健脾祛湿方对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及机制研究

目的:探讨健脾祛湿方对小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及其分子机制。方法:应用C57BL/6小鼠建立脾虚湿滞型结肠炎模型。观察各组小鼠疾病活动评分(DAI)、肠道炎症指数及肠道组织病理;应用免疫组化检测肠道组织中Treg细胞的浸润情况;ELISA法检测血清中炎症因子水平。结果:与模型组比较,健脾祛湿方组及美沙拉嗪组小鼠肠道症状均有减轻,且小鼠结肠远端组织炎症损伤程度较低,肠道组织中Treg细胞数量升高,血清IL-6、IL-12、IL-22水平降低,IL-10、TGF-β水平升高。健脾祛湿方与美沙拉嗪疗效相当。结论:健脾祛湿方通过上调Treg细胞的活性及调整炎症因子表达水平,对溃疡性结肠炎免疫反应起到抑制作用。

槐耳清膏对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探究槐耳清膏对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法应用MTS、Transwell、流式细胞术及Western blot等研究槐耳清膏对人结直肠癌细胞系的抑制作用,并建立小鼠动物模型。结果MTS表明槐耳清膏能够抑制SW480细胞增殖;Transwell表明槐耳清膏可抑制SW480侵袭能力;流式细胞术表明槐耳清膏可诱导SW480细胞凋亡;Western blot显示槐耳清膏可上调Bax,cleavage caspase-3,抑制Bcl-2等蛋白;小鼠体内皮下成瘤实验提示亦可抑制肿瘤生长。结论槐耳清膏可抑制结直肠癌细胞的增殖及侵袭能力,并可诱导SW480细胞凋亡,其作用机制可能与激活Bcl-2/Bax/Cleaved caspase-3凋亡相关信号通路相关。

纳米碳淋巴结示踪剂在结直肠癌根治术中的应用

目的:探讨术前行肠镜纳米碳淋巴结示踪法在结直肠癌根治术中的应用价值。方法:采用病例对照研究方法,回顾性收集2016年3月至2018年3月期间,中山大学附属第六医院收治的、术前明确为结直肠癌、接受结直肠癌根治术并有完整术后病理资料的患者,排除术前诊断为肠梗阻、急诊手术及肿瘤复发再次手术者,共1 421例结直肠患者符合纳入排除标准,其中术前通过肠镜行纳米碳示踪156例,未行纳米碳示踪1 265例。病例对照匹配按照1∶3根据患者性别、体质量、肿瘤T分期和TNM分期以及术前化疗等方面进行匹配,最终纳入纳米碳示踪组145例,对照组435例。纳米碳示踪组患者于术前2.4(1.0~14.0)d行肠镜检查,在距离肿瘤边缘约0.5~1.0 cm处黏膜下,注射纳米碳混悬液,采用4点注射法,分别在0点、3点、6点、9点方向注射0.25 ml。比较两组淋巴结检出总数、阳性淋巴结检出数及淋巴结阳性率,并分析不同T分期、N分期、TNM分期、是否新辅助化疗等亚组中,两组淋巴结检出情况。结果:病例对照匹配后,纳米碳示踪组淋巴结检出总数高于对照组[(22.2±11.2)枚比(19.0±9.5)枚, t=3.025, P=0.003],差异有统计学意义。两组间淋巴结阳性数和淋巴结阳性率的差异无统计学意义(均 P>0.05)。亚组分析显示,纳米碳示踪组的淋巴结检出总数在T 3期(中位数:22枚比18枚, Z=2.435, P=0.015)、N 0期(中位数:20.5枚比17.5枚, Z=2.772, P=0.006]、TNM分期Ⅱ期(中位数:23.5枚比19.0枚, Z=2.654, P=0.008)和术前化疗人群中(中位数:22.5枚比13.0枚, Z=3.287, P=0.001),均高于对照组;但纳米碳示踪组N 2期阳性淋巴结数(中位数:4.0枚比6.5枚, Z=-2.530, P=0.011)和淋巴结转移度(中位数:16%比31%, Z=-2.862, P=0.004)均低于对照组,差异均有统计学意义。 结论:纳米碳淋巴示踪技术能有效提高结直肠癌根治手术淋巴结检出数。

细胞程式死亡-配体1通过糖基化修饰促进结直肠癌转移的机制

目的探讨细胞程式死亡-配体1(PD-L1)糖基化修饰在结直肠癌转移中的机制。方法对2014年至2015年中山大学附属第六医院收治的401例结直肠癌患者的临床资料进行总结,其中PD-L1低表达组321例,高表达组80例,并进行卡方检验及生存分析。应用免疫组织化学及免疫印迹及独立样本t检验检测PD-L1在发生转移与否的结直肠癌肿瘤组织中的表达水平及相对分子质量差异;构建PD-L1-Knock-out稳表达细胞株并采用Transwell检测并使用独立样本t检验验证其侵袭迁移能力变化;通过糖基酶实验明确PD-L1是否存在糖基化修饰并通过蛋白质谱分析鉴定糖基化位点。结果PD-L1在发生转移的结直肠癌患者中高表达(0.260±0.029比0.810±0.036),且PD-L1相对分子质量由33000处位移至约45000处;PD-L1-Knock-out的细胞株其侵袭迁移能力变弱[PD-L1-Knock-out细胞株(92.330±10.400)个比对照株(175.000±9.074)个,t=5.990,P<0.01],并证实PD-L1在结直肠癌中存在N-糖基化修饰且N192/N200为关键的糖基化位点。结论PD-L1在转移性结肠癌组织中高表达,其内在机制可能与PD-L1的N192及N200位点糖基化修饰相关。