ALBI和PALBI分级在乙肝相关性肝细胞癌病人预后评估中的价值

目的:探讨白蛋白-胆红素(ALBI)和血小板-白蛋白-胆红素(PALBI)分级在Child-Pugh A级肝细胞癌(HCC)病人预后评估中的价值。方法:行根治性手术的Child-Pugh A级乙肝相关性HCC病人134例,根据术前血清学检查结果计算ALBI和PALBI分级,采用Kaplan-Meier曲线和Cox回归分析评估病人总生存期(OS)和无复发生存期(RFS)。结果:经随访,病死37例,复发35例。Kaplan-Meier分析结果显示,ALBI、PALBI分级与OS和RFS均具有相关关系(P<0.05)。多因素分析显示,ALBI和PALBI分级均为病人独立的预后模型。不同评分系统间,PLABI+肿瘤直径、ALBI+肿瘤直径、ALBI+意大利肝癌小组评分(CLIP)较单独的CLIP、PLABI、ALBI、终末期肝癌模型评分、巴塞罗那分期在预后预测能力方面更具有意义。结论:ALBI和PALBI分级是评估Child-Pugh A级HCC病人预后有价值的模型,如结合肿瘤直径,PALBI较ALBI分级有更好的预后价值。

M2型巨噬细胞通过分泌白细胞介素-10调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的:探讨M2型巨噬细胞通过调控白细胞介素-10(IL-10)表达影响胆囊癌(gallbladder cancer,GBC)细胞增殖、迁移、侵袭的研究。方法:将人单核细胞株THP-1在体外诱导成M2型巨噬细胞,利用RTqPCR检测相应标记物和IL-10的表达情况;利用ELISA检测细胞上清液中IL-10的表达情况。将GBC细胞株NOZ和GBC-SD分组为Control组(无血清培养基)、M2-CM组(M2型巨噬细胞条件培养基)、M2-CM+anti-IL-10组(含IL-10中和抗体的M2-CM)和M2-CM+IgG组(含IL-10同型对照抗体的M2-CM)。采用CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭变化状况,再用Western blot实验检测各组细胞的上皮间质转化标志物(E-cadherin和Vimentin)的表达量。结果:M2型巨噬细胞在体外诱导成功;与诱导前的THP-1相比,IL-10在M2型巨噬细胞内和上清液中表达明显升高(P<0.05);M2型巨噬细胞可促进GBC细胞增殖、迁移和侵袭,以及能抑制E-cadherin表达和促进Vimentin表达,阻断IL-10可抑制M2型巨噬细胞的这一影响(P<0.05)。结论:M2型巨噬细胞可通过分泌IL-10促进GBC细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化。

沉默PRKCD通过调控上皮-间质转化抑制肝癌Huh-7细胞的增殖和侵袭

目的探讨蛋白激酶Cδ(protein kinase Cδ,PRKCD)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平、临床意义及其潜在的作用机制。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中下载HCC的表达数据和临床数据,分析PRKCD在HCC中的表达水平及其临床意义。收集25例HCC患者的肿瘤组织及癌旁组织,采用免疫组化染色检测患者样本中的PRKCD蛋白表达水平。采用Western Blot及qRT-PCR法检测PRKCD在正常肝上皮细胞和肝癌细胞系中的表达水平。通过构建si-PRKCD慢病毒转染到Huh-7肝癌细胞中,采用CCK-8实验评估沉默PRKCD对肝癌细胞增殖活性的影响。采用划痕实验、Transwell侵袭实验明确PRKCD对细胞迁移和侵袭的影响。最后,通过Western Blot法检测PRKCD对上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)关键蛋白(Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Slug)的内在调控作用。结果TCGA数据库分析及免疫组化染色结果显示,肝癌组织中PRKCD的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析显示PRKCD低表达患者的总生存率(overall survival,OS)、无病间隔期(disease-free interval,DFI)、无病生存期(disease-free survival,DFS)显著高于PRKCD高表达患者。与正常肝上皮细胞LO2相比,PRKCD在肝癌细胞Huh-7中的蛋白表达水平最高(P<0.05)。与对照组比较,沉默PRKCD后,PRKCD蛋白表达量显著减少(P<0.05)。肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05)。此外,沉默PRKCD后,Vimentin、N-cadherin、Slug蛋白表达降低,而E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论PRKCD是肝癌的潜在不良预后标志物,沉默PRKCD的表达能够抑制Huh-7肝癌细胞的增殖和侵袭,其机制可能与上皮-间质转化过程有关。

