慢病毒介导碱性成纤维细胞生长因子在大鼠羊膜上皮细胞中的表达和分泌

目的探讨以慢病毒作为载体,将带有分泌肽的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因片段转入大鼠羊膜上皮细胞(AECs)中,构建能稳定表达并分泌bFGF多肽的细胞载体。方法取妊娠晚期SD大鼠的羊膜组织进行AECs原代培养,用免疫荧光细胞化学和RT-PCR法鉴定;构建包含人神经生长因子(NGF)分泌肽-bFGF编码基因的慢病毒载体,并行慢病毒包装,用病毒上清对传代大鼠AECs进行感染并筛选,经免疫荧光细胞化学、RT-PCR及酶联免疫吸附法(ELISA)检测基因转染效果,体外培养观察基因转染后的细胞生长活性;用基因转染细胞的培养上清对PC12细胞进行培养,检测所分泌bFGF多肽的生物学活性。结果所培养的大鼠AECs经鉴定能表达上皮特异性标志物CK-19、神经类细胞标志物巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及细胞多能性标志分子SSEA-4、Oct-4、Nanog、Sox2、波形蛋白(vimentin)等;经感染并筛选后扩增培养的大鼠AECs在mRNA水平及多肽水平均能检测到目的基因bFGF的表达,筛选后的转染细胞生长活性较未转染细胞明显提高,其培养上清能明显促进PC12细胞的生长和分化。结论用慢病毒作为载体能成功将bFGF基因转染入大鼠AECs中,所建立的基因修饰AECs能表达并分泌bFGF多肽,具有较强的生长活性及神经营养活性。

哺乳动物神经细胞的去分化及诱导

去分化是近年来细胞生物学,特别是新兴的干细胞生物学领域一个倍受关注的课题。大量实验证明,哺乳动物神经系统中各类神经细胞(如神经元、Schwann细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞等)在适当条件下均可发生不同程度的以细胞幼稚化、重新进入细胞周期和获得多向分化的潜能为主要特征的去分化表现。本文就哺乳动物各类神经细胞的去分化及其诱导条件、对神经再生修复等的作用作一综述。

脊髓损伤早期手术及康复训练的疗效分析

目的介绍脊髓损伤早期脊髓探查和脊髓软化切开手术的术式和术后步行训练方法并分析其疗效。方法对40例完全性脊髓损伤30 d内的患者行脊柱脊髓损伤早期联合手术方式:一次性完成椎体内固定、松解硬脊膜下粘连、脊髓内外彻底清创减压,从而减轻脊髓二次损伤,保护神经细胞和残存神经纤维;术后辅以个体化脊柱固定减负背心,开展伤后早期康复训练;术后进行6个月的定期脊髓功能评价。结果术中术后未发生手术部位大出血、感染、残损加重等并发症。术后6个月,美国脊柱损伤协会(ASIA)残损分级A级17例、B级5例、C级11例、D级7例。ASIA评分:平均运动提高16.7分、针刺觉提高10.32分、轻触觉提高11.52分。结论在脊髓损伤早期行脊髓探查和脊髓软化切开手术是安全有效的,可恢复部分患者的部分脊髓功能。

经伤椎椎弓根置钉治疗胸腰椎骨折疗效分析

经伤椎置钉是治疗胸腰椎骨折的一种方法。理论上能够增加固定器的强度,为骨折的愈合提供更为稳定的固定系统同时有助于骨折复位和后凸畸形的矫正[1,2]。在临床实践中也初步发挥出一定的优势。但是有关伤椎置钉的理论研究尚不完善,临床报告病例较少[3]。

