超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱法比较分析竹节参根与根茎中多元指标成分

目的建立超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱法(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定竹节参根与根茎中皂苷、氨基酸及核苷类共33种成分含量的方法。方法采用XBridge C_(18)(4.6 mm×100 mm,3.5μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),柱温30℃,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定。根据33种目标成分的含量,采用聚类、非线性映射及主成分分析进行综合评价。结果33种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.9990;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为96.90%~101.6%,RSD均≤3.6%。统计分析结果显示从33种成分的含量角度,竹节参根与根茎中皂苷、氨基酸及核苷类成分较为相似。结论所建立的方法准确、可靠,可为竹节参药材内在质量的综合评价和全面控制提供新的方法参考,同时为竹节参根的开发利用提供基础资料。

不同贮藏条件对麦冬药材质量的影响

目的:基于多种成分同时测定结合统计分析考察不同贮藏条件对麦冬药材质量的影响。方法:采用超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)法同时测定不同贮藏条件下麦冬药材中甾体皂苷、高异黄酮、氨基酸和核苷类共29种成分的含量,结合聚类分析和主成分分析,对不同贮藏条件下麦冬样品进行综合评价。结果:29种化合物在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系,r均大于0.9990;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为97.64%～102.98%,RSD均小于5%。麦冬的适宜贮藏条件为以麻袋为外包装存放于阴凉库。结论:该研究建立的方法准确、可靠,可用于麦冬药材内在质量的综合评价,同时可为麦冬药材适宜储藏条件的优选提供基础资料。

不同干燥方法对麦冬多元活性成分的影响

探究不同干燥方法对麦冬多元活性成分的影响。采用超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定不同干燥方法下麦冬中甾体皂苷、高异黄酮、氨基酸及核苷类共29种活性成分的含量;根据29种目标成分的含量,用聚类分析(HCA)及主成分分析(PCA)对不同干燥方法下麦冬进行综合评价。结果表明,29种目标成分在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0. 999 0;精密度、重复性、稳定性良好,RSD均小于5%;平均加样回收率为97. 02%～102. 78%,RSD均小于5%。PCA结果显示,以晒干、无硫烘干的麦冬样品综合质量较优。所建立的方法准确、可靠,可用于麦冬药材内在质量的综合评价,该研究可为揭示麦冬传统干燥方法科学内涵提供依据,同时为麦冬产地加工时干燥方法的优选提供基础资料。

基于液相色谱-串联质谱结合多元统计分析盐胁迫下金银花代谢产物积累的变化

目的探究盐胁迫下金银花中代谢产物积累的变化。方法采用超快速液相色谱-串联三重四级杆飞行时间质谱(UFLC-Triple TOF-MS/MS)对金银花盐胁迫组与对照组样品进行分析,用主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)进行数据处理,找出潜在的差异代谢物;通过一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合质谱数据库搜索、标准品比对及相关文献进行差异成分鉴定。然后用超快速液相色谱-三重四级杆线性离子阱串联质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)对15个目标差异成分进行测定,并作灰色关联分析(GRA)。结果金银花盐胁迫组与对照组的样品得到有效区分,筛选并鉴定31个差异成分;15个目标差异成分呈现不同的变化规律,GRA分析初步表明适度的盐胁迫可促进金银花中药效成分的合成与积累。结论为盐胁迫下金银花的质量评价及提高金银花的药用价值提供了新思路。

超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法同时测定连翘药材中的多元活性成分

建立了基于超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定连翘药材中苯乙醇苷类、木脂素类、黄酮类及酚酸类共21种活性成分含量的方法。采用响应面法(RSM)优化连翘药材的提取条件;以XBridge?C18(4.6 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱分离,水(含0.1%甲酸)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温为30℃,进行多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,最佳提取条件为:甲醇体积分数72%,液料比38∶1 mL/g,提取时间60 min。21种目标成分在一定质量浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数(r)均不小于0.999 0;检出限和定量下限分别为0.001~233.710 ng/mL和0.002~771.250 ng/mL;精密度、重复性和稳定性良好;平均加标回收率为98.6%~102%,相对标准偏差(RSD)为0.89%~3.8%。该方法准确、可靠,可为连翘药材内在质量的综合评价和全面控制提供参考。