基于胜任力的评价系统在普外科住院医师规范化培训中的应用

目的:评价基于岗位胜任力的评价系统在普外科住院医师规范化培训中的应用效果。方法:以岗位胜任力为基准设计和制定评价系统(包含4个一级指标和20个二级指标),于2020年应用于蚌埠医学院第一附属医院普外科医师规范化培训的考核中,221名被培训者包括专业型硕士研究生124名(A组)和统招规范化培训医师97名(B组),2组按培训时间分为A1和B1(培训时间为1年)、A2和B2(培训时间为2年及以上);于培训结束后调查被培训者对评价系统的满意度。结果:培训者对评价系统总体满意度为97.94%;A组和B组被培训者在一级指标医德医风、临床实践能力、临床综合能力、出科考核与考勤及总成绩的得分上差异无统计学意义(P>0.05);A2和B2有6个二级指标(医患关系、病史质量、临床基本操作、跟台手术、处理复杂病人能力、临床思维能力)得分均高于A1和B1,差异有统计学意义(P<0.05~P<0.01);专业型硕士研究生A2在体格检查得分低于A1,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:基于岗位胜任力的评价系统在普外科医师规范化培训考核中具有良好导向作用,对不同年资的学生培训具有一定的指导价值。

提高二袖套法大鼠原位肝移植成功率的手术技巧

目的 探讨二袖套法大鼠原位肝移植的手术技巧。方法 在Kamada“二袖套法”基础上进行改良。获取供肝前阻断肝门血供 10min ,再灌注 10min ;分别经腹主动脉和门静脉对肝脏进行双重灌注 ;门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合 ,肝上下腔静脉用缝合法吻合 ,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果 共施行大鼠原位肝移植 12 0次 ,手术成功率为 90 .8%。平均无肝期为 ( 2 1.0± 3.5 )min ,受体总手术时间为 ( 4 6 .0± 4 .5 )min ,1周生存率为 87.2 %。结论 良好的手术野暴露 ,娴熟的显微外科技术 。

整合PD-L1单链抗体的融合蛋白制备及其抗肿瘤活性的验证

目的:利用酵母表面递呈技术,分泌表达抗PD-L1单链抗体(sc Fv),纯化后得到能特异性结合PD-L1抗原的小分子抗体片段(sc Fv)。根据单链抗体基因序列,合成sc Fv抗体基因序列。选用sc Fv-mFc融合蛋白的方式,并采用p Fuse真核表达载体来表达此sc Fv-mFc融合蛋白,研究其对肺腺癌细胞(A549)的亲和力和体内外抑制作用。方法:采用基因工程的方法构建重组质粒p Fuse-scFv,通过真核转染至293F(人胚肾细胞),使用无血清Pro 293a-CDM培养72 h,收集培养液中分泌的融合蛋白,运用免疫组化检测sc Fv-mFc融合蛋白与肿瘤细胞的结合;流式细胞术分析融合蛋白和肿瘤细胞的亲和力; ADCC(抗体介导的细胞毒实验)测定融合蛋白对肿瘤细胞体外杀伤作用;利用接种肺腺癌细胞的荷瘤小鼠对融合蛋白的体内抗肿瘤效应进行研究。结果:通过重组质粒转染至293F细胞的方法,sc Fv-mFc融合蛋白被分泌到无血清的培养液中;免疫组化和流式结果显示,融合蛋白与表面高表达PD-L1蛋白的肿瘤细胞有较强的结合能力; ADCC实验结果示融合蛋白在体外对肿瘤细胞的杀伤作用;荷瘤小鼠实验结果示融合蛋白对肿瘤的生长起到抑制作用,在5 mg/kg的药物剂量下,荷瘤小鼠瘤体体积平均增长率从14. 90%降低至3. 72%,两独立样本t检验P<0. 05,差异具有统计学意义。结论:成功制备了含单链抗体的融合蛋白,其对A549细胞具有良好的结合能力,在体内外均对肿瘤细胞的增殖产生抑制作用,为研制靶向抗肿瘤药物提供实验室基础依据。