胸腰椎骨折合并脊髓损伤手术时机及早期治疗策略

目的：探讨经伤椎椎弓根置钉治疗胸腰椎骨折及合并脊髓损伤（ spinal cord injury ，SCI）早期髓内外减压的手术疗效及安全性。方法1562例胸腰椎骨折患者共计伤椎1316个，对伤椎椎弓根正常者及相邻的上下椎体经椎弓根置钉内固定，手术共完成伤椎置钉2632枚，完全性脊髓损伤（ ASIA评分A级）患者（287例）进行髓内外减压，于术后2周、6个月、12个月复查，观察术后伤椎高度、水平移位、矢状面Cobb角、椎管容积术后增加、伤椎体愈合情况，神经功能恢复、内固定断钉、断棒、镙钉松动等失败率指标。结果全部患者均进行随访。伤椎高度恢复至正常的93．6％，矢状面Cobb角术后恢复至3．1°；术后12月出现断钉4例，断棒5例，无螺钉松动及拔出。术前287例完全性脊髓损伤（ ASIA评分 A级）患者术后12个月A－SIA评分分别为A级113例、B级74例、C级68例、D级26例、E级6例；术前287例ASIA A级患者昆明步行分级（ Kun－ming Locomotor Scale ，KLS）Ⅰ级患者于术后12个月KLS分别为Ⅱ级6例、Ⅲ级11例、Ⅳ级62例、Ⅴ级67例、Ⅵ级84例、Ⅶ级37例、Ⅷ级9例、Ⅸ级5例、Ⅹ级6例；术前不完全性脊髓损伤1225例患者手术后脊髓神经功能均有1～2级的恢复，无神经损伤加重、死亡等并发症。结论经伤椎椎弓根置钉治疗胸腰椎骨折能达到即刻复位，提高了复位质量，改善固定强度及应力分布，大大减少术后断钉、断棒、螺钉松动、拔出、后突畸形的发生概率，对脊髓损伤早期行髓内外减压，提高了手术疗效，是治疗胸腰椎骨折并脊髓损伤安全、有效的方法。

单纯后路手术治疗胸腰椎结核临床疗效分析

目的探讨单纯后路手术进行椎弓根螺钉内固定、病灶清除、植骨融合术治疗胸腰椎结核的方法和临床疗效。方法回顾分析近6年来收治的56例胸腰椎结核患者的临床资料。采用全麻,俯卧位,以病变椎体棘突为中心纵向切开,暴露棘突、椎板、椎间关节和横突,在上下相邻正常椎体植入椎弓根螺钉,常规对病椎植入短的椎弓根螺钉,从病变严重一侧或病变双侧咬除一侧或双侧椎板,清除硬脊膜外干酪样坏死组织,经椎间隙清除破坏的椎间盘、椎体内游离死骨,吸净椎管内及椎旁脓液,用链霉素2 g加生理盐水1000 m L作术野反复冲洗,再在病灶内放置链霉素粉剂2 g,装上预弯好的连接棒撑开、固定螺帽以矫正脊柱后凸畸形及恢复椎间隙高度,取咬除的棘突、椎板骨粒或同种异体骨或人工骨置于椎体骨缺损处及横突旁,放置多侧孔引流管,逐层严密缝合切口。术后正规抗结核治疗12~16月。结果采用单纯后路椎弓根螺钉固定、病灶清除、局部使用链霉素、植骨融合及术后正规抗结核治疗胸腰椎结核患者56例,术中术后均无并发症。平均手术时间为(2.5±0.5)h,术中平均出血量为(350±55)m L,术后3~10 w血沉均恢复正常,术后随访18个月,脊柱内固定无松动、断裂、拔出等,植骨处均已骨性融合。术前脊髓神经功能按美国脊柱损伤学会评分(American Spinal Injury Association,ASIA):A级3例,B级5例,C级8例,D级13例,术后均恢复到ASIA E级。结核椎体矢状面Cobb角的变化由术前(26.5±5.3)°降低为术后(3.5±2.8)°。结论单纯采用后路手术治疗胸腰椎结核与采用经典的前后路联合手术治疗相比,具有手术简单、手术时间短、术中出血少、并发症少及脊柱后凸畸矫正良好、神经功能恢复好等特点,值得推广应用。

经后路摘除后外侧型颈椎间盘突出的疗效与安全性评价

目的探讨后外侧型颈椎间盘突出采取后路手术切除髓核、并行颈椎侧块螺钉固定术的指征、疗效与安全性。方法自2006年10月至2012年12月我们收治了35例颈椎间盘外侧型突出、经颈后路手术切除椎间盘并行颈椎侧块螺钉内固定术进行回顾性研究。术后全组病例平均随访期为12个月,评价两项指标包括神经功能障碍和疼痛的改善状况。结果本组病例均采用日本骨科协会治疗评价分数(Japanese Orthopaedic Association Scores,JOAS),并比较手术前、后神经功能的变化情况。JOAS在术后为(14.35±1.65)分,与术前(6.82±2.36)分比较,经统计学分析有显著相差性(P<0.001)。术后神经功能平均改善率为87%,28例疼痛完全消失,7例明显好转。肌力及腱反射29例显著改善,6例有改善,无1例发生并发症。结论后外侧颈椎间盘突出行后入路髓核摘除术,是一种安全、有效的技术方法,对病损节段颈椎行侧块螺钉固定术,具有保护脊柱功能、重建其稳定性并防止术后椎间盘突出复发的良好作用。

