新型磷酸二酯酶5抑制剂CPD1对四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠治疗作用

目的探讨新型磷酸二酯酶5抑制剂CPD1对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl 4)诱导的肝纤维化小鼠肝组织结构损伤和肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化的影响。方法SPF级雄性C57BL/6 J小鼠随机分为正常对照组、模型组、CPD1治疗组、他达拉非治疗组,模型组和治疗组小鼠腹腔注射CCl 4(每周2次)。造模4周后治疗组分别给予CPD1(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))、他达拉非(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃治疗,持续4周。模型到期后,通过组织病理学染色、免疫荧光技术观察CPD1治疗对肝纤维化小鼠肝形态、组织结构损伤、胶原沉积及HSCs活化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、人肝星状细胞系LX-2细胞中纤维连接蛋白(fibronectin)表达和分布的影响。结果与正常组相比,模型组小鼠肝组织出现肝细胞坏死,炎症细胞浸润增加,肝小叶结构破坏,汇管区出现胶原沉积,α-SMA表达和分布明显增加;CPD1治疗可明显减轻模型小鼠肝组织损伤程度,减少肝细胞坏死和炎症细胞浸润,减轻胶原纤维的沉积,降低α-SMA的表达及分布,且治疗效果优于他达拉非;同时CPD1明显抑制LX-2细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的fibronectin和PAI-1蛋白的表达。结论磷酸二酯酶5抑制剂CPD1通过抑制HSCs的激活,减少肝组织中胶原纤维蛋白的产生,延缓肝纤维化的进展。

新型磷酸二酯酶5抑制剂CPD1对单侧肾缺血再灌注损伤后肾间质纤维化的影响

为观察新型磷酸二酯酶5(phosphodiesterase 5,PDE5)抑制剂CPD1对单侧肾脏缺血再灌注损伤(unilateral renal ischemiareperfusion injury,UIRI)后肾间质纤维化的影响,本文采用夹闭(35 min)BALB/c小鼠肾蒂建立UIRI动物模型,造模2 h后每天给予CPD1(5 mg/kg)灌胃治疗,术后第10天切除对侧肾脏,第11天取患侧肾脏。通过HE、Masson三色和天狼星红染色观察肾组织结构损伤和胶原沉积情况,利用免疫组织化学染色、蛋白质印迹技术分析肾脏组织、大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)、人肾小管上皮细胞(HK-2)中纤维化标志蛋白的表达。结果显示:与假手术组相比,UIRI小鼠肾脏中出现明显的肾小管上皮细胞损伤和间质纤维化,I型胶原(collagen I)、纤维连接蛋白(fibronectin)、纤溶酶原激活物抑制剂1型(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达显著增加;CPD1治疗可明显减轻肾小管损伤和间质纤维化程度,抑制UIRI小鼠肾脏中纤维化标志性蛋白fibronectin、collagen I、PAI-1及α-SMA的表达;同时,在NRK-49F细胞和HK-2细胞中,CPD1呈剂量依赖性抑制转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的fibronectin和PAI-1蛋白的表达。以上结果提示,新型PDE5抑制剂CPD1通过抑制TGF-β信号通路,调节PAI-1介导的细胞外基质合成和降解平衡,减轻缺血再灌注引起的肾组织结构损伤和间质纤维化。