刮吸手术解剖法在复杂胆道手术中的应用体会

目的总结在胆道手术中运用刮吸解剖法的手术治疗经验。方法 2007年1月至2011年12月,我科应用刮吸解剖法施行急诊胆囊切除术72例,肝十二指肠骨骼化清扫手术110例。结果 182例手术均获成功,无胆管损伤、胆漏、术后出血等并发症。肝十二指肠韧带骨骼化清扫手术中未出现胆管及血管的严重损失。结论应用刮吸解剖法施行胆道手术能缩短手术时间,操作更加精细,可减少术中出血,增加手术安全性。此法有助于肝门结构显露,增强了肝十二指肠韧带骨骼化程度,提高了根治性切除率。刮吸解剖法是一种实用、简便且安全的手术操作方法。。

肠道通透性改变与急性胰腺炎早期手术探查

目的 通过观察急性胰腺炎 (AP )患者早期肠道黏膜通透性的改变 ,以探讨AP早期手术探查的指征。方法 测定和对比 18例非手术治疗 (轻型AP)和 7例手术治疗胰腺炎 (重型AP )患者不同时间血清二胺氧化酶、内毒素及尿乳果糖 /甘露醇的变化。结果 手术组患者血清二胺氧化酶、内毒素及尿乳果糖 /甘露醇显著高于非手术组 ,且随病程发展其血清内毒素水平不断升高。结论 肠黏膜通透性持续升高及内毒素血症不断加重可作为急性胰腺炎病情加重及手术探查的指征。

RKIP在胆囊癌中的表达及临床意义

目的:探讨胆囊癌中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的表达状况及其与胆囊癌临床病理指标和预后的可能关系.方法:2006-01/2009-06苏州大学附属第二医院胆囊癌患者50例,外科手术切除术后病理证实的存档组织蜡块.所有病例术前未进行放化疗,有完整的临床病理资料.采用免疫组织化学ElivisionPlus法,对50例原发性胆囊癌与38例慢性胆囊炎组织中RKIP表达进行检测.结果:在胆囊癌组织中表达的阳性率明显高于慢性胆囊炎组织,差异有统计学意义(74.0%vs0.8%,P<0.01).RKIP表达水平与胆囊癌患者年龄、性别、组织学类型及是否伴有结石等因素均无明显关系(P>0.05),但RKIP高表达与胆囊癌的低分级(31.8%vs92.3%,P<0.05)、淋巴结或远处转移(75.0%vs100.0%,P<0.05)以及术后生存时间减少(50.0%vs93.8%,P<0.05)有明显关系.结论:RKIP在胆囊癌中高表达可能提示其在胆囊癌的发生、发展中起重要作用.