中国神经脊柱外科医师培训的点与面

目的探讨中国神经脊柱外科医师培训的方法与经验。方法通过加强对国内几个重点神经脊柱外科中心建设与发展,在中国神经科学技术有限公司的鼎力支持下,于2013年11月成立了中国神经脊柱学会及讲师团,以点带面,先后在全国范围内举办神经脊柱初级学习班、中级学习班、高级学习班、手术观摩班及临床进修班等,推动了国内神经脊柱外科的快速发展。结果近4年来,中国神经脊柱外科的发展取得了可喜的成就,无论从开展神经脊柱外科的科室数量、手术量、病种数及手术疗效均得到了提高。结论中国神经脊柱外科刚刚起步,各地区间差异较大,与欧美神经脊柱外科及国内骨科脊柱外科的发展差距较大,而中国神经脊柱外科医师培训的以点带面的培训方式效果明显,值得推广。

毛囊神经干细胞促进受损大鼠视神经大胶质细胞去分化

目的培养毛囊神经干细胞,研究其对受损视神经大胶质细胞去分化的影响。方法取约90g雄性SD大鼠触须垫毛囊隆突区贴块,无血清培养或经15%胎牛血清诱导培养毛囊隆突区细胞,用免疫荧光细胞化学和PCR鉴定;以含增强型绿色荧光蛋白的腺相关病毒（rAAV2-EGFP）稳定转染该细胞。成年雄性SD大鼠54只,分为正常对照组、损伤组、移植组,移植组为视神经损伤后移植上述毛囊神经干细胞。转染细胞移植组术后7d、14d、30d,取视神经荧光显微镜下观察;损伤组和未转染细胞移植组术后7d取术侧视神经行Affymetrix基因芯片及实时荧光定量PCR检测,术后7d、14d取术侧视神经行HE、免疫组织化学检测。结果成功培养出神经前体细胞标记分子阳性的毛囊神经干细胞,诱导后该细胞可表达成熟神经细胞标记分子。毛囊神经干细胞移植到受损视神经30d后,仍能存活和迁移。与损伤组相比,移植组差异表达基因有240条,其中一些与去分化相关,如干细胞、凋亡、增殖、信号转导、转录、分化发育、细胞黏附等相关基因,实时荧光定量PCR与基因芯片结果基本相符。移植组视神经远侧段细胞数较损伤组明显增多,巢蛋白、髓鞘碱性蛋白（MBP）、细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）表达增加,胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达减少,且视神经近侧段神经丝（NF）表达增加。结论毛囊神经干细胞通过调节受损视神经中的一些基因表达,促进了其大胶质细胞去分化并向有利于神经再生方向变化。

应用上颈椎内固定技术治疗Chiari Ⅰ畸形的可行性探讨

目的探讨运用上颈椎内固定技术治疗ChiariⅠ畸形伴脊髓空洞的可行性。方法将2006年12月至2012年12月在我科接受手术治疗并符合入选标准的186例ChiariⅠ畸形伴脊髓空洞患者分为内固定组和非内固定组。所有患者均于术前进行日本骨科协会(JOA)评分及脊髓空洞测量,并于术后1 w、3个月、6个月及12个月进行随访,对其原有症状的改善程度及脊髓空洞的缩小程度进行完备记录。所得数据采用重复测量资料的方差分析对患者的JOA评分、脊髓空洞大小等指标进行分析。结果术后6个月、12个月内固定组JOA评分均高于非内固定组,其差别有统计学意义(P<0.05);术后6个月、12个月内固定组脊髓空洞均小于非内固定组,其差别有统计学意义(P<0.05)。结论运用上颈椎内固定技术治疗ChiariⅠ畸形伴脊髓空洞,能有效重建上颈椎稳定性,对改善患者术后中远期症状、缩小脊髓空洞起到重要作用。手术操作简单安全,并发症少,值得临床进一步推广。

重组人甲状旁腺素(1-34)对角质形成细胞分泌IL-6和IL-8的影响

目的研究人甲状旁腺素(PTH)(1-34)对角质形成细胞分泌IL-6和IL-8的影响,探讨其治疗银屑病的分子机理。方法体外培养人角质形成细胞株(HaCaT),研究中设空白对照组、骨化三醇组、骨化三醇和PTH(1-34)联合组以及1.0×10-7mol/L～1.0×10-10mol/L4个不同剂量的PTH(1-34)给药组。48h后收集上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HaCaT细胞分泌至培养液中IL-6和IL-8的含量。结果在1.0×10-7mol/L～1.010-10mol/L四个梯度浓度PTH(1-34)及联合骨化三醇处理48h后,HaCaT细胞分泌IL-6量和空白对照组、骨化三醇组比较,差异无统计学意义,而IL-8的分泌量明显降低(P<0.05),且1.0×10-7mol/LPTH(1-34)处理组IL-8分泌量明显低于其他各组。结论PTH(1-34)治疗银屑病的作用机制可能部分通过调节IL-8的表达和分泌来实现。