鸡血藤韧皮部环数与多指标成分的相关性分析

建立了超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱串联质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定鸡血藤中黄烷醇、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查耳酮、紫檀烷、花色素及酚酸类共22种指标成分含量的方法,并对不同韧皮部环数的鸡血藤药材质量进行分析与评价。采用XBridge■C18柱(4.6 mm×100 mm,3.5μm)分离,以0.3%甲酸水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.8 mL·min-1,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定。根据22种目标成分的含量,用主成分分析(PCA)对3个产区88个批次的不同韧皮部环数鸡血藤药材进行综合评价。结果表明,22种目标成分的质量浓度与对应峰面积均呈良好线性关系(r≥0.999 0),检出限(LOD)为0.07~7.99 ng·mL-1,定量下限(LOQ)为0.22~26.63 ng·mL-1,平均加标回收率为96.8%~103%,相对标准偏差为0.80%~4.4%。韧皮部环数与多指标成分含量具有一定正相关性,高要、越南、老挝三产区分别以韧皮部环数10环、8环、9环的鸡血藤中指标成分含量较高;所分析样品中以高要产区韧皮部环数10环、9环的鸡血藤药材综合质量较好。该文建立了鸡血藤韧皮部环数与指标成分含量的相关性,可为根据性状特征评价鸡血藤的药材质量提供科学依据,亦为阐明中药传统经验精髓"辨状论质"的科学内涵提供新的思路和方法。

基于UFLC-Triple TOF MS/MS技术分析竹节参中皂苷类成分

采用超快速液相色谱-三重四极杆飞行时间质谱技术对竹节参中皂苷类成分进行分析。采用色谱柱SynergiTM Hydro-RP 100A(2.0 mm×100 mm,2.5μm),以0.1%甲酸-水(A)-0.1%甲酸-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾负离子扫描模式下采集数据。根据高分辨质谱提供的准分子离子和碎片离子的精确分子质量信息,结合标准品对照与参考相关文献数据,初步鉴定出53种皂苷,包括18种原人参二醇型、21种原人参三醇型、10种齐墩果烷型和4种奥寇梯木醇型皂苷。本实验可为探索竹节参药材的药效物质基础和建立其药材品质的综合评价体系提供基础资料。

川麦冬药材的特征图谱研究

目的:建立川麦冬药材的HPLC特征图谱,为科学评价和有效控制其质量提供可靠方法。方法::基于HPLC-ELSD法对20批次川麦冬药材进行特征图谱研究,采用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);以水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱;柱温30℃;流速1.0mL/min;进样量10μL,蒸发光散射检测器检测;漂移管温度:95℃,雾化器温度:90℃,气体流速:1.6L/min。结果:采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价,20批次川麦冬药材相似度均大于0.99,建立了川麦冬HPLC特征图谱,共有7个共有峰,并对其中4种甾体皂苷及高异黄酮类成分进行指认。结论:该研究所建立的川麦冬HPLC特征图谱的方法准确可行,可为川麦冬药材提供质量控制手段。

麦冬与山麦冬中多元指标成分的比较分析

建立超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定麦冬类药材中甾体皂苷、高异黄酮、氨基酸与核苷类共33种指标成分含量测定的方法,并结合多元统计分析对麦冬类商品药材进行比较分析。采用SynergiTMHydro-RP 100(2. 0 mm×100 mm,2. 5μm)色谱柱,以0. 1%甲酸水-0. 1%甲酸乙腈为流动相,流速0. 4 mL·min-1,梯度洗脱,多反应监测模式检测(MRM);用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)进行数据处理和分析。结果显示,33种目标成分在一定浓度范围内线性关系良好(r> 0. 999 0);加样回收率为96. 23%102. 0%,RSD均小于5. 0%。麦冬与山麦冬化学成分差异明显,找出7种差异显著的化学成分。该研究为麦冬类药材内在质量的综合评价和全面控制提供依据,同时为麦冬与山麦冬的药材鉴别提供新的方法参考。