3种胰肠吻合方式与胰漏发生关系临床分析

目的:探讨胰十二指肠切除术胰肠吻合方式与胰漏发生的关系,以寻找预防胰漏的有效术式。方法:胰十二指肠切除术胰肠吻合手术114例,其中行胰腺空肠端端套入捆绑式吻合48例,胰腺空肠端侧双层套入式吻合37例,胰腺空肠端端袖套式吻合29例。结果:术后出现胰漏20例(17.5%),其中胰腺空肠端端套入捆绑式吻合8例,胰腺空肠端侧吻合5例,胰腺空肠端端袖套式吻合7例。3种胰肠吻合方式的胰漏发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3种胰肠吻合方式无优劣之分。熟练的手术操作技术能使胰漏的发生率显著下降。

系统免疫炎症指数对Child-Pugh B级肝细胞癌术后预后预测价值

目的:探讨系统免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)对Child-Pugh B级肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者术后预后预测价值。方法:回顾性分析2010年9月至2015年9月我院收治的165例经病理组织学确诊的Child-Pugh B级HCC患者的临床资料。根据受试者工作特征(ROC)曲线得出SII的最佳截断值,将患者分为低SII组(SII<300.09)(n=85)和高SII组(SII≥300.09)(n=80)。生存分析采用Kaplan-Meier法,差异性检验采用Log-rank法,单因素及多因素回归分析采用Cox比例风险模型。结果:根据ROC曲线确定SII的最佳截断值为300.09。年龄、肿瘤直径、肝硬化与术前SII相关(P<0.05)。单因素分析得出,肿瘤大小(>5 cm/≤5 cm)、肝硬化(是/否)、SII(高/低)与HCC患者术后总体生存期相关,甲胎蛋白(>400 ng/ml/≤400 ng/ml)、肿瘤大小(>5 cm/≤5 cm)、SII(高SII/低SII)与HCC患者术后无复发生存期相关。多因素COX回归分析进一步表明:肿瘤大小(P<0.01)、肝硬化(P=0.001)、SII(P=0.047)与HCC患者的总体生存期密切相关;甲胎蛋白(P=0.009)、肿瘤大小(P<0.01)、SII(P=0.032)与HCC患者的无复发生存期密切相关。将多因素分析的结果整合建立预测模型得出预测HCC患者术后5年死亡率、复发率模型可靠性C-指数分别为0.781(95%CI:0.713~0.849)、0.717(95%CI:0.641~0.794)。结论:SII是影响Child-Pugh B级HCC患者术后预后的独立危险因素,SII越高提示HCC患者术后预后越差。

胆囊癌组织的蛋白质组研究

目的:通过分离并鉴定胆囊癌和胆囊良性组织的差异表达蛋白质,以发现可能用于早期诊断的胆囊癌肿瘤标志物。方法:提取人胆囊癌和胆囊良性组织的总蛋白质,用双向电泳分离蛋白并进行比较。选择在胆囊癌组织中明显差异表达的蛋白点,行质谱分析。结果:获得了分辨率和重复性均很好的凝胶蛋白图谱。对筛选出的在胆囊癌组织中明显差异表达的46个蛋白点,共有17个蛋白点被成功鉴定,其中在胆囊癌组织中高表达的为9个,低表达的为8个。结论:胆囊癌组织相对于胆囊良性组织蛋白存在明显的差异,通过蛋白质组学方法筛选并鉴定出的这些蛋白质可能成为用于胆囊癌早期诊断和治疗的分子靶点。

肝移植对肝硬变大鼠脾脏功能的影响

目的探讨肝移植对肝硬变大鼠脾脏功能的影响。方法制备四氯化碳中毒性肝硬变大鼠模型,采用“二袖套”法进行肝移植。观察肝移植前、后大鼠脾指数及脾脏组织形态学的变化;应用免疫荧光染色技术及流式细胞仪检测肝移植前、后大鼠脾脏T淋巴细胞亚群的变化。结果肝移植前,肝硬变大鼠脾指数增高,从(2.42±0.11)mg/g增至(3.62±0.14)mg/g,P<0.01;脾脏白髓面积缩小,从(23.47±2.30)%缩至(7.70±2.01)%,P<0.01;脾小梁面积扩大,从(1.75±0.61)%增加至(4.46±0.71)%,P<0.01;脾脏T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值明显下降,从2.67±0.15降至1.18±0.15,P<0.01。肝移植后,随着时间的延长,大鼠脾脏白髓面积有所扩大,从(7.70±2.01)%增至(15.07±1.97)%,P<0.01;脾小梁面积有所缩小,从(4.46±0.71)%降至(3.11±0.51)%,P<0.05;脾指数逐渐降低,从(3.62±0.14)mg/g降至(2.62±0.11)mg/g,P<0.01;脾脏T淋巴细胞亚群中CD4/CD8比值也有所升高,从1.18±0.15升至2.32±0.11,P<0.01。结论肝硬变大鼠行肝移植后,因肝功能严重损害而导致的脾脏功能异常可得到改善。

