之间是否存在着某种关系，有待深入研究．

大鼠、金黄地鼠和家兔视网膜内一氧化氮合酶分布的比较

用ＮＡＤＰＨ黄递酶组织化学染色法（ＮＤＰ）观察了正常成年大鼠、金黄地鼠和家兔视网膜内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布，并比较了３种不同动物的区别。结果显示，在视网膜内ＮＯＳ阳性神经元主要为分布于内核层的无长突细胞、节细胞层的移位无长突细胞和少数节细胞。不同种类动物的视网膜内，ＮＯＳ阳性细胞的配布、密度和细胞形态均有差异。大鼠视网膜内ＮＯＳ阳性细胞多属于内核层无长突细胞和节细胞层移位无长突细胞，偶见于视网膜节细胞。金黄地鼠视网膜内ＮＯＳ阳性细胞分布于内核层无长突细胞和节细胞层的移位无长突细胞，ＮＯＳ阳性节细胞的数目比大鼠多。家兔视网膜内ＮＯＳ阳性细胞仅见于内核层无长实细胞。金黄地鼠视网膜ＮＯＳ阳性细胞分市密度最大，平均为１４１．４２个细胞／ｍｍ２；大鼠和家兔视网膜ＮＯＳ阳性细胞分布密度相似，分别平均为３５．９８个细胞／ｍｍ２和４１．５４个细胞／ｍｍ２。实验结果提示，一氧化氮可能作为一种重要的神经递质参与视觉信息的形成、整合和传递。

听源性惊厥易感大鼠点燃后海马结构内生长相关蛋白的表达

用免疫细胞化学方法结合体视学分析，研究了Wistar大鼠的听源性惊厥易感大鼠（P77PMC）惊厥和点燃后海马结构内生长相关蛋白表达的差异、结果显示：（1）P77PMC大鼠一次惊厥后，海马结构内有广泛的生长相关蛋白免疫反应产物沉积，其分布呈板层样；（2）P77PMC大鼠点燃后，生长相关蛋白免疫反应产物的分布特征与一次惊厥后相比较，无明显变化，但是，海马CA3区苔藓纤维层生长相关蛋白免疫反应产物的光密度值显著增加（P＜0．01）。结果表明，听源性惊厥点燃能够诱导海马结构内生长相关蛋白表达增加。本文还对生长相关蛋白表达增加的生物学意义进行了讨论．

大鼠海马结构在空间辨别性学习记忆时的突触形态可塑性的定量研究

目的 观察由空间辩别性学习记忆活动引致的大鼠海马结构的突触可塑性变化。方法 本研究继电子显微镜下 ,对空间辨别性学习记忆模型大鼠和对照大鼠海马结构内突触形态学的对比性观察之后 ,又对两组大鼠海马结构内突触复合体进行了体视学指标的测算。结果 模型组大鼠海马CA3区多形层内突触数密度 (77 81± 16 0 0 )个 / μm3、突触活性点膜面积 (0 0 37± 0 0 0 8) μm2 / μm3、突触小泡的数量 (16 9946 86± 195 92 5 8)个 / μm3、线粒体的体积 (1 70± 0 86 ) %和数密度 (8777 5 4± 2 0 2 0 32 )个 / μm3 均比对照组大鼠的大或多 ,对照组大鼠以上指标分别为 :(2 8 35± 1 31)个 / μm3、(0 0 15± 0 0 0 2 ) μm2 /μm3、(6 4380 2 7± 872 8 6 6 )个 / μm2 、(0 5 8± 0 35 ) %、(2 2 82 46± 72 7 6 9)个 / μm3,其差异有高度显著性 (P <0 0 1)。结论 正常生理活动也可引致神经发生突触可塑性变化 ;突触可塑性变化的形式不仅包括突触复合体各结构的增大同时包括突触数量增多 ;突触活性点膜面积增大 ;突触小泡的数量增多和体积增大 ;突触前膨大内线粒体数量增多和体积增大。

用水迷宫检测大鼠空间辨别性学习记忆的探讨

目的 寻找把脑形态与功能结合起来加以研究的可靠方法.方法 用水迷宫训练大鼠建立空间辨别性学习记忆模型.结果 (1)用水迷宫每天训练10次,连续7天即可达到预定的模型标准;(2)用此方法建立的模型动物在海马结构内均表现出实验效应;(3)在建立模型的过程中发现在训练的第5天有学习的平台期出现.结论 水迷宫训练试验能有效地分辨大鼠的空间记忆能力.

