重组聚半乳糖醛酸酶PGB的生化特征及其酶解产物活性分析

解析重组聚半乳糖醛酸酶PGB的酶学性质,研究PGB制备的果胶水解物的基本成分和生物学活性。通过摇瓶发酵制备聚半乳糖醛酸酶酶液,研究其基本酶学性质。再在最优作用条件下对果胶进行水解,并考察水解产物的组成、抗菌活性和抗氧化活性。在摇瓶发酵水平,黑曲霉聚半乳糖醛酸酶PGB的酶活达到10790 U/m L;该酶的最适作用温度和p H分别为55℃和5.0;在40℃或p H4.0~6.0条件下具有较好稳定性。Mg^(2+)和Cu^(2+)对其活性有促进作用,K^+、Ca^(2+)、Zn^(2+)、Mn^(2+)、Co^(2+)、Fe^(3+)和Fe^(2+)等对其活性均有不同程度的抑制作用;它对低酯果胶的K_m和V_(max)分别是0.756 mg/m L和9.225 mg/(m L·min)。高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)的分析表明,PGB对果胶的酶解产物是半乳糖醛酸单体和聚合度2~4为主的寡聚半乳糖醛酸,它对金黄色葡萄球菌的生长有显著抑制作用,其最小抑菌浓度和抗氧化活性分别为0.64 mg/m L和6.125 U/m L。