二袖套法大鼠原位肝移植的手术技巧及并发症的预防

目的 :探讨二袖套法大鼠原位肝移植的手术技巧及并发症的预防。方法 :在Kamada“二袖套法”基础上进行改良。获取供肝前阻断肝门血供 10min ,再灌注 10min ;分别经腹主动脉和门静脉对肝脏进行双重灌洗 ;门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合 ,肝上下腔静脉用缝合法吻合 ,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合法。结果 :共施行大鼠原位肝移植 12 0次 ,手术成功率为 90 .8%。平均无肝期为 (2 1± 3.5 )min ,受体总手术时间为 (4 6± 4 .5 )min ,一周生存率为 87.2 %。结论 :良好的手术野暴露。

肝移植对肝硬化大鼠脾功能及脾组织形态学的影响

目的探讨肝移植对肝硬化大鼠脾功能及脾组织形态学的影响。方法制备四氯化碳中毒性肝硬化大鼠模型,采用“二袖套法”进行肝移植。观测肝移植前后大鼠门静脉压力(portal veinpressure,PVP)以及脾脏组织形态学的变化;检测肝移植前后大鼠血清中促吞噬肽(tuftsin)含量的变化。结果肝移植前,肝硬化大鼠PVP从6.2 8mmHg(1mmHg=0.1 3 3 kPa)升至1 4.0 3mmHg(P<0.01);脾脏病理切片示白髓面积从2 3.4 7%缩小至7.7 0%(P<0.0 1);脾小梁面积从1.7 5%扩大至4.4 6%(P<0.01)。血清tuftsin含量自4 6 6.7 ng/mL减少至3 2 1.8 ng/mL(P<0.0 1)。肝移植后,随着时间的延长,PVP从1 4.0 3mmHg明显降至6.3 3mmHg(P<0.0 1)。脾脏病理切片示白髓面积从7.7 0%扩大至1 5.0 7%(P<0.0 1);脾小梁面积从4.4 6%缩小至3.1 1%(P<0.0 5)。血清tuftsin含量从3 2 1.8 ng/mL升至4 3 2.5 ng/mL(P<0.0 1)。结论肝硬化大鼠肝移植后门静脉高压症可明显缓解,异常的脾功能逐渐得到改善。

射频消融与手术切除治疗小肝癌的效果观察

目的:比较手术切除与射频消融(RFA)治疗小肝癌(≤5 cm)的临床疗效。方法:对116例手术切除和100例RFA治疗的小肝癌患者的临床随访资料进行分析。结果:2组随访1～72个月,平均34.36个月。手术切除组与RFA组的1、3、5年无瘤生存率分别为85.4%、40.9%、29.2%与82.6%、27.7%、16.4%,平均无瘤生存时间32.78个月与29.39个月(P=0.51);总累积生存率分别为96.0%、73.2%、63.1%与98.3%、67.1%、51.0%,平均总累积生存时间46.91个月与46.68个月(P=0.67)。肿瘤长径≤3 cm的手术切除组与RFA组患者1、3、5年无瘤生存率分别为85.7%、62.5%、37.5%与85.0%、37.4%、29.9%(P=0.50),累积生存率分别为97.1%、70.9%、64.2%与100.0%、69.3%、59.9%(P=0.87)。肿瘤长径3～5 cm的手术切除组与RFA组患者1、3、5年无瘤生存率分别为85.7%、30.6%、30.0%与80.8%、21.8%、10.9%(P=0.58),累积生存率分别为97.1%、74.9%、50.1%与96.9%、64.1%、47.2%(P=0.41)。Cox多因素分析显示,消除各因素可能引起的影响后,手术切除组与RFA组总体无瘤生存期和总体生存期差异均无统计学意义。结论:对直径≤5 cm的小肝癌RFA安全、疗效确切,近远期疗效与手术切除相近,可以考虑作为小肝癌的首选治疗手段之一。