自发性高血压大鼠视网膜内含一氧化氮合酶神经元的研究

本实验用ＮＡＤＰＨ－黄递酶（ＮＤＰ）组织化学染色法观察了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和京都种大鼠（ＷＫＹ，正常对照）视网膜内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化。结果显示，ＮＯＳ阳性神经元位于内核层和视网膜节细胞层。ＳＨＲ组视网膜ＮＯＳ阳性细胞属无长突细胞和移位无长突细胞。偶见阳性的节细胞。ＮＯＳ阳性无长突细胞和节细胞胞质显强阳性反应，可见较长而清晰的突起。ＮＯＳ阳性神经元的分布密度大，且在视网膜中央区（视神经盘附近）的分布密度略大于周围区。在ＷＫＹ正常对照组，ＮＯＳ阳性无长突细胞和节细胞的反应不如ＳＨＲ组强，突起较短且纤细。ＮＯＳ阳性细胞的分布密度低于ＳＨＲ组。自发性高血压大鼠视网膜无长突细胞内一氧化氮合酶表达增加，提示一氧化氮在视网膜缺氧缺血的情况下，可能参与神经细胞损伤的过程，具有神经毒性。

自发性高血压大鼠脊髓中间外侧核含一氧化氮合酶神经元的研究

目的：研究新的神经递质ＮＯ在脊髓血压调节中枢的作用机理。方法：用ＮＤＰ组化方法观察ＮＯＳ在脊髓ＩＭＬ的分布。结果：ＮＯＳ细胞分布正常（ＷＫＹ）和自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）脊髓ＩＭＬ全长。ＳＨＲ在Ｃ＿８～Ｔ＿４节段，ＮＯＳ细胞多于ＷＫＹ；在中胸以下节段ＮＯＳ细胞分布少于ＷＫＹ，均有显著性差异。结论：ＮＯ局部作用可能调节交感神经的兴奋性。ＳＨＲ交感神经紧张性增高，可能与中胸以下ＮＯＳ减少有关；ＮＯＳ在Ｃ＿８～Ｔ＿４节段增加可能与心脏向心性肥厚的代偿性活动有关。

低剂量γ—射线照射孕鼠导致生后三天大鼠脑的异常改变

本文采用克紫(cresyl violet)染色和免疫细胞化学方法对在受孕13天时接受一次^(60)Co(1.0GY)γ-射线全方位照射的大鼠所生的鼠仔,在生后三天时观察了其脑内部结构的改变。照射组侧脑室背侧和海马背侧,出现大小不等、形态各异、排列紊乱并聚集成异常结节样的细胞团。细胞团内偶见S-100和神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫阳性细胞,未见生长抑素、亮氨酸脑啡肽、后卟加压素和血管活性肠多肽免疫阳性细胞分布。此四种活性物质在脑内异常结节样细胞团以外的分布,以照射组免疫阳性细胞数目、分布区域、以及细胞胞体内免疫阳性颗粒少于正常对照组为主要特征。从总体上来看,小剂量的γ-射线照射孕鼠对大鼠脑生后发育是有影响的,其放射损伤是器质性病变,不可逆的。

听源性惊厥点燃诱导一氧化氮合酶表达增加

为探讨一氧化氮（ＮＯ）在听源性惊厥点燃中的可能作用，用ＮＡＤＰＨ－黄递酶组织化学方法和Ｆｏｓ免疫细胞化学方法，研究了听源性惊厥易感大鼠惊厥和点燃后听觉核团和前脑结构内ＮＯＳ－Ｆｏｓ双重阳性神经元的分布及差异。结果显示：一次惊厥后，下丘内双重阳性神经元较多，近７０％～８０％的ＮＯＳ阳性神经元呈Ｆｏｓ阳性，其他听觉核团和前脑结构内仅见少量ＮＯＳ－Ｆｏｓ双重阳性神经元。点燃后，听觉核团和前脑结构内ＮＯＳ－Ｆｏｓ双重阳性神经元明显增加，而且嗅周皮质第Ⅱ层浅部多数ＮＯＳ弱阳性神经元呈Ｆｏｓ阳性，第Ⅲ层出现大量ＮＯＳ－Ｆｏｓ双重阳性神经元。上述结果表明，听源性惊厥点燃诱导ＮＯＳ表达增加。

大白鼠下行脊髓固有束的起始细胞和背外侧索核在脊髓内的联系

用尖端直径约120μm的微玻管,向大白鼠右侧胸髓中下部(T_(7)~T_(11))注入HRP水溶液,观察大白鼠下行脊髓固有束的起始细胞的分布和背外侧索核在脊髓内的联系。下行脊髓固有束起始细胞见于注射部头侧脊髓的双侧。7只实验动物中,注射部同侧有31000个标记细胞,对侧有31663个。标记细胞分布的高峰节段,右侧为T_(3)~T_(5),占同侧标记细胞的38.17%;左侧为T_(1)~T_(5),占49.78%。横切面上按Rexed细胞构筑分层,标记细胞见于脊髓双侧Ⅰ~Ⅹ层。以Ⅶ层最多,其次为Ⅷ层和Ⅳ层。该结果说明,大白鼠下行脊髓固有束主要起始于Ⅶ、Ⅷ和Ⅳ层,其他各层也参与脊髓节段间的联系。背外侧索核有到下部脊髓的下行投射。

