分子动力学模拟在医学微生物实验教学中的应用

微生物灭菌是涉及生物安全的重要技术。但在医学微生物实验课程中,学生只能从宏观层面感受灭菌效果,不能观察到微生物在微观层面的变化。文章利用分子动力学模拟技术,选择蛋白质、核酸以及细胞膜作为模拟对象,获得它们在高温下的变化过程,为学生理解热力灭菌原理提供了直观的展示。分子动力学模拟技术的引入为医学微生物教学提供重要的技术手段,是提高教学效果的有益辅助。

抑制新城疫病毒繁殖的九肽及其突变体基因的克隆与原核表达

目的克隆并表达抑制新城疫病毒(NDV)繁殖的九肽(Nonapeptide)及其突变体基因。方法设计并合成Non-apeptide2串联体及其突变体基因,克隆于质粒pUC18,经酶切回收目的基因,与经相同酶切的表达载体pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落,抽提质粒进行鉴定。IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组表达质粒经双酶切、PCR及测序鉴定,证明构建正确。阳性重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约29000处可见一明显条带,与理论值相符。Nonapeptide 2及其突变体蛋白的表达量分别占菌体总蛋白的41%和37%。Western blot结果显示两种蛋白均具有良好的反应原性。结论已成功克隆并表达了抗NDV繁殖的Nonapeptide及其突变体基因。

医学形态学综合性实验教学体会

为提高医学生在基础课程学习阶段的系统性,激发学生的创新精神,培养出“双一流”建设中的各类型人才,在实验教学改革过程中,对医学专业本科生开设“医学形态学综合性实验”课程。通过设置科研进展指导的全新实验内容、每位学生全程操作的实验安排、多途径的教学手段、学生设计创新性实验的考核方式、课后问卷调查的教学效果评价等,对形态学实验教学进行了一系列探索和改革。通过综合性实验新课程的开设,锻炼了学生的科学思维,提高了操作能力,培养了探索精神,取得了良好的教学效果。

牛乳铁蛋白十肽的基因改造、克隆及表达

目的克隆并表达牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因。方法参照大肠杆菌偏爱密码子,分别针对牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因,设计并合成两个具有相同黏性末端的DNA片段,同时在其基因前后分别加上天冬酰胺和甘氨酸的密码子,构成羟胺裂解位点,通过连接获得其二拷贝基因同向串联体。分别将该串联体克隆至载体pUC18上,经双酶切、PCR及测序鉴定后,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物纯化后,用凝血酶切割及羟胺裂解。结果获得了牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2二拷贝基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出相对分子质量约29000的目的蛋白条带,纯化后的蛋白经凝血酶切割后,相对分子质量约29000的目的蛋白条带消失。结论已成功克隆并表达了牛乳铁蛋白十肽及其突变体M1和M2基因,为基因工程抗真菌肽的制备奠定了基础。

创新性人才培养的基础医学实验教学改革

传统的基础医学实验教学在创新性人才的培养中存在不少弊端,因此改革实验教学模式迫在眉睫。基于创新性人才培养目标,优化整合二级学科,重构实验教学体系;打造新医科基础医学本科创新实验共享平台,开展交叉创新训练项目,实现开放共享管理;采用过程性评价和多方评价,完善多元化的评价制度,形成了基础医学“多学科交叉进阶式”实验教学新模式。该模式能够有效提升人才创新实践能力,提高教学质量,促进教学中心的可持续发展。

病理生理学实验“课程思政”的探索与实践

在“健康中国”的战略背景下,全国高校推行“课程思政”改革是时代发展的必然要求,也面临着一些现实挑战。以病理生理学实验教学为例,探讨有效推进病理生理学实验“课程思政”的实施路径,紧抓课程建设“主战场”,课堂教学“主渠道”,教师队伍“主力军”,促进专业教育和思政教育同向同行,培养符合新时代要求的具备综合素质的医学生。

干旱对昆明市烟区烤烟生产的影响及其应对措施

通过对昆明市干旱情况的调查研究,分析了干旱对昆明市烤烟生产所造成的影响,提出建立气象预警机制、建立科学的烤烟抗旱栽培技术、合理灌溉、积极寻找水源和加强农田水利设施建设等趋利避害的措施,以期在干旱气候条件下烤烟种植仍保持优质适产.

抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达

目的构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的蛋白。方法采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定。结果构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的特异性目的条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在。结论已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础。

人颗粒溶素活性片段原核表达载体的构建与鉴定

目的构建人颗粒溶素(GNLY)活性片段原核表达载体。方法采用RT-PCR技术从健康人外周单个核细胞中扩增出颗粒溶素活性片段cDNA,将其与表达载体pGEX-4T-1经限制性核酸内切酶双酶切后连接,转化E.coliBL21,挑取阳性菌落,抽提重组质粒并鉴定。IPTG诱导表达GST融合蛋白,亲和层析纯化,SDS-PAGE分析表达和纯化结果,抑菌圈法鉴定表达产物的活性。结果重组质粒插入基因序列测定证实为颗粒溶素活性片段cDNA。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量29000处出现一明显条带,与理论结果相符。抑菌试验表明,融合蛋白分子凝血酶切产物对革兰阳性的金黄色葡萄球菌ATCC25938有抑制作用。结论已成功构建了人颗粒溶素活性片段原核表达载体,为进一步研究其抗菌、抗肿瘤作用奠定了基础。