肝门胆管癌103例诊治分析

目的:探讨不同方法治疗肝门胆管癌的预后及其影响因素。方法:103例肝门胆管癌患者中行根治性切除28例,姑息性切除12例,经皮经肝胆管引流术(PTCD)+经皮胆道支架植入术34例,仅行PTCD术29例。结果:4种手术患者中位生存期分别为(26.00±1.51)个月、(16.00±1.49)个月、(12.00±1.83)个月和(5.00±1.49)个月,差异有统计学意义(P<0.01);Bismuth分型、有无淋巴结转移及是否术中化疗均影响患者预后。结论:根治性手术切除是肝门胆管癌的最佳治疗方法。Bismuth分型、有无淋巴结转移及是否术中化疗是影响预后的重要因素。

RFA联合TACE治疗中晚期肝癌的疗效观察

目的观察射频消融术(RFA)联合导管动脉栓塞化疗(TACE)治疗晚期肝癌的临床效果。方法回顾性分析2005年6月～2011年6月蚌埠医学院第一附属医院肝胆外科92例接受TACE及RFA治疗的中晚期原发性肝癌患者,其中88例具有完整的临床治疗过程及随访资料,共43例接受TACE治疗(TACE组),45例接受TACE联合RFA治疗(TACE.RFA组),两组患者的一般临床资料及肿瘤情况差异无统计学意义,比较其生存状况并予以分层分析。结果手术前后螺旋CT摄片或彩超比较显示消融效果良好,两组治疗后肿瘤坏死总有效率(CR+PR)分别为67.4%(29/43)、91.1%(41/45),两组间差异有统计学意义(P<0.05)。接受RFA的患者与对照组相比其生存质量及生存时间均有显著提高。结论对于难以手术切除的原发性肝癌患者,RAF联合TACE的治疗效果明显优于单纯TACE。

基于思维导图的新型线上教学模式在临床医学专业本科生中的教学效果分析

目的:探讨基于思维导图的新型线上教学模式对临床医学专业本科生的教学效果。方法:选取接受临床医学课程理论教学的临床医学专业2个班级学生147人为研究对象,其中临床医学班91名学生设为普通教学班,临床医学实验班56名学生设为实验教学班。教学实施后对2个班级进行问卷调查,包括对目前教学模式的认知感受、新型教学方法和理念接受情况以及对教学模式的效果评价。结果:与传统教学班比较,实验教学班对现今教学模式满意度更低(P<0.05),更希望互动结合讲解的教学方式(P<0.05),对于“学习金字塔”和学习小组或学习社区的知晓率更高(P<0.01)。2个班级的学生对于提高学习效率的新型工具均有相对较高知晓率,对于教学效果中有关专业知识的掌握、临床技能提升、协作意识锻炼、逻辑思维拔高等均有较高期待,但班级间差异均无统计学意义(P>0.05)。实验教学班学生的课堂思考积极性、专注度、掌握度均优于传统教学班(P<0.05),认为教学对临床实践有帮助比例明显高于传统教学班(P<0.01),尝试思维导图构建知识体系意向比例高于传统教学班(P<0.05)。结论:基于思维导图的新型线上教学模式有助于提升学生的课堂积极性和教学效果,值得进一步完善和推广。