木犀草素调控视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的机制研究

目的:探究木犀草素调控视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的机制。方法:正常培养视网膜母细胞瘤细胞Y79、SO-RB50,以不同浓度木犀草素处理细胞24 h,采用CCK8法检测细胞活力,选取后续给药剂量,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,免疫荧光检测细胞中波形蛋白(Vimentin)表达,显微镜下观察干细胞成球能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞标志物(SOX2、OCT4、CD44)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)、p-AKT、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及p-mTOR表达,构建裸鼠异位肿瘤模型,观察木犀草素对肿瘤生长的影响。结果:与空白组比较,木犀草素干预后Y79、SO-RB50细胞活力明显降低,裸鼠瘤体的生长受到明显抑制(P<0.05),细胞侵袭能力下降,VEGF、Vimentin表达降低(P<0.05),干细胞克隆成球率和成球直径降低,SOX2、OCT4、CD44蛋白表达降低(P<0.05),且细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR水平也降低(P<0.05)。结论:木犀草素可抑制视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性,可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

宁波电动自行车越南市场推广方案

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芬太尼调控LINC00184抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭

目的:研究芬太尼对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和侵袭等生物学行为的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,采用CCK-8实验、克隆形成实验检测芬太尼对SKOV3细胞体外增殖的影响;分别采用流式细胞术和Transwell实验检测芬太尼对SKOV3细胞凋亡和侵袭能力的影响;Western blot检测细胞增殖、凋亡及侵袭相关蛋白表达。qRT-PCR检测LINC00184在卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮细胞株的表达;构建LINC00184过表达质粒并转染SKOV3细胞,观察上调LINC00184表达对芬太尼处理的SKOV3细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。结果:芬太尼在体外呈时间和浓度依赖性抑制SKOV3细胞存活,而不明显影响正常卵巢上皮细胞HOSE的存活率。相比对照组,使用5 ng/mL和10 ng/mL芬太尼处理SKOV3细胞,显著下调LINC00184表达水平,降低体外克隆形成率,抑制Ki67、PCNA蛋白表达(均P<0.01);显著增加SKOV3细胞凋亡率,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达(均P<0.01);显著降低侵袭细胞数,上调E-cadherin蛋白表达,下调N-cadherin、MMP9蛋白表达(均P<0.01)。而使用LINC00184过表达质粒上调LINC00184表达则明显削弱芬太尼对SKOV3细胞的上述作用(P<0.01)。结论:LINC00184在卵巢癌细胞表达上调,并与卵巢癌细胞的增殖、凋亡和侵袭等生物学特性相关;芬太尼通过下调LINC00184表达抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭,并诱导其凋亡。