一种小鼠光热甩尾测痛仪的研制及其应用

介绍了一种小鼠光热甩尾测痛仪的研制方法及在教学和科研中的应用。该装置由热源主机、调压器和控制器件三部分构成,克服了现有光热测痛仪的一些缺陷,其热源稳定,自动化程度较高,制作简易,操作简单。通过经典的吗啡镇痛实验的验证,该装置检测结果准确,具有较好的实验性和可靠性,用于热刺痛法检测痛觉的实验中,可在大中专院校及科研院所推广使用。

高校实验技术队伍建设对实验教学效果影响调查研究

实验技术队伍建设与队伍素质提升,在高校科学研究和人才培养工作中具有重要作用,同时也是高校教师队伍建设的主要部分。本研究通过一项全国性的针对高校实验技术人员的问卷调查,试图探究各高校加强实验技术队伍建设的相关举措对于实验技术人员自身及其业务的发展所起的作用。通过调查研究,发现学生创新创业项目参与不足、精品课程参与度较低、职称对成果的逆向筛选、培训机会缺乏和分配不均等问题是实验技术队伍中存在的主要问题。因此,研究提出吸引优质青年人才、增加培训投入,打破身份壁垒、加强学生指导,减少制度壁垒、开放实验室资源等举措,以促进实验技术队伍建设的努力进一步转化为学生能力提升和学校科研提升。

医学形态学实验中显微图像分析教学设计

显微图像分析在基础医学研究中发挥着重要作用,兰州大学基础医学院实验教学中心在医学形态学实验课程中设置了相关内容。基于课时和授课对象的先修知基础等情况,该课题设计了有针对性的教学方案。方案总体着重于对基本原理的宏观和直观介绍,并通过案例实践熟悉基本操作方法从而更进一步体会、理解基本原理。这种教学设计,使学生在较短时间内掌握显微图像分析的基本原理和操作方法,满足医学生创新科研的现实需求,同时也为今后更深层次的图像分析学习奠定基础。

抗菌肽2IQ3及其突变体的原核表达与纯化

目的将抗菌肽2IQ3及其突变体基因进行原核表达,经纯化获得目的蛋白。方法根据2IQ3氨基酸序列及大肠杆菌偏爱密码原则设计并合成2IQ3基因编码的核苷酸片段,采用重叠延伸聚合酶链反应法扩增抗菌肽2IQ3及突变体基因,克隆至载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,分析重组蛋白的表达形式,纯化重组蛋白。结果构建的抗菌肽2IQ3及其突变体基因所表达的重组蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,有特异性目的条带出现,纯化的重组蛋白纯度达97%左右,浓度为0.502 mg/m L。结论成功构建了抗菌肽2IQ3及其突变体基因的原核表达体系,并在大肠杆菌中进行表达、纯化,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。

新冠疫情下医学生物安全教育与实验室管理

新型冠状病毒疫情的流行给全球人民健康带来了巨大威胁,生物安全防控问题再一次引起国家的高度重视,对于医护人员感染的防护提出了更高要求,由此对于医学生的生物安全教育和生物安全实验室的管理有必要进行重新审视并进一步完善。以兰州大学医学部为例,在总结了高校开展工作的现状与已取得成绩的基础上,针对尚存的问题和新冠疫情下的新要求,从教育体系、管理体系和保障体系三方面对医学生物安全教育与实验室管理进行再思考,提出建议与实施方案,期望在不断的改进下,使我国医学院校在培养医务人才的初期,在生物安全防控的教育与管理方面更上一层楼。

模糊物元评价方法在区块类别划分中的应用

在考虑有效厚度、砂体发育特征、油水同层发育状况及储层物性参数等评价指标的基础上,采取层次分析方法确定出评价指标的权重,利用模糊物元评价方法计算了各个区块的综合评价指数。根据综合评价指数的大小,利用累计概率曲线的分类功能将S油田40个区块划分为3种类型:一类区块河道砂发育,油层厚度大,储层物性好;二、三类区块发育薄层席状砂,储层物性差。

改善疏水缔合聚合物油藏适应性方法及其效果

为适应高矿化度溶剂水配制聚合物溶液实际需求,以油藏工程理论为指导,以仪器检测和物理模拟为技术手段,开展了疏水缔合型聚合物溶液视黏度及其影响因素研究。评价了表面活性剂抑制和促进聚合物分子链间缔合作用效果,进行了表面活性剂与缔合聚合物组合和注入方式对聚合物溶液渗流压力影响物理模拟研究。结果表明:非离子型表面活性剂(DWS)可以抑制聚合物分子链间的缔合作用,重烷基苯石油磺酸盐(HABS)表面活性剂可以促进聚合物分子链间缔合作用;采取"聚合物/DWS表面活性剂混合液+HABS表面活性剂溶液"段塞组合和交替注入方式,可以抑制聚合物溶液注入油藏过程中聚合物分子链间的缔合作用,这不仅改善了缔合聚合物溶液的注入能力,而且增强了其深部液流转向效果。

产香真菌分离代谢及其在烟叶醇化中的应用

以提升醇化烟叶品质为目的,从烟叶表面分离到一株产香真菌,对代谢成分进行分析,并将该菌代谢物调配成相应的醇化剂进行烟叶醇化的初步应用。结果表明:该菌经分子鉴定为Fusarium sp.HY-1,同时,该菌能产果香类物质,其代谢产物主要为酮类及醇类,其中3-羟基-2-丁酮及4-庚醇含量较高。将配制的醇化剂应用于上部烟叶的烟叶醇化过程中,能有效的提升烟叶香气量及其丰富性。