基于Logistic-Nomogram构建创伤性脊髓损伤预后预测模型

目的:基于多因素Logistic回归分析创伤性脊髓损伤(TSCI)预后不良相关因素,构建Nomogram预测模型并进行验证。方法:选取2020年3月至2022年9月中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院收治的250例TSCI患者为研究对象,按照7∶3比例随机分为训练组(n=175)和验证组(n=75)。分别于治疗前及治疗后6个月采用日本骨科学会(JOA)量表评估患者预后,以JOA评分改善率≥60%为预后良好组,改善率<60%为预后不良组。采用单因素和多因素Logistic回归法分析预后不良的影响因素,根据影响因素构建Nomogram预测模型,并验证该模型预测效能及临床效用。结果:椎管侵占率≥50%、损伤严重程度为完全损伤、损伤至治疗时间≥8 h、外周血纤维蛋白原(FIB)水平降低、血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和细胞核因子-κB(NF-κB)水平升高以及外周血中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值(NLR)增高均为预后不良的独立危险因素(P<0.05)。Nomogram预测模型预测预后不良的曲线下面积(AUC)为0.944,且具有正向净收益。结论:椎管侵占率、损伤程度、治疗时间及外周血HMGB1、NF-κB、NLR、FIB水平均为TSCI患者预后不良的危险因素,基于上述因素构建的Nomogram模型对预后不良有较好预测效能,有助于临床筛查高危人群并制定治疗方案。

浅谈改进并行SPH方法在三维粘弹性表面中的应用

一种完全不依赖于网格的光滑粒子动力学(SPH)方法,已广泛应用于粘弹性流体自由面问题的模拟,但将其对推广到三维粘弹性流动问题的求解还鲜见。该文在通过探讨SPH方法应用于三维流动问题研究现状的基础上,分析其在三维问题模拟中的缺点及产生原因,并给出了提高精度、抑制压力震荡和基于MPI并行技术提高计算效率的方案。

从阳论治小儿慢性唇炎初探

慢性唇炎是儿科临床常见病,中医药辨证论治具有一定的优势。笔者在治疗中发现从阳论治对小儿慢性唇炎的辨治有重要意义。本文即从小儿稚阳未长的生理特点出发,论述阳气功能失调与小儿唇炎反复发作的关系。小儿脾常不足,感受外邪或内伤饮食等均易导致阳气功能失调,或脾不升清、津液不达,或湿气不化、湿热相搏,或阳气郁结、化热生火,或脾阳亏甚、痰浊阻滞,均可表现为唇炎症状。若治疗未切中病机则病情迁延不愈。在此基础上,笔者从升阳化湿、升阳散火、温阳益气及通阳祛湿四个治疗方向论治小儿慢性唇炎,升阳化湿重升提脾阳,升阳散火重疏导郁火,温阳益气重补中焦阳气,通阳祛湿重醒脾开浊。此外,临证治疗还应注重分期论治,根据病情分急性发作期、缓解期及间歇期,每期有不同的治疗侧重。最后附验案一则以佐证。

髓内显微减压及侧块固定术治疗下颈椎骨折脱位合并颈髓损伤的疗效

目的探讨颈椎后路髓内减压及侧块螺钉固定术治疗下颈椎骨折脱位合并颈髓损伤的疗效。方法回顾性分析2016年1月至2017年1月颈椎后路髓内减压及侧块螺钉固定术治疗的41例下颈椎骨折脱位合并颈髓损伤的临床资料。采用美国脊髓损伤协会(ASIA)评级评估脊髓功能。结果术后3、14 d,41例ASIA评级较术前无明显改善(P>0.05),术后3个月,41例ASAS评级较术前明显改善(P<0.05)。术后3个月,ASIA评级E、D级比例达53.7%,明显高于术前(31.7%;P<0.05)。术后发生感染3例(再次手术清创1例)、泌尿系感染9例、肺炎19例、压疮1例。无内固定螺钉、钢板移位。结论对于下颈椎骨折脱位合并颈髓损伤,采用颈椎后路髓内减压及侧块螺钉固定术,可以提高脊髓神经功能,对病人远期康复效果显著。

