ST6GalⅠ调控胃癌细胞SGC7901增殖迁移能力的初步研究

目的:探讨唾液酸转移酶(ST6Gal I)对人胃癌细胞(SGC7901)增殖和迁移能力的影响。方法:采用脂质体2000(Lipofectamine 2000),构建ST6Gal I高表达和ST6Gal I低表达细胞株,以空载体(Vector)作为对照组。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测转染后SGC7901细胞中ST6Gal I的m RNA水平;用细胞CCK-8试剂盒及Transwell小室实验检测转染前后细胞的增殖、迁移情况。结果:成功构建稳定转染单克隆细胞株分别为Vector、X61-4和PS7;与Vector组相比,PS7组的m RNA表达水平显著增加(P<0.05),X61-4组则显著降低(P<0.05);X61-4的细胞增殖明显高于PS7细胞(P<0.05);胃癌细胞ST6Gal I的表达水平与细胞迁移能力成正相关,PS7组的迁移率显著高于X61-4组(P<0.01)和Vector组(P<0.01),X61-4组的迁移率低于Vector组(P<0.05)。结论:细胞实验表明,降低ST6Gal I的表达可以有效促进胃癌SGC7901细胞的增殖能力,而上调ST6Gal I可以增强胃癌细胞的迁移能力。因此,ST6Gal I是与肿瘤增殖和转移相关的基因,是潜在的肿瘤分子治疗靶点。

FK228和雷帕霉素协同促进人乳腺癌细胞凋亡和细胞周期阻滞

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitor,HDACi）FK228和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,m TOR）特异性抑制剂雷帕霉素（rapamycin,Rapa）联合应用对体外人乳腺癌细胞株生长和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法：以乳腺癌细胞系MDA-MB-435和MCF-7为研究对象,经不同浓度的FK228和雷帕霉素处理后,磺酰罗丹明B（SRB）比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率,计算两药的联合指数;Western blotting检测乳腺癌细胞中凋亡相关蛋白、周期调控蛋白以及核酸相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期。结果：（1）FK228或雷帕霉素单独使用时均抑制肿瘤细胞生长,抑制率与时间、剂量呈正相关;当总抑制率为50%~70%时联合指数（CI）值小于1,提示两药联合应用具有协同效应;（2）联合用药后,凋亡蛋白表达较单药使用组明显升高（P〈0.05）;同时,p-Akt蛋白表达下降,活化的caspase-3表达上调;（3）联合用药后,周期调控蛋白表达较单药使用组明显下降（P〈0.05）,细胞周期阻滞在G2/M期;联合用药后出现更为显著的H2AX的磷酸化和H3的乙酰化（P〈0.05）。结论：FK228和雷帕霉素联合给药能协同促进人乳腺癌细胞凋亡和细胞周期阻滞,具有良好的抗肿瘤前景。

现代化门诊药房的自动化管理模式探讨

目的推动医院门诊药房自动化管理模式发展。方法结合我院自动化门诊药房的建立,将医院HIS、智能取号、欧娲(ROWA)自动发药、RFID智能药框等系统的应用情况进行总结讨论,以期实现药品调配准确化,药品管理现代化。结果与结论现代化设备的应用改善了工作环境,提高了工作效率,降低了劳动强度,给我院增加了新的服务内涵和竞争力,提升了我院的服务品牌。

克拉霉素干混悬剂致尿色异常1例

克拉霉素是临床常用抗菌药物之一,具有疗效好、安全性高、不良反应少等特点,尿色异常是其非常罕见的不良反应之一。该文通过对1例门诊患者用药情况进行回顾性分析,研究了克拉霉素可能引发的不良反应,旨在为临床安全用药提供借鉴。

人T-bet和HBV-L共表达质粒的构建及体外表达

目的构建人转录因子T-bet基因与乙肝病毒表面抗原大蛋白全长基因(hepatitis B virus surface antigen large protein,HBV-L)的共表达载体,并检测其在体外的表达。方法利用PCR及基因重组技术,以人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的cDNA为模板,扩增获得人T-bet全长基因,以含有HBV-L的质粒pcDNA3.1-HBV-L为模板,扩增获得HBV-L基因,将上述2个基因克隆至真核表达质粒p IRES中,获得共表达质粒p IRES-T-bet-HBV-L。将该质粒转染293T细胞,经RT-PCR、ELISA和细胞免疫荧光试验检测其在真核细胞中的表达。结果限制性酶谱分析及测序证实重组质粒p IRES-T-bet-HBV-L构建成功;该质粒在体外转染293T细胞后,可表达T-bet与HBV-L两者的mRNA;细胞免疫荧光试验和ELISA检测结果证实,该质粒转染293T细胞后可表达T-bet和HBV-L蛋白。结论成功构建了共表达质粒pIRES-T-bet-HBV-L,该质粒能在293T细胞中表达。

白头翁汤对链脲佐菌素诱导的糖尿病肝损伤的保护作用研究

目的观察白头翁汤对链脲佐菌素(STZ)诱导的I型糖尿病小鼠肝损伤的治疗效果。方法单次ip STZ(180 mg/kg)建立1型糖尿病小鼠模型,对照组给予等量的柠檬酸缓冲液。挑选血糖值≥15 mmol/L的小鼠随机分为模型组、二甲双胍组及白头翁汤低、中、高剂量(生药2.5、5.0、10.0 g/kg)组,对照和模型组给予等体积生理盐水,连续ig给药4周。末次给药24 h后,称各组小鼠体质量,测空腹血糖;试剂盒法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,检测血清及肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,HE染色观察肝组织病理组织学损伤。结果给药4周后,与模型组比较,白头翁汤中、高剂量组动物体质量显著升高、空腹血糖值显著降低(P<0.05、0.01);中、高剂量组血清ALT、AST、ALP、TNF-α、IL-6水平显著下降(P<0.05、0.01、0.001);中、高剂量显著降低血清及肝组织中MDA含量,高剂量显著提升血清及肝组织中SOD活力,中、高剂量显著增加血清GSH-Px水平,高剂量显著增加肝组织GSH-Px水平(P<0.05、0.01)。HE染色显示白头翁汤可以改善肝脏病理组织学损伤。结论白头翁汤可以有效改善STZ诱导的糖尿病肝损伤,机制与减轻脂质过氧化、增强机体清除自由基能力以及抗炎作用有关。