金银花分子生物学研究进展

分子生物学(molecular biology)是从分子水平阐明生命现象和本质的科学,其发展为传统生药学的研究提供了新的生物技术和方法。金银花作为常用大宗药材之一,国内外学者在深入研究传统方法的基础上,采用分子生物学手段对其展开真伪鉴别、品质评价和控制等方面的相关研究,并取得了一定成果。该文主要综述了近年来分子生物学技术方法在金银花鉴别、有效成分生物合成的分子机制以及胁迫条件下次生代谢产物积累的分子机制研究,并针对基于杂交技术的标记(RFLP)、基于PCR的分子标记(RAPD,AFLP,SSR,ISSR)和基于DNA序列分析的SNP及DNA条形码对金银花的多样性识别、诊断、鉴定等方面进行了详细的总结,同时提出可以采用多组学技术,构建系统生物学技术和平台,建立次生代谢产物生物合成的相关模型,从而更好地研究金银花活性成分生物合成的分子机制以及药用植物在环境胁迫下的相关代谢产物的合成和积累等生命活动规律并进行调控,为进一步推动金银花现代化及其他中药资源的开发利用提供支撑与参考。

不同加工麦冬中多元活性成分的含量测定及多元统计分析

目的:建立超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定麦冬中甾体皂苷、高异黄酮、氨基酸及核苷类共32个成分含量的方法,考察不同加工方法对麦冬药材中多元活性成分的影响。方法:采用SynergiTM Hydro-RP 100?柱(2.0 mm×100 mm,2.5μm),以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,柱温30℃,多反应离子监测(MRM)模式检测;用灰色关联度分析(GRA)和TOPSIS方法对多元活性成分进行综合评价。结果:32个成分在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999 0;精密度、重复性、稳定性良好,RSD均小于5%;平均加样回收率为97.4%~102.0%,RSD均小于5%。GRA和TOPSIS分析结果显示,S5、S6样品综合质量较好。结论:所建立的方法准确、可靠,可用于麦冬药材内在质量的综合评价,该研究可为麦冬适宜产地加工方法的优选及其加工方法的规范化和标准化提供基础资料。

道地药材品质形成机制的组学研究思路

道地药材一直是中药材的＂品质标杆＂,地位不可撼动。道地药材的品质形成从分子层面的基因遗传到最终产物的代谢表型都有涉及,其次生代谢产物的生物合成途径至今并未完全阐明。近年来,不断丰富的组学技术在揭秘复杂生物系统如何运作上功不可没,也同样适用于道地药材复杂的品质形成机制探索。为了缓解道地资源日益匮乏的现状,科学地指导优质品种的移栽,该文综述了组学在解读道地药材从基因到表型的变化过程、次生代谢产物的生物合成途径、与人体的相互作用和品质评价的新方法这些方面的研究成果,为更好地保护和利用中医药资源提供思路。

鸡血藤中多元活性成分动态积累的分析与评价

建立超快速液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定鸡血藤中黄烷醇、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查耳酮、紫檀烷、花色素及酚酸类共21种活性成分含量的方法,并对其多元活性成分的动态积累进行分析与评价。采用XBridge?C18柱(4.6 mm×100 mm,3.5μm),以0.3%甲酸水-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温30℃,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定;用灰色关联度分析(GRA)对多元活性成分进行综合评价。结果表明,21种目标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r>0.9990);平均加样回收率为97.46%~103.6%,RSD均小于5.0%。鸡血藤中各成分的积累动态不一,11月上旬至12月上旬采收的鸡血藤药材综合质量较好,与当地传统采收期相符。该研究为揭示鸡血藤中多元活性成分的动态积累规律及确定其药材的适宜采收期提供基础资料,同时为鸡血藤药材内在质量的综合评价提供新的方法参考。