听源性惊厥易感性大鼠上丘一氧化氮合酶阳性神经成分的分布

用还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶，简称黄递酶（ｒｅｄｕｃｅｄｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅｄｉｎｕ－ｃｌｅｏｔｉｄｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｉａｐｈｏｒａｓｅ，ＮＡＤＰＨ－ｄ）组织化学的方法，在光镜下对ＮＡＤＰＨ－ｄ反应阳性细胞进行计数和计算机图像分析测定反应产物的光密度（ｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙ，ＯＤ）值，观察一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元及纤维在惊厥鼠上丘分布的情况。实验动物为听源性惊厥易感性大鼠，简称惊厥鼠（Ｐ７７ＰＭＣ）和正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠，简称正常鼠。实验结果如下：（１）在大鼠上丘第Ⅰ层ＮＯＳ阳性神经元呈密集均匀分布，在第Ⅳ层其分布也是均匀的但较稀疏，第Ⅶ层只有少量ＮＯＳ阳性神经元散在分布于中部。第Ⅰ、Ⅳ、Ⅶ层ＮＯＳ阳性神经元的大小和形态是一致的。在第Ⅰ、Ⅶ层ＮＯＳ阳性神经元呈上丘的背腹方向排列。在第Ⅳ、Ⅵ层有密集的ＮＯＳ阳性纤维。（２）上丘ＮＯＳ阳性神经元的数目以在急性发作的惊厥鼠最多，其次为非急性发作的惊厥鼠和电铃刺激的正常鼠，而在无电铃刺激的正常鼠最少。（３）ＮＯＳ阳性反应的ＯＤ值在各组大鼠间无显著性差异。本研究结果显示，上丘ＮＯＳ阳性神经成分的分布有特异性；ＮＯＳ酶的活性在惊厥鼠是增高?

含P物质神经纤维和细胞在大鼠脊髓背外侧索核区的定量分析

用免疫细胞化学法和计算机图像分析仪,定量分析大鼠脊髓背外侧索核(NDLF)区含P物质(SP)的纤维和神经元。在光镜下,脊髓全长的NDLF区,有SP阳性纤维和细胞呈三角形或楔形分布的密集区。用计算机图像分析仪测量该区轮廓所得面积,命名为参考面积,对输入图像做交互式分割处理后,选择最佳图像灰度,所得NDLF区内SP阳性纤维和细胞面积之和,命名为场面积,并计算了场面积对参考面积的比。颈髓的参考面积平均为47931.38μm^2,场面积平均为21995.25μm^2,场面积对参考面积之比为45.89％,胸髓分别为31575.15μm^2,7646.85μm^2和24.22％,腰、骶髓分别为26889.89μm^2,8470.66μm^2和31.50％。总之,SP阳性纤维和细胞在颈髓分布面积较大,密度较高,腰、骶髓次之,胸髓较小,密度较稀疏,尤以T_8～T_(10)分布最少。

大鼠脑桥背侧被盖区含L-ENK和SP的神经元

本实验用成年雄性Wistar大鼠,以免疫细胞化学法、计算机图象分析法研究了大鼠脑桥背侧被盖区含亮氨酸脑啡肽(L-ENK)和P物质(SP)神经元的分布和形态。含L-ENK的神经元分布于Gudden背侧被盖核的背部和腹部(DDT、VDT),以及外背侧被盖核(LDT)。DDT内含L-ENK的细胞多而密集,周围有深染的神经纤维。胞体形态以圆形和卵圆形为主。随机测量免疫反应阳性细胞,平均等效径为12.18μm。VDT和LDT内含L-ENK细胞少,染色较浅。VDT的胞体为圆形和卵圆形,平均等效径为12.24μm。LDT的胞体为多边形,平均等效径为15.67μm。含SP的神经元仅见于LDT,细胞数量较多,胞体较大,呈多边形,平均等效径是20.39μm。本研究的结果显示:DDT,VDT和LDT各核内含L-ENK神经元的分布密度,细胞形态和大小均有所不同。DDT较密集,LDT细胞较大。LDT内含SP和L-ENK神经元多数可归为两类,含SP的胞体较大含L—ENK的胞体较小。DDT,VDT和LDT不同形态的含肽细胞可能与它们不同的中枢联系和功能有关。