GST pull-down联合质谱分析筛选番茄SLSPRH1的互作蛋白

促分裂源活化蛋白激酶(MAPK)在植物逆境应答过程中发挥重要的作用。SLSPRH1是一种丝氨酸脯氨酸富集蛋白质,作为番茄SlMPK1下游靶蛋白,参与逆境响应。然而,SLSPRH1的作用机制尚不明确。为确定SLSPRH1可能的相作蛋白,以进一步研究其作用机制,构建pGEX-4T-1-SLSPRH1重组载体并转化BL21表达菌,经IPTG诱导表达和GST柱纯化,获得GST-SLSPRH1融合蛋白。通过蛋白质体外结合GST pull-down试验结合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析筛选SLSPRH1的互作蛋白,共鉴定出15种蛋白质与其互作。生物信息学分析表明SLSPRH1互作蛋白主要参与植物各种代谢过程和胁迫应激反应。