基于多元活性成分同时测定结合多元统计分析评价不同产地连翘药材的质量

目的基于多元活性成分同时测定结合多元统计分析综合评价不同产地连翘药材的质量。方法采用超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定不同产地连翘药材中苯乙醇苷、木脂素、黄酮及酚酸类共21种活性成分的含量;根据21种目标成分的含量,用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)及单因素方差分析(One-way ANOVA)对不同产地连翘药材进行综合评价。结果 HCA结果显示,连翘3个主产区14批药材样品分为2类,第1类为产地山西陵川、陕西合阳、河南辉县、河南林川和河南洛阳,第2类为产地山西安泽和山西古县;PCA结果显示,山西产连翘药材的综合质量优于陕西和河南;One-way ANOVA结果显示,所测成分中,绿原酸、阿魏酸、紫云英苷、牛蒡子苷、木犀草素、连翘酯苷B、连翘酯苷A、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘苷和松脂醇10种成分在连翘3个主产区样品间存在显著差异。结论所构建的多元活性成分同时测定结合多元统计分析的综合评价体系,成功地应用于不同产地连翘药材的质量评价,可为连翘药材内在质量的综合评价和全面控制提供新的方法参考,亦为连翘药材的道地性研究提供基础资料。

不同加工竹节参中多元活性成分同时测定及灰色关联度分析

建立超快速液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定竹节参中皂苷、氨基酸及核苷类共33种成分含量的方法,考察不同加工方法对竹节参药材中目标成分的影响。采用XBridge■C18(4.6 mm×100 mm, 3.5μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定;用灰色关联度分析(GRA)对不同加工竹节参进行综合分析与评价。结果表明,33种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.999 0;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为95.33%~101.8%,RSD均小于5%。GRA评价结果显示,微波干燥、完整根茎不去皮的竹节参样品综合质量较好。所建立的方法准确、可靠,可用于竹节参药材内在质量的综合评价,该研究可为竹节参适宜产地加工方法的优选及其加工方法的规范化和标准化提供基础资料。

超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱法同时测定鸡血藤不同产地及商品药材中多元活性成分

目的建立超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱法(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定鸡血藤不同产地及商品药材中黄烷醇、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查耳酮、紫檀烷、花色素和酚酸类共22种活性成分含量的方法;根据22种目标成分的含量,用主成分分析对不同产地的鸡血藤药材进行综合评价。方法采用XBridge C18柱(4.6 mm×100 mm, 3.5μm),以0.3%甲酸水-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温30℃,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定;根据22种目标成分的含量,用主成分分析(PCA)对所检测的31个批次鸡血藤药材进行综合评价。结果 22种目标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r>0.999 0);平均加样回收率为97.95%~103.1%,RSD均小于5%。结论所建立的方法准确、可靠,可用于鸡血藤中多元功效物质或指标成分的同时测定,为鸡血藤药材内在质量的综合评价和全面控制提供新的方法参考。

超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱法同时测定不同产地竹节参药材中多元成分

目的建立超快速液相色谱-三重四级杆/线性离子阱质谱法(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定不同产地竹节参药材中皂苷、氨基酸及核苷类共33种成分含量的方法。方法采用XBridge C_(18)(4. 6 mm×100 mm,3. 5μm),以0. 1%甲酸水-0. 1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0. 8 m L·min^(-1),柱温30℃,多反应监测离子扫描模式(MRM)测定。结果 33种成分在一定浓度内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0. 999 0;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为96. 95%～101. 8%,RSD均小于5%。结论所建立的方法准确、可靠,可为竹节参药材内在质量的综合评价和全面控制提供新的方法参考。