治疗疮疡成方制剂的挖掘与分析

目的:分析治疗疮疡的成方制剂的剂型、功能主治、组方用药规律及核心组合,为临床治疗疮疡的辨证用药及成方制剂的新药研发提供参考。方法:收集《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》(以下简称《中药成方制剂》)《中华人民共和国药典(2015年版)》(以下简称2015年版《中国药典》)中治疗疮疡的成方制剂的名称、处方、剂型、功能与主治,录入Microsoft Excel及中医传承辅助平台(V2.5),统计用药频次;运用Apriori算法及关联规则对处方核心组合进行统计分析(支持度为10%,置信度≥0.8);采用熵聚类算法统计2~3个不同成分间的关联系数(支持度为8,惩罚度为2);根据无监督的熵层次聚类法提取内在核心组合和新方组合。结果:挖掘得出106种成方制剂及其处方,包含药物275味,使用频次较高为冰片、甘草、大黄、乳香等,药物四气五味以苦寒为主,主要归肝、心、胃、脾经,证型多为热毒炽盛证、邪毒炽盛证等,常用核心配伍包括“没药-乳香”“赤芍-大黄”等,挖掘得出新方组合“连翘-防风-赤芍-当归-白芷-木鳖子”“雄黄-牛黄-没药-乳香-血竭-穿山甲-木鳖子”等4首。结论:利用数据挖掘方法分析治疗疮疡的成方制剂组方规律,由核心药物组合成新方,可为临床辨证使用、研发治疗疮疡成方制剂及新药提供依据和参考。

《脊髓损伤神经修复治疗临床指南(中国版)2021》解读

中国神经修复学会根据近年发表的有关脊髓损伤临床治疗证据,对《脊髓损伤神经修复临床治疗指南(中国版)2016》进行修订和更新,并于2021年3月发布《脊髓损伤神经修复治疗临床指南(中国版)2021》[以下简称“中国指南(2021)”],其内容涵盖脊髓损伤伤情评估和诊断、院前急救、治疗原则、康复训练和并发症管理等。本文拟就“中国指南(2021)”中修订和更新的内容进行解读,以为临床医师和研究人员提供治疗标准或参考。

脊髓损伤患者应用综合康复训练配合激励式管理的康复效果

目的探讨脊髓损伤患者应用综合康复训练配合激励式护理的康复效果。方法选取在我院收治的72例脊髓损伤患者作为观察对象,随机分为观察组(n=36)和对照组(n=36),对照组患者实施常规综合康复训练,观察组患者在此基础上联合应用激励式护理干预,持续6个月。比较两组干预前后的负面情绪、自护能力、日常生活能力及生存质量。结果两组患者干预前基线资料、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、自我护理能力测定量表(ESCA)、日常生活活动能力(activities of daily living,ADL)、世界卫生组织生存质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。两组干预后的HAMD、HAMA评分显著低于组内干预前水平,ESCA、ADL及WHOQOL-BREF各维度评分显著高于组内干预前水平,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组干预后的HAMD、HAMA评分显著低于同期对照组,ESCA、ADL及WHOQOL-BREF各维度评分显著高于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论综合康复训练联合激励式护理干预能显著缓解脊髓损伤患者的负面情绪,提高自护能力、日常生活能力及生存质量。

急性脊髓损伤显微髓内减压手术治疗研究

目的探讨急性脊髓损伤后早期行显微髓内减压手术的疗效及手术时机。方法对36例完全性脊髓损伤48 h内的患者在传统手术方法(脊柱内固定、硬膜外减压)的基础上,采用显微神经外科技术对受损脊髓进行髓内减压。结果术中术后未出现大出血、神经症状加重、髓内感染及肺栓塞、死亡等严重并发症。术后3个月,部分患者的美国脊柱损伤协会(American Spinal Injury Association,ASIA)残损分级较术前明显改善:B级6例、C级5例、D级3例。ASIA评分均较术前提高:平均运动提高15.25分、轻触觉提高13.47分、针刺觉提高12.88分。结论显微髓内减压手术作为一种安全的治疗方式,对于急性脊髓损伤患者的神经功能恢复有一定的促进作用。

新时代小学教育专业教师技能需求及训练项目

新时代对小学教育专业教师技能的要求逐步提高,文章从现代小学教师需要的教师技能出发,通过合作研究了解到现代小学教师教育教学最缺乏的技能,在小学教育专业强化师范生交际能力、自身心理调节能力、科研能力等方面设置相应的训练项目及考核标准,希望未来师范院校加强师德教育,增加实践课程,注重科研培养,重视现代教育技术与教学的融合。